开口箭皂苷抗炎活性的研究

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1、开口箭皂苷抗炎活性的研究【关键词】开口箭；,,皂苷；,,抗炎　　摘要：目的评价开口箭总皂苷的抗炎活性。方法采用系统溶剂萃取，运用角叉菜胶所致小鼠足肿胀模型和脂多糖刺激小鼠腹腔巨噬细胞产生一氧化氮细胞模型对开口箭不同提取部位的抗炎活性进行研究。结果开口箭水溶性浸膏、正丁醇萃取物、石油醚萃取物对角叉菜胶所致小鼠足肿胀及肿胀足中前列腺素E2含量升高均具有显著抑制作用（P＜0.01）。其总皂苷经大孔树脂吸附，30%，70%，95%乙醇洗脱，各洗脱部分对脂多糖刺激腹腔巨噬细胞产生NO均有显著抑制作用（P＜0.01）。结论开口箭具有良好的抗炎作用，具有良好的开发

2、利用价值。皂苷是其抗炎的重要物质基础之一。抑制炎症介质PGE2，NO的产生是其作用机理之一。　　关键词：开口箭；皂苷；抗炎　　StudyonAnti-inflammatoryActivityofTotalSaponinfromTupistrachinensisBak.　　Abstract:ObjectiveToevaluatetheanti-inflammatoryactivityoftotalsaponinfromTupistrachinensisBak.Methodsparedtheanti-inflammatoryactivityofthedi

3、fferentparts,adoptedsystematicsolventextraction,usedthemouse'sfootsodelcausedbycarrageenin,usedthecellmodelthatlipopolysaccharideexcitedpreitonealmacrophageproducednitrogenmonoxidum.ResultsI1640培养基Gibco公司）。　　1.3动物KM种雄性小鼠，体重18~22g，华中科技大学同济医学部实验动物中心提供。合格证号：19-052。　　1.4仪器药物粉碎机（河北黄

4、骅市航天仪器厂）；多用强制渗漉罐（温州鸿驰化工医药设备有限公司），旋转蒸发仪（无锡市星海王生化设备有限公司）。电子天平（上海第二天平仪器厂），UV-2100分光光度计〔尤尼柯（上海）仪器有限公司〕，全自动多功能酶标仪（芬兰LabsystemMultiskanMK3）。　　2方法与结果　　2.1药物提取见图1。　　图1药物提取流程（略）　　2.2抗炎实验　　2.2.1对角叉菜胶所致小鼠足肿胀的影响取KM种雄性小鼠，随机分成6组，每组10只，分组灌胃给药（给药溶积为0.1ml/10g），连续3d，末次给药30min后断颈处死小鼠，剪下其后足，称重，计算肿

5、胀率〔（右足-左足）/左足×100%〕。剪碎右后足没于2ml生理盐水中，不时振摇，2h后取出，将浸泡液离心，取上清液0.2ml，加0.5mol/LKOH-甲醇溶液0.5ml，50℃水浴异构化20min，加甲醇2ml，于278nm波长处测定OD值。以每克组织相当的吸收光密度值表示致炎足中前列腺E2（PGE2）的含量。结果见表1。　　表1开口箭对角叉菜胶所致小鼠足肿胀的影响（略）　　与模型组比较*P＜0.01，n=10　　结果表明：开口箭水溶性浸膏、正丁醇萃取物、石油醚萃取物对角叉菜胶所致小鼠足肿胀及肿胀足中前列腺素E2含量升高均具抑制作用。醋酸乙酯萃取

6、物作用不显著。开口箭石油醚萃取物量少，含有甾体皂苷等多种成分〔2~4〕。正丁醇萃取物量最大，其中主要含皂苷，我们对皂苷进行了精制，用大孔树脂吸附进行了初步分离，并进一步进行了实验。　　2.2.2对脂多糖刺激腹腔巨噬细胞产生NO的影响取KM雄性小鼠6只腹腔注射1%的可溶性淀粉，每只1ml。3d后断头处死。腹腔注射Hank's液冲洗，收集腹腔巨噬细胞，进行细胞计数，用含20%新生小牛血清的PRMI1640培养基调整细胞浓度至106cell/ml。将细胞接种于48孔培养板中，每孔0.4ml，37℃，5%CO2培养箱内培养3h。分别加入不同药物50μl，使终

7、浓度为20μg/ml,LPS（脂多糖）0.1ml,培养24h，收集上清液，-20℃保存。按一氧化氮（NO）试剂盒（酶法）说明书测定NO的含量。结果见表2。　　表2对脂多糖刺激腹腔巨噬细胞产生NO的影响（略）　　表示与模型组比较，*P＜0.05，P＜0.01;n=8　　结果表明总皂苷经大孔树脂吸附,30%，70%，95%乙醇洗脱，各洗脱部分对脂多糖刺激腹腔巨噬细胞产生NO均有一定的抑制作用。70%乙醇洗脱物效果更好。　　3讨论　　开口箭是土家族常用药物，亦为神农架四大名药之一，其漱口液治疗咽喉炎、扁桃体炎疗效显著〔5〕。开口箭资源丰富，疗效肯定，使用方

8、便，值得进一步系统研究，开发利用。开口箭不同提取物均具有抗炎作用，表明其抗炎作用是多种成分协同作用的结果。临