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1、纤维素酶提取法与传统提取法在苦参提取中的应用李明松1刘文2田海林1(1安顺职业技术学院贵州安顺561000)(2贵阳中医学院贵州贵阳550002)【摘要】目的用苦参提取苦参碱,对其纤维素酶提取法和传统提取法进行对比实验。方法纤维素酶提取法(简称酶提取法),即每克生药加入50U(0.25g)纤维素酶,充分搅拌,其他工艺同原工艺;传统提取法。结果酶提取法提高了苦参碱的收率,与传统提取法相比有显著性差异,P<0.05o结论纤维素酶的加入,提高了苦参碱的收率。【关键词】纤维素酶酶解技术传统提取法苦参碱含量测定【中图分类号】R284.2【文献标识码】A【文章编号】2095-1752(2012)
2、34-0106-02TheApplicationoftheCellulase-MethodandTradition-MethodforSophoraFlavescensExtractionLiMing-song1LiuWen2TianHai-linl(l.AnshunVocationalandTechnicalCollege,Guizhou,561000,China;)(2GuiyangCollegeofTraditionalChineseMedicine,Guizhoib550002,China)[Abstract]Objective:Toextractmatrineinsophorae
3、flavexcensandtodocomparativeexperimentoftheextractionwithcellulase-methodandtradition-method・Methods:Cellulaseextraction(Itiscalledenzymeextractionforshort),Itmeansadding50U(0.25g)cellulosetoeachgramofcrudedrugandmixwell.Anotherprocessarethesameasoriginalone;Traditionalextraction.Results:Thematrin
4、e’syieldisimprovedbytheenzymeextraction.Ithassignificantdiffereneetocomparewiththetraditionalextraction,P<0.05.Conclusion:Thematrine’syieldcanbeimprovedbycellulase-adding.【Keywords]cellulosethetechnologyofenzymatichydrolysiscontentdeterminationtraditionalextractionmatrine传统的提取方法有煎煮、
5、浸渍、渗漉、回流等,这些方法存在着一些不足之处,女m煎煮法提取温度高、浸渍法周期长、渗漉法和冋流法成本高等。近年来,在中药提取方面出现了许多新技术,中药酶解技术就是其中的一种。中药酶解技术⑴就是根据植物药材细胞壁是由纤维素构成,利用酶反应所具有的高效专一性⑵,选择相应的酶,将细胞壁水解或降解,破坏细胞壁的组织结构,使其有效成分暴露出来,并溶解于溶剂中,从而达到提取细胞内有效成分的新方法,由于植物提取过程中的屏障一一细胞壁被破坏,因而酶解有利于提高有效成分的提取率。根据这一原理,我们选用苦参提取苦参碱⑶作为研究对象,并对酶提取法和传统提取法进行对比实验,来验证纤维素酶对苦参提取苦参碱的影响。
6、一、实验仪器与药品纤维素酶粗品(活力单位10000µ/g)批号:F20050512,国药集团化学试剂有限公司;对照品苦参碱(批号:110805-200306)供含量测定用,中国药品生物鉴定所;药材苦参为豆科槐属(Leguminosae)ft物SophoraflavescensAit的干燥根,贵阳市花果园药材批发市场提供,经中药鉴定教研室鉴定;高效液相色谱仪(LC5A),日本岛津;所用试剂均为分析纯。二、实验方法与结果(-)色谱条件[4]色谱柱:氨基柱,流动相:乙氧■无水乙醇・3%磷酸溶液(80:10:10);流速:lml/min,柱温30°C,检测波长:220nm,在此条件下,
7、药材中苦参碱与其他成分能很好地分离。(二)标准品溶液的制备精密称取苦参碱标准品,置10ml容量瓶中,加甲醇溶解至刻度,摇匀,得到浓度分别为0.002、0.014、0.026、0.050、0.062、0.074、0.086mgml的苦参碱标准溶液。(三)从苦参中提取苦参碱的原工艺(供试品的制备方法)称取苦参药材约50g,精密称定,加水400ml,HCL调PH4.5,置于50°C的水浴中浸泡15min,煎煮两次,每次30m