genistein对人卵巢癌细胞系3ao抑制增殖的作用及机制的探讨

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1、Genistein对人卵巢癌细胞系3AO抑制增殖的作用及机制的探讨作者：田爽　辛晓燕　黄艳红　,高旭,张潍，袁鹏【关键词】料木黄酮；卵巢肿瘤；细胞系；细胞凋亡　　InhibitoryeffectsofgenistEinonproliferationinhumanovariancarcinomacellline3AOandrelatedmechanism【Abstract】AIM:ToinvestigatetheeffectsofgenistEInonproliferationinhibitionandapoptosisinductioninh

2、umanovariancarcinomacellline3AOandtoexploreitsanticancermechanism.METHODS:Afterculturedeperiods,thecellsedbytransmissionelectronmicroscope(TEM)aftertheadministrationofgenistein.ApoptosiseansofterminaldeoxynucleotidyltransferasemediateddUTPbiotinnickendlabeling(TUNEL)method.

3、Apoptosisrateandcellcycledistributionof3AOcellseasuredbyfloetry(FCM).Theexpressionofestrogenreceptorβproteineasuredbyimmunocytochemicaltechnique.RESULTS:After3AOcellsedependentgroonstrated.Inhibitionpercentageincellsexposedto10mg/Land20mg/Lgenisteinfor72honstratedbeforeG1/G

4、2phase.Moreovertheapoptosisedependent.Thecharacteristicmorphologicalchangesofapoptosisingenisteintreated3AOcellsedependentlyinhibitgroacellline3AOthepotentialpaths;cellline;apoptosis【摘要】目的：研究植物雌激素染料木黄酮对人卵巢癌细胞系3AO细胞增殖的抑制作用和凋亡的诱导作用，探讨其抗癌作用的机制.方法：应用MTT法检测不同浓度染料木黄酮对3AO细胞的生长抑制作用

5、，电镜观察药物作用后细胞的超微结构改变，TUNEL法确定凋亡，流式细胞仪检测细胞周期、定量分析凋亡，免疫细胞化学技术检测雌激素β受体的表达.结果：3AO细胞经不同浓度染料木黄酮处理后，细胞生长明显受到抑制，且这种抑制作用随时间延长及浓度增高而增强，10mg/L和20mg/L染料木黄酮作用72h后，抑制率分别达到54.24%和65.99%.染料木黄酮阻断3AO细胞生长于G2/M期，在G0/G1前出现典型亚二倍体凋亡峰，且凋亡呈时间依赖性.电镜观察到用药后凋亡细胞典型的形态学特征.TUNEL法观察到大量阳性凋亡细胞.免疫细胞化学法检测到用药后，E

6、Rβ表达明显加强.结论：染料木黄酮对3AO细胞的生长有明显的呈时间及浓度依赖性的抑制作用，并诱导其发生凋亡.染料木黄酮可能通过雌激素β受体途径发挥药理作用，诱导卵巢癌细胞发生凋亡.【关键词】染料木黄酮；卵巢肿瘤；细胞系；细胞凋亡染料木黄酮是异黄酮类化合物，化学名为4′，5，7三羟基异黄酮，它广泛存在于包括大豆在内的多种蔬菜和水果中［1］.实验研究显示，染料木黄酮在乳腺癌、前列腺癌、白血病、淋巴瘤等多种肿瘤的发生、发展中有多重抑瘤效应［2］，已成为国际抗癌药物的研究热点.其主要防癌机制为调节雌激素受体、抑制细胞代谢关键酶活性、增加抗氧化酶的活性

7、及抑制血管生成作用等［3-7］.因而，染料木黄酮对肿瘤的化学预防及治疗作用受到人们的广泛关注.卵巢癌是激素相关性肿瘤，是一种常见且恶性程度较高的妇科肿瘤.本实验采用人卵巢粘液性囊腺癌细胞系3AO，研究染料木黄酮对该细胞系增殖和凋亡的影响，为其应用于卵巢癌的临床治疗提供实验依据.1材料和方法1.1材料1.1.1细胞培养人卵巢粘液性囊腺癌细胞系3AO由第四军医大学西京医院妇产科实验室常规保存，用含100mL/L新生牛血清(杭州四季青)的DMEM(美国Gibco)培养基培养细胞，于37℃，含50mL/LCO2培养箱中培养传代，选用对数生长期细胞实验

8、.1.1.2实验试剂染料木黄酮购于美国Sigma公司，纯度为98%，用分析天平称取染料木黄酮，用DMSO配成储备液，置于-20℃冷冻保存.细胞给药前，用DMEM培养