“durondeau” 梨组织培养中凝胶介质的改进

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1、InVitroCell.Dev.Biol.—Plant42:287–290,May–June2006DOI:10.1079/IVP2006753©2006SocietyforInVitroBiology1054-5476/06$18.00+0.00“DURONDEAU”梨组织培养中凝胶介质的改进NEOLILUCYSZYN1,MARGUERITEQUOIRIN2,LUCIANAL.F.RIBAS2,HENRIQUES.KOEHLER3,ANDMARIARITASIERAKOWSKI1*通讯作者，E-mail：sierakowski@ufpr.br1生物大分子实验室，化

2、学系，巴拉那联邦大学，邮箱19081，CuritibaCEP81531-990，巴拉那，巴西2微组织繁殖实验室，植物学系，巴拉那联邦大学，邮箱19031,CuritibaCEP81531-990,巴拉那，巴西3植物科学系，19061,CuritibaCEP81531-990巴拉那，巴西（2005-3-18收稿，2006-2-9接受，编辑R.P.Niedz）摘　要我们研究了用半乳甘露聚糖（galactomannan,GM）部分替代培养基中的琼脂（agar），对“DURONDEAU”梨（PyruscommunisL.cv.‘Durondeau’）组织培养的影响。GM提取

3、自肉桂（Cassiafastuosa）或者四棱叶瓜尔豆（Cyamopsistetragonolobus）（瓜尔胶，一种商品化的GM）的种子，把它与琼脂等比例混合，配成琼脂和GM终浓度均为0.3%（w/v）的凝胶。与只含有0.6%（w/v）琼脂作为凝胶剂的培养基比较培养过程中成苗和生根的效果。以琼脂/瓜尔胶混合物或者琼脂/肉桂GM混合物作为凝胶剂的培养基生根率分别增长32%和17%。使用改进的培养基能提高培养物生根的数量和生根率。生根率最高达到91%，采用琼脂/肉桂GM混合物作为凝胶剂，配合9.80μM吲哚-3-丁酸。同时我们观察到在这种培养基上茎段基部产生的愈伤组织

4、更少。离体培养物在新的培养基中成苗和生根都表现得更好，而且新的凝胶剂价格上要便宜很多，这预示琼脂/GM混合凝胶剂在植物组织培养中将会有极好的应用前景。关键词凝胶剂替代品；半乳甘露聚糖；Pyruscommunis；组织培养介质。简介微组织繁殖micropropagation,微组织繁殖，有时也泛指植物组织培养。技术已经发展成为很多种果树的快速克隆繁殖的手段（JainandIshii,2003）。追求最大的茎增殖是基本目标，培养基使用的凝胶剂的影响受到很大的关注。我们一般用来凝固培养基的琼脂是由红藻（Rhodophyta）中提取到的一类多糖，主要是（Graciliace

5、ae）和葡枝凝花菜（Gelidiaceae）（Glicksman,1983）。多糖是一种昂贵的成分，并且会影响离体植物的生长发育（RombergerandTabor,1971;Singha,1984;ScholtenandPierik,1998）。在培养基中使用琼脂的一个普遍问题是会导致植物过渡含水和坏死（Deberghetal.,1981;Pasqualettoetal.,1988）。有人已经尝试过一些琼脂的替代品，例如在苹果、梨和红莓的茎段增殖中使用玉米淀粉和Gelritew®的混合物（Zimmermanetal.,1995）。另外，Ferrietal.（199

6、8）在苹果砧木MM111的生根培养中用木薯淀粉部分替代琼脂，最近有人发现提取自孪叶豆（Hymenaeacourbaril）种子的木糖葡聚糖在Marubakaido苹果砧木培养中作为琼脂的部分替代物非常有效（Lima-Nishimuraetal.,2003）。植物种子中也含有大量其他的碳水化合物材料像半乳甘露聚糖（GM）（DeaandMorrison,1975）。由四棱叶瓜尔豆（Cyamopsistetragonolobus）种子中提取的瓜尔胶和由豆角树（Ceratoniasiliqua）种子中提取的刺槐豆胶是工业中应用最广泛的GM。Reicheretal.（1991

7、），Piresetal.（2001）和Sierakowskietal.（2002）研究了巴西本文作者在巴西做研究。译者注。本地和国外引进的能替代GM的物种资源。其中包括Cassiafastuosa，就是人们所说的肉桂，豆科苏木亚科的成员，从中提取出了另一种GM用于这次工作。向培养基中添加GM可以通过控制含水相的流动性达到我们需要的质地和牢固程度。同时对凝胶含水系统特性也有作用，因为GM会与其他的多糖如琼脂和黄色素发生协同反应（ViebkeandPiculell,1992;Zhanetal.,1993）。本文将介绍我们以GM作为琼脂的部分替代物，用于“Durond