人椎旁肌组织褪黑素受体的表达论文

《人椎旁肌组织褪黑素受体的表达论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、人椎旁肌组织褪黑素受体的表达论文刘金钊陈晓亮胡有谷【摘要】目的了解褪黑素（Mel）受体亚型在人椎旁肌组织的分布。方法应用单克隆抗体免疫组化染色方法检测Mel受体亚型在人椎旁肌组织的分布。结果在人椎旁肌组织中均存在Mel受体mt1和MT2亚型的表达，阳性颗粒分布于细胞浆和细胞核，主要分布于细胞浆。结论人椎旁肌组织存在Mel受体，Mel缺乏可能引起Mel受体介导的椎旁肌的生物效用发生紊乱而影响其对称性生长，从而发生脊柱侧弯。【关键词】受体，褪黑激素；胸椎；肌；人褪黑素（Mel）是松果体分泌的一种神经内分

2、泌激素。近年的研究显示，Mel具有广泛的生物学作用，参与体内许多重要的生理过程1。Mel的作用由Mel受体（MR）介导.freelt1和MT2两种亚型2。特发性脊柱侧弯（IS）是临床最常见的脊柱畸形之一，其确切病因不清。MACHIDA等3提出的褪黑素学说引起了学者们的注意，同时椎旁肌在IS中的作用也引起学者们的关注4,5。本研究观察椎旁肌组织中MR的表达，探讨其在IS发病中的可能作用。现将结果报告如下。1材料与方法1.1材料及其来源取8例正常胸椎旁肌组织,其中5例来自椎管内肿瘤手术病人,3例来自胸椎

3、骨折手术病人。病人年龄16～20岁，平均（18±2）岁。椎旁肌组织取出后立即用40g/L多聚甲醛固定，乙醇脱水，石蜡包埋，置4℃冰箱中贮存。鼠抗人mt1和MT2受体单克隆抗体及免疫组化SP试剂为美国Zymed公司产品。1.2mt1和MT2的检测采用免疫组化染色法。一抗为鼠抗人mt1和MT2受体单克隆抗体，染色步骤按试剂盒说明书并参阅文献6操作，以PBS缓冲液代替一抗作为阴性对照，以下丘脑组织作为阳性对照。显微镜下观察结果。2结果mt1和MT2阳性反应颗粒呈棕褐色或棕黄色，位于细胞浆和细胞核（主要位于

4、胞浆）。8例正常人胸椎椎旁肌组织均有mt1和MT2的阳性表达，其阳性表达率为100%。这些阳性颗粒散在分布于椎旁肌细胞浆。左、右及浅、深层椎旁肌mt1和MT2阳性颗粒分布差异无显著性。3讨论许多学者为了探讨骨骼肌与IS发生发展的关系进行了大量的研究，结果显示，在IS中椎旁肌有多种异常，包括肌束4和肌纤维形态5等，这些异常可导致椎旁肌生长的不平衡，可能是IS发病机制中的一个重要因素，但出现这些异常的确切机制不清楚，应该从分子水平进行探讨。MACHIDA等3提出IS发病机制的“褪黑素学说”，认为褪黑素的

5、合成对本体觉和椎旁肌的对称性生长发育非常重要，提出褪黑素的合成缺陷可能与IS病因学有关。动物实验和临床研究均提示，Mel对脊柱的对称性生长有作用3,7～9，但具体机制不甚清楚。Mel是通过其受体而发挥生物学作用的，如果能够证明人椎旁肌组织存在Mel受体，则说明Mel可能通过其位于椎旁肌组织的受体对人椎旁肌的对称性生长起调节作用。目前未见该方面的研究报道。现有资料表明，MR分布相当广泛，不仅存在于神经系统，也广泛存在于外周组织系统，对机体许多组织器官功能的调节具有十分重要的意义。MR在肌肉骨骼系统的研

6、究报道极少。2001年，石勇铨等10采用放射配体结合法对人肌肉组织褪黑素受体进行了研究，结果显示，人肌肉组织存在Mel特异结合位点，该结合位点具有高亲和力、低结合容量的特点；动力学分析显示，其具有可饱和及可逆性结合的特征；特异性分析表明，其对MR激动剂有高度特异性，符合特异结合的基本条件，提示人肌肉组织存在MR。本实验采用单克隆抗体免疫组织化学法证实人椎旁肌组织有MR的存在，其阳性颗粒分布在肌细胞浆和细胞核，提示Mel可能在椎旁肌的生理功能中有一定作用。推测Mel通过肌肉组织中的MR介导，调节并维持

7、椎旁肌的生理性对称性生长，从而维持脊柱的直立生长和发育。Mel的合成或代谢障碍引起的Mel缺乏，通过肌肉组织中MR介导的正常生物效用被打破，从而引起椎旁肌的不对称生长发育，最终导致脊柱发生侧弯。本实验从分子水平丰富了MACHIDA等3的褪黑素学说，为IS的病因学研究提供了新的方法。【