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1、Slug与MVD在食管鳞癌中的表达及其临床意义魏娉路三军通信作者桂红武姜琳娜安欣郭俊萍邯郸市第一医院病理科河北邯郸056002【摘要】目的观察食管鳞癌组织中Slug蛋白表达变化，并分析其与微血管密度(microvasculardensity,MVD)的关系.方法采用免疫组织化学SP法检测食管鳞癌(70例)及其癌旁组织(20例)中的Slug蛋白,采用抗CD34多克隆抗体标记血管内皮细胞以检测MVD,分析二者的关系.结果食管鱗癌组织中,Slug蛋白表达率高于癌旁组织(P<0.05),.目.与分化程度、
2、浸润深度、淋巴结转移及pTNM分期相关(P<0.05);食管鳞癌组织中,MVD高于癌旁组织，且与分化程度、浸润深度、淋巴结转移及pTNM分期相关(P<0.05);食管鱗癌组织中,Slug与MVD表达均增加.结论食管鳞癌组织中Slug与MVD可能存在协同作用，共同促进肿瘤的血管牛.成并协调食管癌的浸润转移.【关键词】食管鳞癌；Slug;CD34;MVD;免疫组织化学【中图分类号】R735【文献标识码】B【文章编号】1008—6315(2015)10—0430—021资料与方法1.1临床资料选取邯郸市
3、第一医院2012年5月〜2014年5月手术切除并经病理诊断为食管鳞状细胞癌的标木70例,其中男40例、女30例,年龄64.6Splusmn;6.07(45—77｝岁.食管癌pTNM分期(UICC,2009);I、II期44例,111、IV期26例;病例术前均未行放、化疗.另在70例食管癌标木中随机选取20例癌旁组织(肿瘤浸润边缘以外〉5cm)作为对照.1.2主要试剂及方法1.2.1主要试剂兔抗人Slug多克隆抗体浓缩液(1:100),购自北京傅奥森生物有限公司.兔抗人CD34多克隆抗体工作液、DA
4、B显色试剂及SP试剂盒购自福州迈新试剂有限公司1.2.2Slug检测方法釆用免疫组织化学SP法.组织标木经10%中性甲醛固定，石蜡包埋,4μm连续切片.SP法操作步骤严格按照试剂盒说明书进行.用己知阳性切片作为阳性对照，以PBS代替•一抗作为阴性对照.Slug以细胞核和（或）细胞质出现棕黄色或黄色颗粒为阳性细胞.每张切片观察10个高倍视野（×400）,每个视野计数100个肿瘤细胞，根据阳性细胞染色强度J分未着色、1分浅黄色、2分棕黄色、3分棕褐色;按阳性细胞百分比：1分10&le
5、;%、2分11%—25%、3分26%—75%、4分76%—100%,将细胞染色程度计分与阳性百分数计分相乘即为综合评分3—2分阴性（一>、3一4分弱阳性（+）、6—8分阳性（++）、9-12分强阳性（+++）,分值大于等于3即可定为阳性.1.2.3MVD计数方法按Weidner等［2］的方法.在低倍视野（×40>下观察切片，选取肿瘤微血管分布密度最高区，再在中倍视野（×200）下计数5个视野的微血管数目，取平均值，即为MVD.在肿瘤浸润区域任何被抗体染色的申个细胞或细胞团，
6、不管奋没奋形成食管鱗状细胞癌管腔，只要它与周围的微血管、肿瘤细胞和其他连接组织成分有一个清楚的分离，都认为是1个可计数的微血管.1.2.4统计学方法采用SPSS13.0软件包进行统计学分析.计量资料以X&pluSmn;S表示,组间比较采用t检验及方差分析;计数资料以百分比表示、样本率的比较采用χ2检验.2结果2.1食管癌及正常组织中Slug表达及MVD值Slug在正常对照组中的表达较低，阳性率为5%（图1）,在食管癌中的表达显著升高，阳性率为74.3°%（图2）,差异有统计学意义（P<0.
7、05）.CD34阳性着色位于血管内皮细胞，在间质及癌巢中均有分布，正常食管组织中MVD值:35.13±4.73（图3），食管鳞状细胞癌组织中MVD值47.89±6.23（图4），食管癌组MVD值明显高于正常对照组,两组比较差异有统计学意义（P<0.05）.2.2食管鱗状细胞癌组织中Slug蛋白表达及MVD值与临床病理参数的关系Slug阳性表达与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移及pTNM分期有关（P<0.05）,与性别、年龄及肿瘤大小无关（P〉0.05）.MVD值与肿瘤
8、分化程度、浸润深度、淋巴结转移、pTNM分期有关,（P<0.05，见表1）,与性别、年龄及肿瘤大小无关（P〉0.05）.见表1.3讨论Slug又称为Snail2，是主要的EMT转录因子.研究表明Slug可促使上皮间质转化，在胃癌、结肠癌、肝癌、宫颈癌、卵巢癌、头颈部鱗状细胞癌等许多肿瘤组织中呈中高表达,被视为肿瘤转移的促进因素，作为EMT过程中的关键调控因子，在肿瘤细胞增殖分化、侵袭、转移、抗调亡以及血管生成等过程中起了重要作用[1].本实验研究表明:Slug在食管鳞状细胞癌中的表
