青钱柳种子无菌萌发研究论文

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1、青钱柳种子无菌萌发研究论文.freelg/L的GA3溶液+浸种24h+浸种温度35℃;种子萌发的最优激素组合为：MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L+GA330mg/L;对青钱柳幼苗进行离体培养，液体培养基比固体培养基更有利于青钱柳的离体培养。结论对青钱柳种子进行了综合处理再进行无菌培养，可以提高青钱柳种子的发芽率。【关键词】青钱柳种子;激素;萌发;无菌培养青钱柳Cyclocaryapaliurus(Batal.)Iljinskaja又名摇钱树、山沟树(浙江)、麻柳(湖北)、青钱李等，系胡桃科青钱柳属植物，为我国特有的珍稀树种.freelg

2、/L;GA3浸种时间设12，24，48h;浸种温度设5，25，35℃。种子综合处理方案见表2。2.3种子的消毒和接种将处理过的种子用清水洗净，于75%酒精中浸泡1min，转入0.1%升汞浸泡15min，无菌水清洗4次后，接入培养基，每一处理接种20颗种子。2.4初代培养培养基为固体培养基，激素组合采用正交实验设计，设计方案见表3。2.5继代培养当青钱柳幼苗长至4～6cm高时，将根尖和萌发芽剪下(长度约为2cm左右)，分别接入激素水平为6BA2.0mg/L+NAA0.1mg/L的固体培养基和液体培养基中。2.6培养基的设计MS为基本培养基，附加3%的蔗糖

3、，固体培养基附加0.7%的琼脂，培养基灭菌前将pH值调至5.8～6.0。2.7培养条件接种后先进行暗培养，种子萌芽后转为光照培养，光照时间12h/d，光强1500～2000Lx，培养温度为(25±0.5)℃。2.8实验结果的统计和计算每一处理在接种后定期观察、记录种子的污染情况和生长情况，分别记录接种20，40，60d种子的发芽情况，接种60d时统计发芽率：发芽率(%)=萌芽种子数/未受污染的接种数×100%。3结果3.1浓硫酸酸蚀时间对青钱柳种子萌发的影响青钱柳不经酸蚀，种壳对种子的萌发产生了很大的阻力，发芽率为0(结果见表1)。用浓硫酸进行不同时间的

4、酸蚀后，酸蚀4.5，9.5h两个处理中均有种子发芽，以9.5h的发芽率最高，说明在一定范围内，随酸蚀时间的延长，种子的发芽率升高，但酸蚀时间过长，酸蚀13.5h，会导致种子胚的损坏，最终导致种子无法萌发。表1浓硫酸对青钱柳种子萌发的影响3.2不同浓度GA3、浸种时间和浸种温度对青钱柳种子萌发的影响不同浓度的GA3浸种可显著促进种子萌发，有效解除种子休眠5。正交实验结果表明，综合处理可促进种子萌发，但发芽时间和发芽率有差异，A8处理的青钱柳种子发芽时间最早，17d就可以看到种子发芽，60d时发芽率可达42.11%，A9处理发芽时间最迟，1个月才发芽，且发芽

5、率仅为10.53%(见表2)，说明A8处理能较快地打破青钱柳种子休眠和提高青钱柳的发芽率;极差分析表明，GA3浓度产生影响的极差最大，浸种温度的极差值最小，浸种时间次之，说明GA3的浓度对青钱柳种子发芽率影响最大，温度对青钱柳种子的发芽率影响最小，优化组合为GA31000mg/L+浸种24h+浸种温度35℃。3.3不同激素种类及浓度对青钱柳种子萌发的影响不同的外源激素及其不同处理浓度对种子发芽势有明显影响6，本试验通过正交设计探讨不同激素组合对青钱柳种子萌发的影响，结果表明，B6处理种壳出现裂缝及发芽时间最早(15d)，发芽率最高，可达66.67%，B7

6、和B9发芽率次之(36.84%);发芽数率最低的为B2，发芽率仅为10.53%(见表3)。极差分析表明，6-BA产生的影响极差最大，其次是NAA和GA3，说明三者对青钱柳种子萌发影响的大小依次为：6-BA﹥NAA﹥GA3，比较均值可得青钱柳种子萌发的最优培养基配方是:MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L+GA330mg/L。表2GA3浓度、浸种时间和浸种温度对种子萌发的影响表3GA3浓度、浸种时间和浸种温度对种子萌发的影响3.4培养基状态对青钱柳幼苗继代的影响当青钱柳幼苗长至4cm高时，将根尖和萌发芽剪下(长度约为2cm左右)，分别接入激素

7、水平为6-BA2.0mg/L+NAA0.1mg/L的固体培养基和液体培养基中，其生长情况见表4。在固体培养基中，所转接的根和芽在接种21d后均发生褐变和死亡。在液体培养基中，所转接的根在培养7d后，根基部即产生愈伤组织，并逐渐膨大，培养至21d时愈伤组织变黄;芽转入增殖培养基后，生长良好，培养至14d就长出两个侧芽，继续培养则形成丛生芽，说明同一激素配方，液体培养基更有利于青钱柳幼苗的继代培养。表4培养基状态对青钱柳幼苗继代的影响4讨论青钱柳是我国特有的、集药用、材用和观赏等多种价值于一身的单种属珍贵树种，其种子具有深休眠特性，一般播种后需隔年甚至2年后

8、才萌发，研究表明，综合处理措施可以有效解除种子休眠，缩短发芽时间7，尚旭岚等8通