动物繁殖学课件-第8配子与胚胎生物技术

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1、第八章配子与胚胎生物技术第一节动物胚胎移植胚胎移植（embryotransfer）：将动物的早期胚胎移植到与胚胎相对应生理状态的雌性受体子宫中，使之发育为成熟的个体。提供胚胎的个体称为供体，接受胚胎的个体称为受体。一、胚胎移植发展历史1890年英国剑桥大学WalterHeape首次获得兔胚胎移植成功。20世纪30年代，在兔、大鼠和小鼠方面进行了更多的实验，成为实验生物学中研究受精、胚胎发育等问题的一个重要方法。家畜的胚胎移植，最早是在20世纪30年代在绵羊和山羊方面进行的。在20世纪60年代以来，对家畜胚胎的采取、保存、移植等技术环节进行了大量的试验研究

2、工作，取得不少进展。20世纪70年代以后，胚胎的移植技术可以说发展到在畜牧生产中实际应用的阶段。近些年来，胚胎移植技术已在动物引种和改良方面广泛应用，已成为体外受精、嵌合体、转基因和克隆动物实现的应用技术，试管牛、转基因猪和克隆羊均是通过胚胎移植途径生出的。二、胚胎移植的意义1.充分发挥优良母畜的繁殖潜力，提高繁殖效率2.加速品种改良，扩大良种畜群3.诱发肉畜怀双胎，提高生产效率4.代替种畜的引进5.保存品种资源6.防疫需要和克服不孕7．是实现克隆动物等的必需手段三、胚胎移植的生理学基础和原则(一)生理学基础1.发情后生殖器官的孕向发育2.早期胚胎的游离

3、状态3.胚胎移植不存在免疫问题4.胚胎和受体的联系5.胚胎的遗传特性(二)胚胎移植的基本原则1.胚胎移植前后所处环境的同一性（１）供体和受体在分类学上的相同属性（２）动物生理上的一致性（３）动物解剖部位的一致性2.胚胎发育的期限3.胚胎的质量(三)胚胎移植应具备的基本条件1.胚胎来源2.技术条件3.受体母畜四、胚胎移植的技术程序胚胎移植时，希望一次从供体母畜得到多数胚胎，所以要进行超数排卵处理，同时，胚胎移植成功的根本条件是供体和受体必须同时发情，故需人为控制供受体的发情时间，进行同期化处理。（一）供受体准备选择的供体不但应有育种上的价值，期望从它们得到

4、很多的后代，而且生殖机能应处于较高的水平。受体母畜可选用非优良品种的个体或土种家畜但亦应具有良好的繁殖性能和健康状态，体型中上等。（二）超数排卵在母畜发情周期的适当时间，注射促性腺激素，使卵巢中比在自然情况下有较多的卵泡发育并排卵，这种方法称为超数排卵（superovulation），简称超排。超数排卵主要应用于牛和羊，效果明显，对于产多胎的猪意义不大，而母马很难产生反应。一般认为以10～20个最为理想。1．母牛在预计自然发情的前4d，即发情周期的第16天或第17天肌肉或皮下注射PMSG1500～3000IU（或同时加注HCG1000～1500IU）。这

5、种方式是按照发情周期的规律，在黄体期将要结束，卵泡期即将到来之前，顺势促进较多的卵泡生长和成熟。这样做必须和发情周期的进程配合好，所以在安排时间上受到限制，应用不方便。另一种方式是在发情周期的中期，在注射促性腺激素的同时，施用PGF2a或其类似物以溶解黄体。一般是在周期的第10～13天（8～15天）内进行，一次肌注上述量的PMSG，隔日再注射以PGF2a。如用FSH（或FSH+LH），则连续注射3～4d，每天早晚各一次，总量为30～40mg（国产品400～500大鼠单位，第一天用量可稍多，第3天的第5次注射时，同时注射PGF2a。2、母羊在周期第12天或

6、第13天时，一次肌注（或皮下）PMSG750～1500IU。出现发情后或配种当日再肌注HCG500～750IU。也可像母牛一样在发情周期中期进行处理，在注射PMSG之后，隔日注射以PGF2a或类似物。如采用FSH，用量为10～20mg（或200～300大鼠单位）分3d6次注射之，PGF2a在第5次同时注射之。（三）供体母畜的配种超数排卵处理的母畜发情后，根据育种的需要，应选择优良公畜的精液，在适宜时间进行人工授精。为了得到较多的发育正常的胚胎，应使用活率高密度大的精液，而且将授精次数增加到2次或3次，两次间隔8～10h。（四）胚胎的收集胚胎的收集是利用冲

7、洗液将胚胎由生殖道中冲洗，并收集在器皿中。冲洗时要考虑到配种时间、发生排卵的大致时间、胚胎的运行速度和发育阶段等因素，只有这样，才能顺利迅速地进行操作，得到较高的收集率。关于各种家畜受精后胚胎发育的速度和运行情况（所处部位）收集时间不应早于排卵后的第一天，亦即最早要在发生第一次卵裂之后，否则不宜辨别卵子是否已受精。一般是在配种后3～8d，发育至4～8个细胞以上为宜。牛胚胎最好在发育至桑椹胚晚期或胚泡早期进行收集和移植（配种后6～8d）。1.手术法收集胚胎按照外科手术的要求，在腹部适当部位作一切口，用注射器吸取冲洗液注入输卵管或子宫角内，进行冲洗，同时观察

8、卵巢上的排卵情况，计算排卵率。冲洗部位决定于胚胎所处位置，亦即取决于冲洗是在配种