紫玉盘提取物体外抗肿瘤活性的实验研究论文

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1、紫玉盘提取物体外抗肿瘤活性的实验研究论文.freelicrocarpaChamp.exBenth是番荔枝科紫玉盘属植物，药用全株，具有祛风除湿、行气健胃、止痛、化痰止咳之功效.freelicrocarpaChamp.exBenth。紫玉盘茎用乙醇提取得其总提取物(以下简称UAAE),总提取物经系统溶剂分离法处理得到石油醚部位(以下简称UPE)、氯仿部位(以下简称UCE)、醋酸乙酯部位(以下简称UEE)、正丁醇部位(以下简称UBE)和乙醇部位(以下简称UAE)。临用前以蒸馏水溶解,无菌过滤后备用。1.2肿瘤细胞株宫颈癌细胞株Hela、人胃癌细胞株SGC7901购自

2、上海细胞生物研究所细胞库，人肝癌细胞株7404由广西医科大学药学院药理教研室提供。1.3试剂MTT(四甲基噻唑蓝)为德国Sigma公司产品;FBS(胚胎牛血清)为美国Hyclone公司产品;RPMI1640和DEME培养基为GIBCO公司产品;Trypsin(胰蛋白酶)由天津市灏洋生物制品有限责任公司提供;DMSO由天津汇英化学试剂有限公司提供。1.4仪器ThermoForma型CO2培养箱，美国赛默飞世尔科技。Clympus型倒置显微镜，日本产。Biocell型酶标仪，奥地利产。3001型培养皿，美国产。HV-50自动高压灭菌器，日本产。2方法2.1MTT法测

3、定在96孔培养板(NUNC)中每孔加入200μl(含有5000个/ml肿瘤细胞)含10%FBS的RPMI1640培养液，细胞置37℃，10%CO2培养24h后，实验组分别加入最终浓度为10，20，40μg/ml提取的培养液，对照组则加入等体积溶剂的培养液，每组4孔。置37℃，10%CO2培养5d后，弃去上清液，加入200μl/孔新鲜配置的含0.2mg/mlMTT的无血清培养液，37℃继续培养4h，弃上清液，加入200μlDMSO，振荡混匀后，在酶标仪上以波长为550nm，参比波长为450nm测定OD值，重复3次，按下式计算药物对肿瘤细胞生长的抑制率。2.2药物对

4、肿瘤细胞生长的抑制率的计算方法5肿瘤细胞生长抑制率(%)=(1-实验组平均OD值/对照组平均OD值)×100%。2.3统计学方法所有的测定指标均采用均数加减标准差表示，用PEMS软件进行分析，计算相应的统计参数，两组间的均数比较采用t检验。以P0.05，P0.01表示有统计意义。3结果3.1总提取物(UAAE)对肿瘤细胞的抑制作用UAAE对宫颈癌细胞株Hela、人胃癌细胞株SGC7901、人肝癌细胞株Bele7404的增殖均有显著的抑制作用，且抑制作用呈剂量依赖关系。UAAE对人胃癌细胞株SGC7901增殖的抑制作用最强。结果见表1。3.2石油醚部位提取物(UP

5、E)对肿瘤细胞的抑制作用UPE对3种肿瘤细胞株的增殖均有抑制作用。在浓度为40μg/ml时，对人胃癌细胞株SGC7901和人肝癌细胞株Bele7404的抑制率达到50%以上。但对宫颈癌细胞株Hela的抑制作用较弱。结果见表2。3.3氯仿部位提取物(UCE)的抑制作用UCE对3种肿瘤细胞株的增殖均有显著的抑制作用。在浓度为10μg/ml时，对3种肿瘤细胞株的抑制率均达到41%以上，在浓度为40μg/ml时，抑制率均达到60%以上。结果见表3。3.4醋酸乙酯部位提取物(UEE)的抑制作用UEE对3种肿瘤细胞株的增殖均有抑制作用。在浓度为10μg/ml时，对宫颈癌细胞

6、株Hela和人胃癌细胞株SGC7901的抑制率达到50%以上。但对人肝癌细胞株Bele7404的抑制作用较弱。结果见表4。表1不同浓度UAAE对肿瘤细胞的抑制作用表2不同浓度UPE对肿瘤细胞的抑制作用表3不同浓度UCE对肿瘤细胞的抑制作用表4不同浓度UEE对肿瘤细胞的抑制作用3.5正丁醇部位提取物(UBE)的抑制作用UBE对3种肿瘤细胞株的增殖均有抑制作用。但对人肝癌细胞株7404的抑制作用不强。结果见表5。表5不同浓度UBE对肿瘤细胞的抑制作用3.6乙醇部位提取物(UAE)的抑制作用UAE对3种肿瘤细胞株的增殖均有直接的抑制作用。在浓度为40μg/ml时，对3

7、种肿瘤细胞株的增殖有显著的抑制作用。结果见表6。表6不同浓度UAE对肿瘤细胞的抑制作用4讨论MTT法具有经济、快速、高效的优点,是目前最常用的体外抗肿瘤药物筛选方法，我们采用MTT法，选用宫颈癌细胞株Hela、人胃癌细胞株SGC7901和人肝癌细胞株7404，对紫玉盘总提取物及5个不同极性部位进行体外抗肿瘤活性的实验研究。结果表明以亲脂性成分为主的石油醚部位对人肝癌细胞株Bele7404抑制作用较强;以极性较大成分为主的醋酸乙酯部位、正丁醇部位、乙醇部位提取物对宫颈癌细胞株Hela和人胃癌细胞株SGC7901有显著的抑制作用,而氯仿部位则对上述3种肿瘤细胞株的增

8、殖均有显著的抑制作用,是