实验室常用小鼠简介 (同济)

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1、免疫学研究中生物医学研究中心张述Email:shuzhang1976@gmail.com常用的小鼠模型C57BL/6简要描述：最常见的实验小鼠，经常简称为B6C57或者小鼠。性状描述：毛色为黑色，常作为“标准”的近交系。常见用途：⑴用于多种免疫学、遗传学研究，包括移植、感染等动物模型。⑵常作为背景小鼠，对其进行基因敲除、转基因等遗传修饰,从而提供标准的遗传背景。BALB/C简要描述：是实验室常见的免疫功能不太完善的小鼠。性状描述：毛色为白色，对致癌因子敏感，卵巢、肾上腺和肺部肿瘤、白血病发生率较高。常见用途：⑴用于生产单克隆抗体的杂交瘤的制备。⑵免疫学研究，如移植的供受鼠等。BM12简要

2、描述：是C57BL/6近交系小鼠自发形成的一个近交系小鼠，在MHCII类分子中有3个氨基酸的突变。性状描述：与C57BL/6基本相同，对EAE等自身免疫性疾病具有抗性。常见用途：用于慢性排斥反应研究的供鼠。免疫学研究中常用的小鼠品系常见的小鼠品系ALR：与NOD小鼠具有共同祖先的小鼠，白色，两者有70%的基因组完全相同，但MHC不相同。对I型糖尿病具有很强的诱导耐受。常用于NOD的对照小鼠。杂交鼠：由两个近交系杂交获得后代，性状不稳定。小鼠遗传操作未进行彻底的小鼠。NOD：简要描述：非肥胖型糖尿病(NOD)小鼠，最常见的实验小鼠，公认的自身免疫性糖尿病（I型糖尿病）。性状描述：白色，从第

3、9周开始，即会有胰腺炎症状，之后雌鼠会有较高的概率得I型糖尿病。常见用途：⑴I型糖尿病遗传、发病机制研究。⑵其它相关的自身免疫性疾病研究，如干燥综合症等。1、器官移植模型2、自身免疫性疾病模型3、超敏反应模型4、肿瘤模型免疫研究常见的小鼠动物模型肾移植模型异位心脏移植模型小肠移植模型骨髓移植模型肝移植模型皮肤移植模型胰腺（胰岛）移植模型慢性排斥（BM12）器官移植模型1、自发型I型糖尿病动物模型NOD小鼠2、诱导型I型糖尿病动物模型：药物（STZ、Alloxan、环磷酰胺等）诱导破坏小鼠胰岛3、自发型系统性红斑狼疮小鼠BXSB4、诱导型系统性红斑狼疮小鼠慢性移植物抗宿主自身免疫性疾病模型

4、5、自发型类风湿性关节炎SKG小鼠6、诱导型类风湿性关节炎Ⅱ型胶原诱导关节炎大鼠模型，佐剂性关节炎(adjuvantarthritis，AA)模型，其它诱导模型7、诱导小鼠EAE；模拟人多发性硬化症/急性播散性脑脊髓炎。髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55（MOG35-55）多肽免疫；髓鞘碱性蛋白（MBP）免疫疫；髓鞘蛋白脂质蛋白(PLP)免疫；脊髓组织匀浆免疫等自身免疫性疾病模型超敏反应模型气道高敏感反应模型：腹腔注射卵清白蛋白致敏，然后通过雾化吸入造模。皮肤过敏反应模型：过继输入抗二硝基苯酚（DNP）的IgGE单克隆抗体，使小鼠被动致敏，然后以二硝基氟代苯（DNFB）刺激产生过敏反应。肿

5、瘤模型移植瘤实验：将人移植入BalB/C、祼鼠、C57BL/6、Rag1等小鼠体内。诱导癌/肿瘤模型：使用二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine,DEN)等诱癌剂灌胃及自由饮水，长期诱导可产生肝癌模型。1、基因敲除小鼠2、基因敲入小鼠3、基因捕获小鼠4、转基因小鼠5、条件性基因表达小鼠6、条件性基因敲除小鼠基因修饰小鼠载体构建基本知识二、pIRES2-EGFP-rtTAAdvanced构建使用引物将rtTAAdvancedCDS区克隆出来，然后以XhoI/BglII双酶切，将其克隆入pIRES2-EGFP载体的XhoI/BamHI位点中。引物序列为：rtTA_XhoI_F:A

6、TCGCTCGAGCCGCCACCATGTCTAGACTGGACAAGAGCAAArtTA_BglII_R:ATCGAGATCTTACTTAGTTACCCGGGGAGCATGTCA基因表达基本知识DNA一级结构上调控基因表达的元件（基因表达盒结构）promoter5’-UTRpromoterenhancerUTRexonPolyAsignalingenhancer3’-UTRChromosomesequence基因敲除小鼠基因修饰ES细胞的获得及囊胚注射基因敲除小鼠2、基因敲除纯合小鼠的获得基因敲入小鼠Neorw.tallelefloxallele1IIIIIIw.t.sequenceV

7、ectorsequenceloxPsiteFRTsiteTypingprimerTypingprimerexon基因捕获小鼠效果类似于基因敲除MBD2基因敲除小鼠b-geow.t.allele12w.t.sequenceVectorsequencemutantalleleTypingprimerTypingprimerexon13b-geo3SequencenotindicatedtargetingvectorA转基因小鼠靶标基因表