藻酸双酯钠预防术后肠粘连的实验研究论文

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1、藻酸双酯钠预防术后肠粘连的实验研究论文【摘要】目的观察藻酸双酯钠预防术后肠粘连的作用。方法选用雌性MP)2和金属蛋白酶组织抑制物(TIMP)2水平进行检测。结果与生理盐水组比较,藻酸双酯钠组和透明质酸钠组均能降低术后肠粘连的程度(H=21.98,P0.05);藻酸双酯钠组和透明质酸钠组MMP2的表达显著高于生理盐水组(F=29.34,q=5.27、10.83,P0.01);藻酸双酯钠组和透明质酸钠组TIMP2的表达显著低于生理盐水组(F=83.22,q=10.51、18.17,P0.01)。结论藻酸双酯钠具有预防术

2、后肠粘连的作用。【关键词】藻酸双酯钠肠粘连基质金属蛋白酶类金属蛋白酶组织抑制物[ABSTRACT]ObjectiveToassesstheeffectofpolysaccharidesulphate(PSS)onpreventionofpostoperativeintestinaladhesions.MethodsThisstudyconsistedof36maleMP2)andtissueinhibitorsofmatrixmetalloproteinase2(TIMP2)inadhesivetissuesined.

3、Resultsparedalsaline,bothPSSandsodiumhyaluronateevidentlyreducedtheextentofpostoperativeintestinaladhesions(H=21.98,.freeletalloproteinases;Tissueinhibitorsofmatrixmetalloproteinase外科盆腹腔术后肠粘连一直是临床工作中的一大难题.freel,打开腹腔,在距回盲部5cm处取10cm长一段回肠,用干纱布反复轻擦拭小肠浆膜层使其受损(面积约0.4cm×

4、10.0cm),至其表面有针尖样出血点。滴无水乙醇于创面上,无齿镊夹持盲肠系膜动脉2min,使局部缺血3,然后分别在A、B、C组创面上涂布藻酸双酯钠、透明质酸钠及生理盐水各2mL,分两层关腹。术后禁食12h,各组在相同条件下饲养。1.3检测指标与方法1.3.1肠粘连程度比较术后14d处死动物,取腹部U形切口,进行大体粘连程度分极,分级标准参考NAIR等4所报道的5级分类法确定。1.3.2MMP2和TIMP2测定术后14d取粘连肠壁组织,石蜡包埋,采用免疫组化SP法进行测定。一抗及SP试剂盒均购自北京中杉金桥生物技术有

5、限公司,MMP2试剂盒购自SantaCruz公司,TIMP2试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司。3μm厚连续切片,一张行苏木精伊红染色,余者采用PV6001/6002二步法行免疫组化染色,染色步骤按说明进行。免疫组化结果用自动图像分析软件进行分析。每张切片保持光线强度不变,随机选择3个视野(400倍)输入计算机进行分析,以平均吸光度(A)值作为MMP2、TIMP2的表达强度。1.4数据处理数据采用SPSS10.0统计软件包进行统计分析。粘连程度分级比较采用秩和检验;MMP2和TIMP2表达的比较采用方差分

6、析。2结果2.1肠粘连程度大体观察术后14d,各组动物均存活,无切口感染,与生理盐水组比较,藻酸双酯钠组和透明质酸钠组均能降低术后肠粘连的程度(H=21.98,P0.05);而藻酸双酯钠组与透明质酸钠组比较,无显著性差异(P0.05)。见表1。表1藻酸双酯钠对术后肠粘连的影响(略)2.2各组免疫组化染色检测粘连组织MMP2和TIMP2表达的着色部位均在细胞浆,呈细颗粒状。其中MMP2的表达生理盐水组较弱,藻酸双酯钠组较强,透明质酸钠组的表达介于两者之间;而TIMP2的表达在生理盐水组较强,藻酸双酯钠组较弱,透明质酸

7、钠组的表达介于两者之间。2.3MMP2和TIMP2的表达粘连组织中MMP2含量均有不同程度增加,其中藻酸双酯钠组和透明质酸钠组显著高于生理盐水组(F=29.34,q=5.27、10.83,P0.01);藻酸双酯钠组和透明质酸钠组TIMP2表达显著低于生理盐水组(F=83.22,q=10.51、18.17,P0.01)。见表2。表2各组粘连组织中MMP2和TIMP2表达(略)3讨论创伤的愈合过程包括炎症反应、细胞迁移、血管生成、增生和组织重建,而ECM的蛋白水解作用是其中的关键。已发现的几种内源性蛋白酶包括MMP

8、2都具有广泛的蛋白水解活性,它们在成熟的正常组织中低水平表达;但对于那些在正常情况下反复发生重建的组织,例如月经期中的子宫内膜组织中,则有较高的表达水平5。研究发现,腹腔间皮细胞、成纤维细胞和各种腹腔脏器的浆膜组织中,存在MMP2和TIMP2的活性表达。对人和大鼠因子宫内膜异位症和腹膜炎施行手术治

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