血脂相关影响n素与广西壮族人群泌尿系结石关系研究

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1、血脂相关影响N素与广西壮族人群泌尿系结石关系研究［摘要］目的探讨血脂相关影响因素与广西壮族泌尿系结石的相关性。方法分别选取来院就诊的120例壮族泌尿系结石患者与120例壮族体检正常者列为结石组和对照组，采集两组受检者空腹静脉血液3〜5ml,分离血清后采用日立7600全自动生化分析仪进行总胆固醇（Tc）、血三酰甘油（TG）、血浆低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（IIDL-C）和血浆载脂蛋白A、B、E（ApoA、ApoB、ApoE）测定。分析两组人群血脂相关因素及家族史差异•并用PCR-测序技术检测两组人群的ApoE基因序列。结

2、果两组人群TG、TC、HDL-C和血浆ApoE比较差异有统计学意义（P〈0.001）,结石组TG、TC和血浆ApoE水平高于对照组，HDL-C水平低于对照组。结石组有家族史33人，占27.5%（33/120）,对照组有家族史14人，占11.7%（14/120）,两组比较差异冇统计学意义（x2二9.551,卩二0.002,0R=2.87,95%CI：1.45-5.71）。两组人群ApoE基因的三个外显子序列对比无突变。结论在广西壮族人群中，高Tc、TG、ApoE水平及低HDL-C水平与泌尿系结石形成相关，有结石家族史的人群更易患泌尿系结石，但Ap

3、oE基因第1、2、3外显子上未发现与泌尿系结石相关的基因突变。［关键词］血脂；泌尿系结石；基因泌尿系结石是泌尿外科最常见的疾病,在广西壮族人群中发病率较高。泌尿系结石成因复杂，与很多因素均有关系，如遗传、解剖、环境、性别、代谢等。其中血脂异常与泌尿系结石的关系在过去未受重视•但近年来越来越多的研究结果表明血脂异常与泌尿系结石发病密切相关。在遗传研究方面，肾结石双生子对照研究揭示了其遗传度为52%-56%,反映了遗传在泌尿系结石形成屮的重耍作用。本研究探讨了血脂水平对广西壮族人群泌尿系结石的影响，并研究了部分遗传病因。1•资料与方法1.1-般资料

4、结石组的纳入标准：（1）经x射线、B超、CT等影像学检查确诊泌尿系结石；（2）父母皆为壮族，且居住本地10年以上。排除标准：（1）患有尿路畸形、尿路感染等泌尿系统疾病；（2）胃、肠等消化道功能疾病患者；（3）存在肾衰、肾功能不全等症。共选人120例泌尿系结石患者参与木次研究，男性83例•女性37例；年龄11-73岁，平均（41.0_+10.5）岁。其中上尿路结石82例,占68.3%；下尿路结石17例,占14.2%；复合型结石21例，占17.5%o同吋选取同期体检正常且无泌尿系结石病史的120名正常者,纳人对照组。对照组男性79例，女性41例;年

5、龄10-70岁，平均（39.0±10.6）岁。对照组的选择也均为壮族人群，并保证了两组人群在年龄、性别方面差异无统计学意义（P>0.05）o1.2实验仪器Hitachi7600型全自动生化分析仪（Fl立，FI本）,Verity96wellPCR仪、GeneGenius凝胶成像仪（syngene,英国），3730XL测序仪（ABI,美国）,HC-2518R冷冻离心机（BBI,加拿大），TGL-14G?_式高速离心机（上海医疗器械有限公司），DYY-8C电泳仪（北京六一仪器厂），H6-1电泳槽（上海精益有机玻璃制品仪器厂），XW-80A微型旋涡混合

6、仪（上海沪西分析仪器厂有限公司），HS-800D数显恒温水浴锅（芜湖金瑞特计量检测仪器有限公司），SW-CJ-1D洁净工作台（江苏苏洁净化设备厂），100-1000ml.20-200ml、0.5-10mb0.1-0.25ml移液器（BBI公司,加拿大）。1・3实验试剂引物PfuDNAPolymerase高温聚合酶>MgCl,（25mM）>10XPCRBuffer>dNTP（1OmM）>6XDNALoadingDye>DNAmarker>10XTAE、PCR产物纯化回收试剂盒、无乙水醇、异丙醇、丙三醇、DNA提取试剂盒。1・4检查及分析方法1.4

7、.1JflL脂检查采集受检者空腹静脉血液3-5ml,分离血清后采用日立7600全自动生化分析仪进行总胆固醇（TC）、血三酰甘油（TG）、血浆低密度脂蛋口胆固醇（LD【厂C）、高密度脂蛋口胆固醇（HDI厂C）和血浆载脂蛋白A、B、E（ApoA、ApoB>ApoE）测定。1.4.2DNA提取将分离所剩血液按DNA提取试剂盒操作•提取出的DNA经紫外分光光度计检测浓度与纯度，达到标准后放置200C冰箱保存。1.4.3PCR扩增及基因测序ApoE三个外显子引物分别为：1F5'-CTCTATGCCCCACCTCCTF-3'：1R5'-CCCCGAGTAG

8、CTCTCCTGA-3'：2F5'-AACAAG-GCTFGGAAGGCTA-3?:2R5‘-CAGCACAGAAGCCT-CAGAAGA-3?；3F