调肝颗粒剂抗免疫性肝损伤的实验研究

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1、调肝颗粒剂抗免疫性肝损伤的实验研究陈忻，赵晖，张楠，穆阳，张秋云【关键词】中药；,,中药药理；,,免疫性肝损伤；,,保肝　　摘要：目的观察调肝颗粒剂对卡介苗（BCG）和脂多糖（LPS）所致小鼠免疫性肝损伤模型的保护作用，并探讨其作用机制。方法BCG（1×104个活菌）静脉注射致敏小鼠，12d后静脉给LPS（6μg/只）攻击造成小鼠免疫性肝损伤，4h后取血和肝脏，测血清AST和ALT并观察肝脏病理变化；乙酰氨基酚腹腔注射（500mg/kg）致肝损伤，2.5h后处死小鼠测血清GSH和肝脏MDA。结果给BCG的同时给调肝

2、颗粒剂（20g/kg）能显著的减轻BCG和LPS所造成的免疫性肝损伤小鼠ALT，AST的升高，减轻肝细胞坏死，促进枯否氏细胞增生，促进肝细胞增生；并能显著减轻对乙酰氨基酚致肝损伤引起的GSH降低，同时减少肝脂质过氧化物生成。结论调肝颗粒剂对BCG加LPS致小鼠免疫性肝损伤有显著的保护作用，这可能与它增加机体的抗氧化能力有关。　　关键词：中药；中药药理；免疫性肝损伤；保肝　　ProtectiveEffectsofTiaoganGranulesonImmunologicLiverInjuryinMice　　Abstra

3、ct：ObjectiveToinvestigatetheprotectiveeffectsofTiaoganGranulesonimmunologicliverinjurymodel.Methods(1)Theliverinjurymodeliceeasured.(2)Theothermodelg/kg,themiceeasured.ResultsTiaogangranulesiceetime.TheincreaseofALTandASTproved.ThedecreaseofGSHandtheincreaseof

4、MDAonthemiceinjectedparacetamoledonimmunologicliverinjurymodel.Itentofcapabilityonresistedstressofoxidationofit.　　KeyacologyofTraditionalChineseMedicine;ImmunologicLiverInjury;ProtectiveEffectsonLiverInjury　　调肝颗粒剂是肝病治疗专家、中华中医药学会内科肝病专业主任委员钱英教授沿用多年治疗乙型和甲、丙型肝炎的经验

5、方。全方由槲寄生、黄芪等8味药组成，清热祛湿、疏肝利胆、补气养阴、活血通络。为阐述该方的保肝作用及作用机理，我们观察了调肝颗粒剂对小鼠免疫性肝损伤和化学性肝损伤的影响。现报道如下。　　1材料与方法　　1.1材料ICR雄性小鼠体重25～30g，由首都医科大学实验动物中心提供。丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）检测试剂盒，北京中生北控生物科技股份有限公司产品。谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）测定试剂盒为南京建成生物工程研究所产品。卡介苗（BCG）北京天坛生物制品研究所产品，批号2003070

6、4，脂多糖（LPS），美国Sigma公司产品。　　1.2方法　　1.2.1小鼠免疫性肝损伤模型制备参照文献〔1〕并做适当修改，ICR雄性小鼠25～30g，每鼠尾静脉注射BCG0.2ml（1×104个活菌）后正常饲养12d，再经尾静脉注射LPS（6μg/只）攻击，以诱导肝损伤，于4h后眼眶取血，血浆离心（3500r/min）10min，血清测AST和ALT；同时取肝用10％甲醛固定，制作石蜡切片做病理检查。　　1.2.2乙酰氨基酚肝损伤模型制备参照文献〔2〕ICR小鼠腹腔注射乙酰氨基酚500mg/kg，2.5h后断颈

7、放血处死，取肝脏测定GSH和MDA含量。　　1.2.3给药方法调肝颗粒剂槲寄生、黄芪等8味药均为北京市药材公司市售饮片，制成100％的水煎剂冰箱保存备用。ICR雄性小鼠25～30g共24只，随机分为免疫性肝损伤模型组、损伤加调肝颗粒组和对照组，每组8只；调肝颗粒剂组于给BCG同时开始口服灌胃调肝颗粒剂100％水煎剂20g生药/kg，直至给LPS攻击当日，对照组同时给予生理盐水。另取ICR小鼠雌雄各半，20～25g共24只，随机分为乙酰氨基酚肝损伤组，损伤加调肝颗粒剂组和对照组，每组8只，调肝颗粒剂组给100％调肝颗

8、粒剂水煎剂20g生药/kg。7d后，给乙酰氨基酚造成肝损伤。对照组同时给予生理盐水。　　2结果　　2.1调肝颗粒剂对免疫性肝损伤的影响结果见表1。　　表1调肝颗粒剂对免疫性肝损伤小鼠血清AST，ALT的影响（略）　　与正常组比较，#P0.001；与模型组比较，*P0.001；n＝8表1结果显示，调肝颗粒剂对BCG加LPS造成的小鼠免疫性肝损伤有显著的保护作用