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时间:2018-11-21
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1、细菌分离培养基(g):牛肉膏4蛋白胨10葡萄糖l0琼脂15水1L,PH=7.0—7.2;放线菌分离培养基(g):可溶淀粉10硝酸钾1磷酸氢二钾0.5硫酸镁0.5硫酸亚铁0.01水1L,PH=7.0-7.2。抑制剂:重铬酸钾0。1%;真菌分离培养基(g):葡萄糖5蛋白胨10酵母膏2麦芽糖0.5水lL,PH=6.0-6.5抑制剂青霉素200U/ml链霉素100U/ml。方法Ⅱ分离细菌牛肉膏蛋白胨牛肉膏0.3g 蛋白胨1g 氯化钠0.5g 琼脂2g 自来水100mL pH7.0~7.2 灭菌
2、1.05kg/cm2,22min放培养基线菌高氏一号培养基可溶性淀粉2g KNO30.1g K2HPO40.05g MgSO4•7H2O0.05g NaCl0.05g FeSO4•7H2O0.001g(母液) 琼脂2g 自来水100mL pH7.2~7.4 灭菌1.05kg/cm2,20min 配制时,先用少量冷水,将淀粉调成糊状,倒入少于所需水量的沸水中,在火上加热,边搅拌边依次逐一溶化其他成分,溶化后,补足水分到100ml,调pH。真菌孟加拉红培养基 蛋白胨 5g 葡萄糖
3、 10g 磷酸二氢钾 1g 硫酸镁(MgSO4·7H2O) 0.5g 琼脂 20g 1/3000孟加拉红溶液 100mL 蒸馏水 1000mL 氯霉素 0.1g 上述各成分加入蒸馏水中溶解后,再加孟加拉红溶液。另用少量乙醇溶解氯霉素,加入培养基中, 分装后,121℃灭菌20min。2.挑种纯化琼脂平板蛋白胨 10g 牛肉膏 3g氯化钠 5g 琼脂 15~20g 蒸馏水 1000mL将除琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水内,加入15%氢氧化钠溶液约2mL,校正pH至7.2~7.4。加入
4、琼脂,加热煮沸,使琼脂溶化。分装烧瓶,121℃高压灭菌15min。 注:此培养基可供一般细菌培养之用,可倾注平板或制成斜面。如用于菌落计数,琼脂量为1.5%;如作成平板或斜面,则应为2%。取营养琼脂(PH7.6),加热使其溶解待冷至45-50℃,以灭菌操作于每100毫升营养琼脂加灭菌脱纤维羊血或兔血5-10毫升,轻轻摇匀,立即倾注于平板或分装试管,制成斜面备用。3.保存4.菌株对有机物分解能力试验⑴淀粉培养基牛肉膏0.5g蛋白胨1g氯化钠0.5g可溶性淀粉0.2g 水100mL pH7.0~
5、7.2 琼脂2g 灭菌1.05kg/cm2,20min高温灭菌后倒平板。⑵明胶(Gelatin)液化试验:明胶高层 明胶(Gelatin)液化试验 有些细菌具有明胶酶(亦称类蛋白水解酶),能将明胶先水解为多肽,又进一步水解为氨基酸,失去凝胶性质而液化。 试验方法:挑取18~24h待试菌培养物,以较大量穿刺接种于明胶高层约2/3深度或点种于平板培养基。于20~22℃培养7~14天。明胶高层亦可培养于36±1℃。每天观察结果,若因培养温度高而使明胶本身液化时应不加摇动、静置冰箱中待其凝固后、再
6、观察其是否被细菌液化,如确被液化,即为试验阳性。平板试验结果的观察为在培养基平板点种的菌落上滴加试剂,若为阳性,10~20min后,菌落周围应出现清晰带环。否则为阴性。⑶鉴别性培养基用于各种纤维素分培养基为纤维素选择培养基、滤纸底物和纤维素天青培养基等。从经济效益考虑,现在用刚果红法,
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