骨髓间充质干细胞及其复合物对肌腱早期愈合影响的实验研究

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1、骨髓间充质干细胞及其复合物对肌腱早期愈合影响的实验研究.L.编辑。作者：韩桂全，唐述森，刘晓伟，韩振学，李志仙【摘要】［目的］探讨骨髓间充质干细胞（BMSCs）与纤维蛋白胶复合体对兔肌腱早期愈合的影响，为临床应用提供依据。［方法］家兔骨髓间充质干细胞离体培养、纯化、扩增后与纤维蛋白胶混合。36只家兔分为实验组和对照组，兔跟腱横断制作肌腱断裂模型。实验组应用自体BMSCs复合纤维蛋白胶移植于肌腱损伤区，对照组仅以纤维蛋白胶置于肌腱损伤区。分别于术后1周，3周，6周及12周对移植部位进行大体标本观察，细

2、胞示踪、组织学检查、免疫组织化学检查、形态测定分析及生物力学测定。［结果］实验组相比对照组肌腱大体观察粘连差，肌腱活动性好。3周后纤维蛋白载体即降解，细胞示踪结果显示标记的骨髓间充质干细胞至少6周内仍可保持活性并存在于肌腱组织中，但之后逐渐扩散。3周时，实验组与对照组相比胶原纤维排列更为有序，且胞核形态结构更规则，但在6周及12周时，实验组与对照组胞核参数测定无统计学意义。3周时实验组比对照组具有更强的的生物力学特性，但之后则差别不明显。［结论］肌腱损伤后即给以腱内BMSCs复合纤维蛋白胶治疗可促进

3、肌腱愈合早期组织形态学及生物力学修复。【关键词】骨髓间充质干细胞；肌腱；愈合Abstract:［Objective］ToinvestigatetheeffectofrabbitBMSCsplified.Therabbitsental(E)andcontrol(C)groups.Theinjurymodelidsubstanceoftheachillestendon.Theexperimentalgroupplantedensorphology,celltracing,histologicalasse

4、ssment,immunohistochemistrystudies,morphometricanalysis,andmechanicaltesting.［Results］Thegrossmorphologyofthetendonsshoentalgrouphadlesseradhesionandbetterreactivenessthanthatinthecontrolgroup.Thefibrinhaddegradedat3arroesenchymalstemcellsremainedviabl

5、eandpresentedintheintratendinousregionforatleast6orediffuseatlatertimepoints.At3oreorganizedandthereorphometricnuclearparametersinthetreatmentgroup.At6and12orphometricnuclearparameters.Biomechanicaltestingshoprovedmodulusinthetreatmentgroupasparedepoin

6、t.［Conclusion］Intratendinouscelltherapyarroesenchymalstemcellsfolloarytendonrepaircanimprovehistologicalandbiomechanicalparametersintheearlystageoftendon-healing.Keyesenchymalstemcells；tendons；healing肌腱损伤是外科的常见问题之一，其修复是一个复杂的过程，关键在于损伤后的修复不仅要达到肌腱纤维连续性及强度

7、的修复，而且要使肌腱与其周围组织的活动性达到良好，关节功能得以恢复。肌腱损伤术后大多需要外固定，由于不能早期恢复功能锻炼，使肌腱愈合面临很大风险，例如肌腱粘连及肌腱断裂。本研究应用自体骨髓间充质干细胞(bonemesenchymalstemcells,BMSCs)与纤维蛋白胶复合体修复家兔肌腱损伤,观察其对肌腱早期愈合的影响，为临床应用提供理论依据。1材料与方法1.1实验对象健康家兔(潍坊医学院动物中心提供)36只,体重1.5～2.5kg,无感染、瘢痕和皮肤撕裂等情况。1.2BMSCs的培养:将家兔

8、以3%戊巴比妥钠经耳缘静脉常规麻醉,取20ml注射器经胫骨近端内侧进针,缓慢抽取骨髓1～3ml,以贴壁法分离、培养BMSCs,常规消化传代。1.3BMSCs胞浆标记：按照厂家说明用CFDA-SE（荧光胺反应琥柏酰亚胺酯）示踪细胞。第三代BMSCs细胞在PBS中清洗，在10-μmol/LCFDA-PBS溶液中再次悬浮，然后37℃下孵育10min。于37℃下在完全培养基中悬浮30min，确保探针完全修饰。1.4实验分组:将36只家兔分为实验组和对照组,每组18只。切开家兔