循环中内皮祖细胞与原发性高血压的关系

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1、循环中内皮祖细胞与原发性高血压的关系作者：蓝景生，黄照河，潘兴寿，王小庆，罗初凡，杨燕华【摘要】目的探讨循环内皮祖细胞(EPCs)数量和功能与原发性高血压的关系。方法对34例初诊原发性高血压患者以及30例健康人采用密度梯度离心法获取外周血单个核细胞，将其接种在人纤维连接蛋白包被的培养板，培养7天后，收集贴壁细胞，多波长激光共聚焦显微镜鉴定FITC-UEA-Ⅰ和DiI-acLDL双染色阳性细胞为正在分化的EPCs，流式细胞仪检测其表面标志进一步鉴定EPCs，倒置荧光显微镜下计数。采用MTT比色法、改良的Boyden小室、粘附能力测定实验分别观察EPCs的增殖能力、迁移能力、粘

2、附能力。结果原发性高血压患者循环中EPCs数量比治疗前明显减少（P<0.01），降压达标后原发性高血压患者EPCs数量增加，但与对照组相比，达标后原发性高血压患者EPCs数量仍然少(P<0.05)。原发性高血压患者EPCs的增殖、迁移、贴壁能力受损(P均<0.01)；降压达标后的原发性高血压患者EPCs的增殖、迁移、贴壁能力受损没有完全恢复(P均<0.01)。结论原发性高血压患者循环EPCs数量减少，功能受损；血压增高是循环EPCs数量和功能改变的原因之一，循环EPCs数量和功能的改变可能还参与原发性高血压的发生和发展。【关键词】高血压，原发性；内皮

3、细胞；病理过程；生理过程　　Abstract：ObjectiveTostudytherelationshipbetarydiagnosedasessentialhypertensionand30healthyindividualsicroscope，EPCsproliferationandmigrationodifiedBoydenchamberassay，respectively，EPCsadhesionassayedbyreplatingcellsonfibronectin-coateddishes，thencountingtheadhesioncellsicrosco

4、pe.ResultsThenumberofcirculatingEPCsinpatientsentbefore(P<0.01)，anelevatedEPCsberofEPCsigratoryandadhesivecapacityinpatientsedegreeafterthepatientsbloodpressurepairedinessentialhypertensionpatients，andcirculatingEPCsmaybeinvolvedinthemechanismofessentialhypertension.　　Keyary;endothelial

5、cell;pathologicalprocesses;physiologicalprocesses　　最近研究提示［1，2］：血管内皮祖细胞的数量和功能受损与心血管的危险因素呈负相关，尽管高血压是一个重要独立的心血管的危险因素，但原发性高血压与血管内皮祖细胞的关系尚未阐明。本组观察初诊原发性高血压患者及其降压达标后循环内皮祖细胞数量和功能的变化，探讨循环内皮祖细胞数量和功能与原发性高血压的关系。　　1对象与方法　　1.1研究对象2005年4月～2006年1月在中山大学附属第一医院门诊和住院诊疗的患者，根据2004年中国高血压防治指南初诊单纯原发性高血压患者34例，排除高脂血

6、症、糖尿病、冠心病、脑血管病等其他合并症，经降压治疗后有29例达标，在治疗前和降压达标后1个月测定循环内皮祖细胞数量和功能。以30例年龄相匹配的健康人为对照组。　　1.2方法　　1.2.1内皮祖细胞的鉴定与计数自肘前静脉采集外周血标本并置于EDTA管抗凝。循环内皮祖细胞定义为表达CD34+的单个核细胞，且单个核细胞体外培养，荧光显微镜鉴定FITC-UEA-I和DiI-acLDL双染色阳性细胞为内皮祖细胞。采用FIFC标记的具有高亲和力的鼠抗人CD34单克隆抗体(美国Pharmingan公司)与采集的血样本共育15min以标记CD34+细胞。应用流式细胞仪(Elite，Bec

7、kman-Counter美国)计数CD34+细胞数目。将单个核细胞接种在包被有纤维连接蛋白的培养板，DMEM培养基培养1周，将细胞与DiI-acLDL(10μg/ml)37℃孵育1h，以检测内皮祖细胞对DiI-acLDL的摄取。然后用2%多聚甲醛固定10min，将FITC-UEA-I(10μg/ml)加入上述标本37℃孵育1h，激光共聚焦显微镜鉴定UEA-I和DiI-acLDL双染色阳性细胞为内皮祖细胞。　　1.2.2内皮祖细胞增殖能力试验如上述方法搜集贴壁细胞并计数。再将等量EPCs接种到包被有人纤维连接蛋白96