大孔树脂对水芹菜总黄酮的分离纯化研究论文

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1、大孔树脂对水芹菜总黄酮的分离纯化研究论文唐巧玉，周毅峰，任甜甜，江曼【摘要】目的研究大孔树脂分离水芹菜总黄酮的条件。方法利用静态吸附方法筛选分离水芹菜总黄酮的最适大孔树脂，利用动态吸附方法研究最适大孔树脂分离水芹菜总黄酮的条件。结果大孔树脂AB-8是吸附水芹菜总黄酮的效果最好，最佳分离条件是：上样速率是1.5ml·min-1，5BV80%的乙醇以1.0ml·min-1的速率洗脱。结论利用大孔吸附树脂AB-8在以上最佳条件下，可使9.98%水芹菜总黄酮纯度提高到25.8%。【关键词】水芹菜；黄酮；大孔树脂Abstract：ObjectiveT

2、ostudytheconditionofseparatingtotalflavonoidsinbengalacroporousresin.MethodsUsingstaticabsorption,optimummacroporousresinicabsorption,theconditionofseparatingtotalflavonoidsinbengalummacroporousresinummacroporousresinumcoditionplefloacroporousresinl·min-1,andthetotalflavon

3、oidsabsorbedonmacroporousresincanelutedby80%ethanolof5BV,theelutionspeedl·min-1.ConclusionUsingup9.98%.Keyin，用蒸馏水洗至中性。再用2BV的5%HCl冲洗，并关闭30min，最后用蒸馏水洗至中性，处理完毕后用蒸馏水浸泡保存。2.2水芹菜黄酮粗提液的制备称取一定量的样品，料液比1∶35，乙醇浓度80%，在90℃的水浴锅中回流提取2.5h，5000r/min离心15min，取其上清液。将上清液在旋转蒸发仪中浓缩，浓缩液5000r/min离

4、心15min，取其上清液，即得到黄酮粗提液。2.3水芹菜黄酮测定方法［10］水芹菜黄酮含量测定采用以芦丁为对照品的NaNO2-Al(NO3)3-NaOH显色比色法。2.4大孔树脂静态吸附称取各种滤干湿大孔树脂1g，放入相同型号的烧杯中,加入黄酮粗提液20ml，放入电动振荡器上,振荡吸附24h，过滤，吸取吸附后的溶液0.4ml测其吸光度，计算出树脂在室温下的吸附量和吸附率。取吸附饱和的树脂，加入80%的乙醇20ml，浸泡振摇4h，过滤，取解吸后的溶液0.3ml，测定滤液中黄酮的浓度，根据黄酮解吸量计算解吸率。2.5AB-8大孔树脂动态吸附上柱

5、速率测定：取处理好的AB-8大孔吸附树脂8g，装柱约10cm高。将6份50ml0.3mg·ml-1的黄酮粗提液分别以0.5，1.0，1.5，2.0，2.5，3.0ml·min-1的速率进行上柱，再用5BV的水洗柱，80%乙醇5BV洗脱，然后测定其吸附率。乙醇解吸浓度确定：将5份50ml0.3mg·ml-1的黄酮粗提液分别以1.5ml·min-1的速率进行上柱，再用5BV的水洗柱，分别用5BV20%，40%，60%，80%，95%的乙醇进行洗脱，然后测其解吸率。乙醇洗脱体积确定：将6份50ml0.3mg·ml-1的黄酮粗提液分别以1.5ml·

6、min-1的速率进行上柱，再用5BV的水洗柱，分别用80%的乙醇2，4，5，6，7，8BV进行洗脱，然后测其解吸率。乙醇洗脱速率测定：将5份50ml0.3mg·ml-1的黄酮粗提液分别以1.5ml·min-1的速率进行上柱，再用5BV的水洗柱，分别以0.5，1.0，1.5，2.0，2.5ml·min-1的速率进行洗脱，洗脱剂为80%的乙醇5BV，然后测其解吸率。3结果3.1吸附量的确定大孔吸附树脂的性能对黄酮的纯化效果有一定的影响，是由其物理和化学结构所决定,树脂的孔径、比表面积及极性等是影响吸附性能的重要因素，树脂吸附的本质是吸附剂和吸附

7、质之间的范德华力，几种树脂的型号和物理结构参数见表1。表14种大孔树脂的物理性质以“2.4”项的方法对X-5，AB-8，NKA-9，NKA4种大孔吸附树脂对水芹菜黄酮水溶液的吸附量做测定。从表2可看出，AB-8大孔吸附树脂对水芹菜黄酮水溶液的吸附量最大，X-5次之。说明对水芹菜总黄酮的树脂柱的吸附应优先选用弱极性的树脂。从表3可看出，AB-8大孔吸附树脂对水芹菜黄酮水溶液的解吸率最大，NKA次之。综合考虑各树脂的吸附和解吸性能，选用AB-8大孔吸附树脂来分离纯化水芹菜黄酮粗提物。表24种大孔树脂吸附性能的比较，表34种大孔树脂解吸性能的比较

8、（略）3.2上样速率的选择上样速率一般都要求较慢，这是因为流速过快，吸附效果差，吸附不完全。但是流速过慢，会延长生产周期，增加成本。因此有必要选择一个合适的上样速率使之既能达到一