微生物遗传学实验

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1、微生物遺傳學實驗東吳大學微生物學系曾惠中教授遺傳工程分子生物學生物技術生命科學微生物遺傳學微生物學生物化學實驗以驗實實際体驗以驗證真實教學基本設計製備遺傳實驗材料遺傳分析獵取基因基因構造與功能遺傳實驗材料質体：plasmid,phagemid噬菌体：lambda,M13細菌菌体：E.coli,BacillusTransformationConjugationTransductionTranspositionComplementationSuppressionByGeneTransferRecombinationGenotypevs.PhenotypeGeneStructureGeneEx

2、pressionGeneRegulation遺傳分析介紹與準備2.噬菌體及噬菌體DNA的製備(PhageandphageDNApreparation)3.質體DNA的製備﹕快速篩選法及小量抽取法(Plasmidpreparation---quickscreeningandsmallscalemethod)4.酵素反應(Enzymaticreaction)5.轉型(Transformation)6.突變(Mutagenesis)7.轉導(Transduction)8.互補(Complementation)9.接合與轉座(Conjugativetransposition)10.分子複殖(Mo

3、lecularcloning)11.聚合酵素連鎖反應(Polymerasechainreaction)12.南方雜配反應(Southernhybridization)實驗項目PlasmidextractionandpurificationChromosomalDNApreparationTotalRNApreparationAgarosegelelectrophoresisPhagepreparationbyinductionoflysogenConditionalmutationandNonsensesuppressionPlaqueformingassayDensitygradien

4、tequilibriumultracentrificationCompetentcellpreparationPlasmidtransformationInvitromutagenesisAlphacomplementation(blue&whitescreening)RestrictionandligationBasiccloningtechniquePCRSouthernblottingandhybridization實驗技術儀器設備天平1酸鹼儀1水浴槽2培養箱3微量離心機6微量吸管22電泳槽11攪拌器4計時器20紫外燈與攝影儀1光電比色儀1PCR儀1超高速離心機1訓練方式小班教學：

5、藥品充足、器材齊備親自動手：獨立操作、整合負責循序漸進：微生物學，生物化學，遺傳學預期教學成效獨立操作能力理論與實驗印證技術資料與論文解讀LambdaphageultracentrifugebandingLambdaplaque