条件治病菌之(粪)肠球菌研究观察.doc

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1、条件致病菌肠球菌摘要:肠球菌不像大多数的乳酸菌一样,它不被认为是“安全可靠”(GRAS)。对于肠球菌的安全评价仍存有争议。虽然肠球菌被认为是“积极“或在奶酪技术中有用,但它的隔离种群已经作为对人类的条件致病菌出现。因此,这些细菌对发酵乳制品是否有益处于似是而非的地位,以为它存在有潜在的危险。本篇综述是概述了肠球菌的积极的和消极的两种特性,并举例说明这个菌的具有争议的特性。根据食品安全评价准则,我们提出对于每个潜在的技术应变逐个进行评估,并且建议肠球菌在发酵食品中使用前进行个别研究。1.简介2.窗体顶端肠球菌最初列为D群链球菌,这种分类可以

2、追溯到由兰斯菲尔德建立的计划。1984年,肠球菌给予了新的位置被列为肠球菌属,在经过DNA-DNA和DNA-RNA杂交的研究后证明它与链球菌属有较远的关系(SchleiferandKilpper-Balz,1984)。到目前为止32种已被提议列入肠球菌属(2005年10月26号)。肠球菌种适宜在6.5%氯化钠,40%胆汁盐且pH值在9.6,并可以在60°C的环境下生存30分钟。大多数品种也可以在10℃至45℃之间生长(Moellering,1992;Flahautetal.,1996)。粪肠球菌和屎肠球菌都是人类消化道微生物自然存在的菌种

3、,在胃肠道中因为个体差异其含量差异变化很大(在每克消化系统内容物中含有102和108)。肠球菌通常从食品、植物、水和土壤中分离,可能由于它的来源是粪便使得他们的天性在恶劣环境中比较耐受(Giraffa,2002)。在牛奶和奶酪制品中通常会找到粪肠球菌、屎肠球菌和少量的坚忍肠球菌,偶然也会发现小肠肠球菌和铅黄肠球菌。不同于其他乳酸菌,肠球菌不能被认为是“一般认为安全”(GRAS),并且它在水中检测是作为粪便污染物的指标的(Godfreeetal.,1997)。一般认为对于肠球菌的安全评价程序是一个模棱两可的状况。一方面,肠球菌在作为奶酪技术

4、中作为发酵培养物被认为是由积极作用的(Giraffa,2003);另一方面,它们被认为是新兴的人类病原体(Moellering,1992)。这篇综述主要是根据现有知识总结了肠球菌的积极和消极的性状,来强调这种菌属的争议性。食品安全准则着重强调了对抗生素耐药性和毒力的因素,这样使我们建议在发酵食品中使用肠球菌前应对这几项进行研究。2.分类和鉴定由于肠球菌的表型多样性,这使得肠球菌种的生理测试鉴定一直存在问题(Devrieseetal.,1993;Parketal.,1999)。此外,物种鉴定的常规实验往往需要很长的培养时间(Facklame

5、tal.,2002)。使用16S和23SrDNA基因的基因型鉴定方法更加的准确,虽然它们还不能区分所有肠球菌的物种(例如鹑鸡肠球菌和铅黄肠球菌有99.8%的16SrDNA的同源性)。这种方法已经成功的在应用:1)rRNA基因间隔区的特异PCR扩增技术(Naimietal.,1997),ddl和van基因(Satakeetal.,1997;Kariyamaetal.,2000),ace基因(Duhetal.,2001),sodA基因(Jacksonetal.,2004),2)转录调控基因Ef0027的扩增(Liuetal.,2005),3)

6、ddl基因(Ozawaetal.,2000),cpn60基因(Gohetal.,2000)和atpA基因(Naseretal.,2005)的测序,和4)利用5‘端引物(GTG)的细菌基因组重复序列PCR技术(Svecetal.,2005)。有许多人试图区分从人分离的菌株和从食物分离的菌株,大部分主要关注的DNA指纹图谱。这些研究使用了多种分子分型方法,如扩增rDNA限制性分析(ARDRA)(UlrichandMuller,1998),脉冲场凝胶电泳(PFGE)的DNA宏观限制模式(Deschee-maekeretal.,1997;Gamb

7、arottoetal.,2001;Vancanneytetal.,2002),随机扩增多态性DNA(RAPD)-PCR检测(Cocconcellietal.,1995;Descheemaekeretal.,1997;Andrighettoetal.,2001;Cosentinoetal.,2004;Martinetal.,2005)和扩增片段长度多态性(AFLP)技术(Antonishynetal.,2000;Willemsetal.,2000;Vancanneytetal.,2002)。脉冲场凝胶电泳(PFGE)已成功地用于表现临床和食

8、品株之间的差异,以及从家禽和住院患者分离的菌株的差异(vandenBraaketal.,1998;LemckeandBulte,2000)。虽然电泳是区分肠球菌属菌株的黄金标准方法,但是它比较

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