食品中病原微生物快速检测技术探究

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1、Pa品中病原微生物快速检测技术探究摘要：随着环境污染的不断加剧，病原微生物对人类造成的威胁也越来越大。近年来，国内外由病原微生物引起的食源性疾病事件频频发生，引起了社会各界的广泛关注。在传统检测方法的基础上，目前已经改进开发了一些快速的检测工艺和技术，微生物检测技术已逐渐由传统的培养水平向更高水准的水平迈进。微生物快速检测技术具有快速、经济、操作简单、适用广泛等诸多优点，显现出良好的商业应用前景。关键词：食品安全；病原微生物；快速检测食品安全不仅是国际社会的重大议题，也已经成为我国社会关注的焦点之一。食品安全是全球性问题，而由微生物引起的食源性疾病是食品安全的主要问题。在食品生产、加工、储存、

2、运输及销售的各个环节中，微生物的大量繁殖均会引起食品腐败变质，进而导致食源性感染或食物中毒。食源性病原微生物的检测技术直接关系到预防与控制食源性疾病的成败，因此实现食品中病原微生物的快速检测对于控制食品质量以及保证食品安全至关重要。一、食品中病原微生物概述病原微生物是指可以侵犯人体，引起感染甚至传染病的摘要：随着环境污染的不断加剧，病原微生物对人类造成的威胁也越来越大。近年来，国内外由病原微生物引起的食源性疾病事件频频发生，引起了社会各界的广泛关注。在传统检测方法的基础上，目前已经改进开发了一些快速的检测工艺和技术，微生物检测技术已逐渐由传统的培养水平向更高水准的水平迈进。微生物快速检测技术具

3、有快速、经济、操作简单、适用广泛等诸多优点，显现出良好的商业应用前景。关键词：食品安全；病原微生物；快速检测食品安全不仅是国际社会的重大议题，也已经成为我国社会关注的焦点之一。食品安全是全球性问题，而由微生物引起的食源性疾病是食品安全的主要问题。在食品生产、加工、储存、运输及销售的各个环节中，微生物的大量繁殖均会引起食品腐败变质，进而导致食源性感染或食物中毒。食源性病原微生物的检测技术直接关系到预防与控制食源性疾病的成败，因此实现食品中病原微生物的快速检测对于控制食品质量以及保证食品安全至关重要。一、食品中病原微生物概述病原微生物是指可以侵犯人体，引起感染甚至传染病的微生物，又称病原体。病原体

4、中，以细菌和病毒的危害最大。病原微生物指朊毒体、寄生虫（原虫、蠕虫、医学昆虫）、真菌、细菌、螺旋体、支原体、立克次体、衣原体、病毒。病原微生物依附在食物上的过程中，短时间内无法通过肉眼观察出来。在传统的病原微生物检测过程中，一般通过使用增菌培养基增加目的菌的数量，或使用选择性培养基迗到获得单个纯化微生物的目的。整个检测过程繁琐，需要耗费大量的人力物力，而且检测周期长、灵敏度低，难以满足国内外对食品安全检测的要求。目前，国内外许多相关机构和学者都致力研究快速检测技术和方法，已改进开发了一些快速的检测工艺与技术，微生物检测技术已逐渐由传统的培养水平向更高水准的水平迈进。二、病原微生物快速检测工艺开

5、发与研究1.DNA探针技术DNA探针技术（或分子杂交技术），就其本质来讲，指的就是利用高精确性的碱基互补配对及DNA分子的复性、变性对指定DNA序列展开探查的一种新技术。具体来讲，DNA探针就是对指定DNA片段进行生物素或同位素标记，这种特定的DNA片段在大小上存在明显差异，如有的片段大概只相当于20个碱基的大小，而有的DNA片段则可能大如寄生虫基因组。当等待检测的未标记单链DNA与DNA探针按照碱基顺序互补融合时，通过H-将这两条单链连接并形成双链杂交分子，通常将这种双链杂交分子标记为“DNA-RNA”；对于未能实现配对结合的核苷酸则进行溶解，并用酶检测或放射自显影等检测系统对杂交反应结果进

6、行检测。鉴于DNA分子在碱基互补配对中的高精确性，单链DNA探针往往只与样品中变性处理的DNA单链完成配对杂交。前面我们提到用生物素或同位素对DNA探针进行标记处理，也是为了提高实验的敏感性。据资料显示，目前DNA探针技术在乙肝病毒、沙门氏菌、产肠毒素大肠杆菌等微生物检测中的应用已较为成熟。1.基因芯片技术上世纪末诞生的一项新型生物技术：基因芯片技术。基因芯片技术是将各种基因寡核苷酸点样于芯片表面，微生物样品DNA经PCR扩增后制备荧光标记探针，再与芯片上寡核苷酸点杂交，最后通过扫描仪定量和分析荧光分布模式来确定检测样品是否存在某些特异微生物翻。基因芯片技术理论上可以在一次实验中检测出所有潜在

7、的致病原，也可以用同一张芯片检测某一致病原的各种遗传学指标。由于基因芯片技术检测的灵敏度、特异性和快速便捷性都很高，在致病原分析检测中有广阔的发展前景。2.电阻抗法电阻抗法是刚兴起不久的一项生物学技术，已经开始应用于食品微生物的检验。电阻抗法原理简言之，就是细菌在培养基内生长繁殖的过程中，将会使培养基中的大分子电惰性物质（如碳水化合物、蛋白质和脂类等），代谢为具有电活性的小分子物质（如乳酸盐、醋酸