当归补血、活血作用谱效关系探究

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1、当归补血、活血作用谱效关系探究［摘要］用乙酰苯胼（APH）复制血虚小鼠模型，于实验第1，4，7d皮下注射APH，剂量为200，100，100mg•kg-l（0.01mL•g-1）。于造模第10天开始灌胃给予当归提取物（生药剂量为2.4g•kg-l）,连续10d。观察当归不同提取部位对血虚小鼠RBC、Hb、PLT、胸腺、脾脏及体重变化等指标的影响。用灰色关联统计方法将HPLC指纹图谱各共有峰的峰面积和补血、活血药效数据相关联，研究谱效相关性。结果显示，水提醇沉上清（DSC）部位补血、活血效果较好。

2、根据关联度大小确定了DSC中各成分对补血、活血作用贡献程度。其中，阿魏酸的贡献最大，但不应忽略其他成分的贡献。该文研究有效组分的HPLC指纹图谱及谱效关系，确定了DSC部分补血、活血的物质基础，为表征其谱效相关性提供有效途径。［关键词］当归；血虚模型；指纹图谱；补血；活血；灰关联度；谱效关系［收稿日期］2013-08-18［基金项目］国家“十二五”科技支撑计划项目（2011BAI05B02）［通信作者］封士兰，教授，博士生导师，从事中药中化学成分分离分析及中药新药研究工作，Tel:1399316

3、2172,Fax：(0931)8915686，E-mail：fengshl@Lzu.edu.cn［作者简介］杨英来，硕士研究生，Tel:13919844537,E-mail：yangyinglll@126.com当归为伞形科Umbrelliferae植物当归Angelicasinensis(Oliv.)Diels的根，当归入肝、心、脾经，药性甘、辛、温，具有补血、活血、调经止痛、润肠通便的功效。用于血虚萎黄，眩晕心悸，月经不调，经闭痛经，虚寒腹痛，肠燥便秘，风湿痹痛，跌仆损伤，痈疽疮疡［1］。《

4、景岳全书本草正》曰：当归，其味甘而重，故专能补血、活血；其气轻而辛，故又能行血。补中有动，行中有补，诚血中之气药，亦血中之圣药也［2］。对当归的药理作用和化学成份的现代研究表明，当归对机体的心血管系统、血液系统、免疫系统等均具有显著的药理作用［3-4］，当归及其有效成分挥发油类、香豆素类、有机酸类、糖类、黄酮类、氨基酸、维生素和其他微量元素对机体血液、免疫、神经、循环、呼吸等系统均有较强的药理作用，其中有机酸类中主要成分阿魏酸，能有效抑制血小板聚集和血栓形成，当归内酯能促进胸腺、脾细胞的增殖［5

5、-6］。当归中其他众多的化学成份和化学成分群与活血补血作用的关系未见文献报道。本文采用化学药物损伤法造成小鼠血虚模型，首先研究比较了当归不同提取部位对血虚模型小鼠的外周血象和免疫器官的影响，结果发现水提醇沉上清部位补血、活血作用较为明显；因此用高效液相色谱法研究了该部分的指纹图谱，观察了不同批次当归药材水提醇沉上清部位补血、活血作用，用灰关联度法分析了该部位指纹图谱与补血、活血作用的谱效关联，从中找到了20个与补血活血作用关联度大的成分，建立了基于活血补血作用的当归指纹图谱，为临床使用当归治疗血

6、虚证提供了理论依据。1材料1.1药材与试剂当归药材（10批，兰州佛慈制药股份有限公司提供，主产于甘肃定西和陇南，以及云南鹤庆），经柴国林高级工程师（兰州佛慈制药股份有限公司）鉴定为Angelicasinensis（Oliv.）Diels。阿魏酸（中国食品药品检定研究所，HPLC彡98%，批号100834-200701）,藁本内酯（中国食品药品检定研究所，HPLC彡98%，批号110756-200110），洋川芎内酯H（上海一林生物科技有限公司，HPLC彡98%，批号YL2013020301）,洋

7、川芎内酯1（上海一林生物科技有限公司，HPLC彡98%，批号YL2013021501）。色谱甲醇（山东禹王试剂公司），纯净水（兰州大学第一医院生产），醋酸（北京华盾化工公司），95%乙醇（北京金辉化学试剂有限公司），乙酰苯胼（APH，上海劲马生物科技有限公司），聚山梨酯-80（吐温-80，江苏省海安石油化工厂。）1.2仪器Watersalliance2695高效液相色谱仪，Waters2996型PDA检测器，Millenium32色谱工作站；1.0中药色谱指纹图谱计算机辅助相似性评价系统软件（中

8、南大学）；超声仪：KQ-400DB；sartoriusBP211D1/10天平；sartoriusBS224S1/1万天平；SF-3000血细胞分析仪（日本SYSMEX公司）。1.3动物昆明种小鼠，18〜22g，雌雄兼用，由兰州大学动物实验中心提供，合格证号SCXK（甘）2009-0004o2方法与结果2.1当归提取物的制备取当归药材100g，加7倍量水，按2010年版《中国药典》方法［1］，连续蒸馏8h，收集油层。油层用乙醚萃取3次，合并萃取液，除去乙醚即得部位1，即为挥发油（提取率为0.4%