近年来病理的几项主要新技术

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1、近年来病理的几项主要新技术-->近年来病理的几项主要新技术关键词:病理学;免疫组化;生物芯片;PCR疾病是一个极其复杂的过程,在病原因子和机体反应功能的相互作用下,患病机体有关部分的形态结构、代谢和功能都会发生种种改变,这是研究和认识疾病的重要依据。病理学就是运用各种方法研究疾病的原因(病因学),在病因作用下疾病发生的过程(发病学)以及机体在疾病过程中的功能、代写硕士论文代谢和形态结构的改变(病变),阐明其本质,从而为认识和掌握疾病发生发展的规律,为防治疾病,提供必要的理论基础。可以说病理学是人类探索和认识自身疾病的过程中应运而生的

2、,病理的发展与自然科学,特别是基础科学的发展和技术进步有着密切的联系。当人们还只能依赖肉眼和简单的放大镜观察事物时,只能产生器官病理;只有到了显微镜技术和细胞学问世之后,才诞生了细胞病理学,而半个多世纪以来,由于电子显微镜技术,特别是20多年来一系列有关新方法、新技术的相继建立和细胞生物学、分子生物学、环境医学、现代免疫学及现代遗传学等新兴学科及其分支的迅速兴起和发展,才对病理学科的发展产生了深刻的影响,带来了新的理论和技术。近年来,随着科学的发展,病理学的观察方法及其采用的新技术已远远超越了传统的形态学观察,但形态学观察方法仍不失

3、为基本观察方法。本文将对近年来病理的几项主要新技术做一简要介绍。1.　免疫组织化学技术免疫组织化学是在组织化学的方法上结合免疫学的理论和技术发展起来的一门新技术,其广泛应用仅是近10余年的事,而且发展迅速。它除了可用于病因学诊断(如病毒)和免疫性疾病的诊断外,更多的是用于肿瘤病理诊断。常用的染色方法有S-P,SAP,ABC,LSAB等。1.1　基本原理免疫组织化学是利用抗原与抗体的特异性结合反应来检测组织中未知抗原或抗体,借以判断肿瘤的组织或分化方向,从而进行病理诊断和鉴别诊断。1.2　实践应用随着科学技术的发展,免疫组化技术已广泛

4、应用于诊断和研究工作。(1)用于提高病理诊断的准确性:自从有了免疫组化技术,为病理诊断提供了客观指标〔1〕,大大提高了疑难病例诊断的准确性,如穿刺,破碎或微量标本的确诊,转移性肿瘤的原发病灶的确定:恶性淋巴瘤的诊断和分类等等;(2)用于确定肿瘤的分化程度;(3)雌孕激素受体的检测为临床提供治疗方案;(4)癌基因蛋白的研究;(5)指导肿瘤的治疗;(6)其对肿瘤细胞增生程度的评价,发现微小转移灶及肿瘤的分期上也有十分积极的意义。1.3　优点和局限性1.3.1　优点:(1)特异性强:免疫组化中抗体与组织细胞中的抗原的结合是特异的;(2)敏

5、感性高:由于S-P法和ABC法的出现,使抗体的浓度稀释度(代表敏感度)达到上千,上万,甚至上亿倍,使免疫组化更加可靠;(3)定位准确:因为抗原抗体的结合是特异的。1.3.2　局限性:(1)有些器官和组织特异性的抗原都是相对的,例如上皮性标记的CK(角蛋白)常可在非上皮性肿瘤(血管,平滑肌,横纹肌和肌纤维母细胞等)中表达;(2)假阳性、假阴性,及异位抗原的表达,迷惑人们的判断,造成错误诊断。因此,目前虽然免疫组化技术已经作为独立的一项检测指标用于指导临床个性治疗,但在规范化操作,标准化判断和科学分析结果等方面还存在着一些有待解决的问题

6、。这需要我们加强技术交流和评比,以进一步提高免疫组化技术水平。2.　生物芯片生物芯片技术是一种高通量检测技术,其概念起源于20世纪80年代后期,20世纪90年代初才在医学领域得以引用及实验性地应用,所以至今为止生物信号平行分析最成功的形式是一种尼龙膜为基质的“cDNA阵列”,即DNA芯片,又称为基因芯片。目前的基因芯片有两类:一类是片上就位合成寡聚合苷酸点阵芯片(ONA),另一类是用微量点样技术制作cDNA点阵芯片(CDA)。2.1　原理可以用计算机芯片的原理来理解,它的本质是借鉴计算机平行分析的思维,对生物信号进行平行分析,利用微

7、点阵技术,借助于机械手将成千上万的探针分子点阵固定于支持膜上,然后与标记的样品分子进行杂交,通过共聚焦激光扫描和微量处理检测每个探针分子的杂交信号强度,进而获取样品分子的数量和序列信息。从而使一些传统的生物学分析手段能够在尽量小的空间范围内,以尽快的速度完成。2.2　实践应用现在,基因芯片已被应用到生物科学众多的领域之中。它以其可同时、快速、准确地分析数以千计基因组信息的功能而显示出了巨大的威力。这些应用主要包括基因表达检测、突变检测、基因组多态性分析和基因文库作图以及杂交测序等方面。在病理学方面,该技术为肿瘤的分子生物学研究提供了

8、更广阔的前景。(1)检测肿瘤相关基因突变异常;(2)检测肿瘤相关基因的激活或扩增的异常表达;(3)平行检测肿瘤组织的基因表达谱;(4)可做抗肿瘤药物的筛选。2.3　优点和局限性2.3.1　优点:(1)高产出:1次实验可得到大量结果;(