地骨皮总黄酮提取工艺研究

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1、地骨皮总黄酮提取工艺研究马学琴，高晓娟，杨凯，付雪艳【摘要】　　目的探索从地骨皮中提取总黄酮的最佳工艺。方法以总黄酮含量为指标，应用正交实验，优化地骨皮总黄酮的提取工艺。结果总黄酮提取最佳工艺：75%乙醇，料液比1∶10，回流2h，提取2次。结论该工艺简单易行，是提取地骨皮总黄酮物质的有效途径。【关键词】地骨皮总黄酮提取工艺　　Abstract：ObjectiveTostudyandoptimizetheextractionprocedureofthetotalflavonoidsfromLyciumbarbarumL.MethodsTheorthogonaldesignbarba

2、rumL.asindex.ResultsTheoptimizedextractionprocedurees.ConclusionTheprocedureissimpleandfeasible,andcanalsoprovideimportanttheoreticalbasisfortheexploitationofLyciumbarbarumL.resources.　　KeybarbarumL.;Totalflavonoids;Extractiontechnology　　地骨皮是茄科植物枸杞LyciumchinenseMill或宁夏枸杞LyciumbarbarumL.的干燥根皮，为

3、常用中药，具有主“五内邪气，热中，消渴，周痹”的作用。现代药理也表明其有降血压、降血糖、调血脂、解热、抗菌及抗病毒等活性〔1〕，药用价值非常明显。因此，测定地骨皮中总黄酮的含量具有重要的意义。本文就总黄酮的提取工艺进行优化。　　1仪器与试药　　1.1仪器岛津UV-2550紫外分光光度仪(日本),CQ-2200超声波清洗器(上海新超超声波仪器有限公司)。　　1.2试药芦丁(中国药品生物制品检定所),所用试剂均为分析纯。　　2方法与结果　　2.1对照品溶液的制备精密称取芦丁对照品(100℃干燥至恒重)20.43mg,置100ml量瓶中，加30%乙醇溶解并定容得浓度为0.2043mg/m

4、l对照品溶液。　　2.2测定波长的选择依据《中国药典》方法〔2〕，取对照品溶液适量，加入1ml5%亚硝酸钠溶液和1ml10%硝酸铝溶液，放置10min后加入1ml10%氢氧化钠溶液，空白试液为不加氢氧化钠溶液的对照品溶液，进行全波长扫描，结果表明对照品溶液在500nm有最大吸收，故选500nm为测定波长。　　2.3线性范围考察精密量取对照品溶液各1，2，3，4，5ml置25ml容量瓶中，再依次加入1ml5%亚硝酸钠溶液和1ml10%硝酸铝溶液，放置10min后加入1ml10%氢氧化钠溶液，以相应试剂为空白测定500nm各溶液的吸光度，以吸光度对浓度进行线性回归，得到回归方程A=14

5、.378C+0.0083，线性范围：8.17～49.03μg/ml，r=0.9998。　　2.4药材的预处理和供试品的制备地骨皮药材经粉碎、过60目筛、粉末经恒温(60℃)干燥24h后，精密称取约10g，依据正交实验所得浸膏精密称取约0.05g，60%乙醇50ml使溶解，精密量取25ml置50ml容量瓶中，加水稀释至刻度成贮备液。精密量取贮备液3ml，置25ml量瓶中，加30%乙醇至6ml，依次加入1ml5%亚硝酸钠溶液和1ml10%硝酸铝溶液，放置10min后加入1ml10%氢氧化钠溶液，加30%乙醇至刻度，以相应试剂为空白，在λ=500nm测定吸收光度。　　2.5地骨皮总黄酮提

6、取工艺研究　　2.5.1回流法和提取溶剂的考察分别用60%，75%，100%的甲醇和60%，75%，100%乙醇，料液比1∶10对地骨皮进行提取，热回流2次，2h/次，以总黄酮含量为指标进行考察，从而确定正交实验所用溶剂。结果见表1。表1回流法和提取溶剂与含量的关系（略）　　表1结果表明，同一浓度乙醇较甲醇提取率高，并且60%，75%乙醇提取率相当，因此，正交实验中选取乙醇浓度为60%，75%，90%作为考察的3个水平。　　2.5.2超声法和提取溶剂的考察分别用60%，75%，100%的甲醇和60%，75%，100%乙醇，料液比1∶10对地骨皮进行提取，提取2次，0.5h/次，以总

7、黄酮含量为指标进行考察。结果见表2。表2超声法和提取溶剂与含量关系（略）　　表2结果表明，溶剂对总黄酮提取率的影响与回流法一致，但超声法的提取率明显低于回流。因此，正交实验中采用回流法。　　2.5.3正交实验在对溶剂和提取方法进行考察后，根据工艺要求，选定乙醇浓度、料液比、提取次数、提取时间作为考察的4个因素，每个因素选择3个水平，编制因素水平表，（见表3）。采用L9(34)正交表进行实验，以地骨皮总黄酮含量为考察指标，结果见表4。对表4结果进行统计学处理，得方差分析