染料木素的体外抗肿瘤作用研究论文

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1、染料木素的体外抗肿瘤作用研究论文戴支凯，黄姣娥，余丽梅，徐庆【摘要】目的观察染料木素的体外抗肿瘤作用。方法采用溴化3-（4，5-二甲基噻唑-2）-2，5-二苯基四氮唑(3-［4,5-dimethylthiazol-2-yl］-2,5-diphenyltetrazoliumbromide,MTT)检测法测定染料木素对子宫内膜腺癌细胞系（JEC）、人肝癌SMMC-7721细胞系体外增殖的影响，按台盼蓝排染法计数活细胞，绘制细胞生长曲线。结果MTT法检测显示.freelol·L-1的染料木素作用下的JEC细胞生长曲线呈现与5Fu相似的下降趋势。结论

2、染料木素具有一定的抗肿瘤作用。【关键词】染料木素肿瘤细胞生长Abstract:ObjectiveToinvestigatetheantitumoreffectsofgenisteinongastriccarcinomacelllinesJECandSMMC-7721cellsinvitro.MethodsCellvalidityofgenisteinonJECandSMMC-7721cellseasuredbyMTTreductiontest.Thenumberoflivingcellsethodandgroe-dependentinMTTr

3、eductiontest.Grool·L-1tendedtodeclinegraduallyandilartothatof5Fu.ConclusionGenisteinhascertainanticancereffect.Keya;Cellgrol－1的细胞悬液，每个培养瓶2ml，置３７℃、５％的CO2环境中进行体外培养，待瘤细胞在培养瓶底长至约８０％细胞融合时，分瓶传代培养。1.1.2分组实验分为空白对照组（NS）、阳性对照组（5-fliorouracil，5Fu，10-4mol·L-1。上海旭东海普药业有限公司，批号：031001），5个

4、10倍梯度的试药组（10-4～10-8mol·L-1的染料木素，﹥95%，陕西赛德高科生物股份有限公司）和与10-4mol·L-1的染料木素相对应的溶媒对照组（含0.5%乙醇的NS）。1.1.3操作用RPMI-1640完全培养液分别将肿瘤细胞稀释配制成5×104·ml－1的细胞悬液，接种于96孔培养板，每孔100μl，置37℃,5%的CO2环境中，进行体外培养，24h后加药，每孔10μl，设5个平行孔，空白对照组加入等量生理盐水；结束培养（24，48，72，96h）前4h，每孔加入5mg·ml－1的MTT溶液10μl，结束培养后小心吸弃上清液

5、，每孔加入DMSO150μl，待甲臢完全溶解后于酶标仪（Sunrise,Australia）570nm处读出各孔的OD值。实验重复3次。1.1.4评价指标评价指标为平均细胞抑制率(IR)。细胞抑制率（%）=(1一实验孔OD值/对照孔OD值)×100％。IR50％为敏感，在30％～50％为低度敏感，小于30％为不敏感。1.2台盼蓝排染法及生长曲线的绘制将对数生长期细胞制成浓度为5×104·ml－1细胞悬液，接种于24孔板，每孔1ml。置37℃,5%的CO2环境中培养24h，再行无血清培养48h。更换完全培养基，每孔加入药物100μl（空白对照组

6、加等体积的生理盐水），每组各时间点均设2个平行孔。分别于药物作用1～7d，消化收集细胞，按台盼蓝排染法，用血细胞计数板在光镜下计数活细胞数。以时间为横坐标，活细胞数为纵坐标，绘制细胞生长曲线。1.3统计学处理实验所得数据用±s表示，采用t检验进行各组间比较。2结果2.1MTT检测2.1.1染料木素对JEC细胞体外增殖的影响MTT检测结果显示，随染料木素浓度的增加和时间的延长，染料木素对JEC细胞生长的抑制作用逐渐增强。结果见表1。其中，10-4mol·L-1的染料木素作用JEC细胞24，48，72和96h的抑制百分率分别为36.10%，55.

7、00%，58.73%和62.21%，与5Fu间无显著差异（P0.05）。表1染料木素对JEC细胞体外增殖的影响(略)2.1.2染料木素对SMMC-7721细胞体外增殖的影响MTT检测结果显示，随着染料木素浓度的增加和时间的延长，染料木素对SMMC-7721的抑制作用逐渐增强。结果见表2。表2染料木素对SMMC7721细胞体外增殖的影响(±略)2.2染料木素对JEC和SMMC-7721细胞生长的影响2.2.1染料木素对JEC细胞生长的影响染料木素对JEC细胞的生长曲线显示，随着染料木素浓度的增加，生长曲线逐渐下移，10-4mol·L-1染料木素

8、的生长曲线呈现与5Fu相似的下降趋势。见图1。2.2.2染料木素对SMMC-7721细胞生长的影响染料木素对SMMC-7721细胞的生长曲线显示，随着染料木素浓度的