预处理对在体大鼠冠脉血管内皮细胞的保护及机制探讨论文

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1、预处理对在体大鼠冠脉血管内皮细胞的保护及机制探讨论文谭志胜杨海捷陈代陆【摘要】目的探讨缺血预处理(IPC)对缺血再灌注(I/R)所致的血管内皮细胞(VEC)损伤是否有保护作用及蛋白激酶C(PKC)在其中的作用。方法实验大鼠分为5组:对照组、缺血再灌注组(I/R组)、预处理组(IPC组)、多黏菌素B(PKC抑制剂)+I/R组、多黏菌素B+IPC组。测定各组一氧化氮(NO)、内皮素(ET)、循环内皮细胞(CEC)、丙二醛(MDA),并作冠脉VEC透射电镜观察。结果I/R后血浆中NO明显减少,ET明显升高,NO/ET值明显降低,CEC明显增多,MDA明显

2、升高(P0.05或P0.01)。IPC能逆转上述改变,使血浆中NO增多,ET降低,NO/ET值恢复,CEC数量减少,MDA含量降低(P0.05或P0.01)。PKC的抑制剂多黏菌素B并不加重I/R的上述改变,但是能阻断IPC的作用。电镜显示:I/R后VEC的超微结构严重损伤,IPC能明显减轻VEC的结构损伤。结论I/R导致VEC结构和功能的严重损伤,IPC能减轻I/R后VEC的结构和功能损伤,PKC可能参与了这一过程。【关键词】缺血再灌注损伤;缺血预处理;血管内皮细胞;蛋白缺血预处理(IPC)是指一次或多次短暂缺血再灌注(I/R)对随后较长时间的I

3、/R心肌有保护作用.freela公司产品);二磷酸腺苷(ADP,Amresco进口分装);一氧化氮(NO)测试盒(购自军事医学科学院);内皮素(ET)放免试剂盒(购自北京东亚免疫技术研究所);LPO硫代巴比妥酸(TBA)法试剂盒(由同济医科大学协和医院心血管病生室提供)。1.3实验动物模型和分组正常DA)测定取心肌组织400mg,加入4ml磷酸盐缓冲液,制成10%的心肌匀浆,而后按改良硫代巴比妥酸法(TBA法)测定。1.4.5VEC超微结构观察在体再灌结束后,迅速取出心脏置于盛有氧饱和的KH灌流液中,用灌流液经主动脉逆行冲洗冠脉,然后取结扎远端含

4、LAD的左室心肌小块,置于2.5%戊二醛固定液中在4℃固定过夜(24h),继用1%锇酸后固定2h,.freelethodofcardioplegiaandvascularendothelialcellderivedsolubleadhesionmoleculesinmyocardialischemiareperfusioninjury〔J〕.CardiovascSurg,2003;11(2):16571.2刘全,程莉,杨洋.冠状动脉内皮细胞在缺血再灌注损伤时的变化和曲美他嗪的保护作用〔J〕.中华老年医学杂志,2006;25(1):713.3H

5、siehYH,HuangSS,HCbarrier〔J〕.CircJ,2007;71(3):4238.4VolkT,SchmutzlerM,EngelhardtL,etal.Effectsofdifferentsteroidtreatmentonreperfusionassociatedproductionofreactiveoxygenspeciesandarrhythmiasduringcoronarysurgery〔J〕.AnaesthesiolScand,2003;47(6):66774.5LebuffeG,SchumackerPT,S

6、haoZH,etal.ROSandNOtriggerearlypreconditioning:relationshiptomitochodrialKATPchannel〔J〕.AmJPhysiol,2003;284(1):H299H308.6PierreSV,YangC,YuanZ.OuabaintriggerspreconditioningthroughactivationoftheNa+,K+ATPasesignalingcascadeinrathearts〔J〕.CardiovascRes,2007;73(3):48896.7Minay

7、oguchiS,UnoY,KariyaT,etal.Crosstalkamongnoradrenaline,adenosineandproteinkinaseCinthemechanismsofischemicproconditioninginrabbits〔J〕.JCardiovascPharmacol,2003;41(suppl1):S39S47.8何斌,王志农,王军,等.蛋白激酶C在心肌缺血预处理中的作用机制研究〔J〕.中国体外循环杂志,2006;4(2):10710.9XuanYT,GuoY,ZhuY.Endothelialnitri

8、coxidesynthaseplaysanobligatoryroleinthelatephaseofischemicpr

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