吸光光度法(3)

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1、第十章、吸光光度法Al3+Cu2+KMnO4Ni2+Fe3+通过比较溶液颜色深浅而求得其浓度的分析方法称为比色分析法比色分析的基本依据是有色物质对光的选择性吸收作用。光吸收的本质：吸收光谱有原子吸收光谱和分子吸收光谱。原子吸收光谱是由原子（而不是分子）外层电子选择性地吸收某些波长的电磁波而引起的，原子吸收分光光度法就是根据原子的这种性质建立起来的。分子吸收光谱是分子轨道中外层电子吸收某一波长范围的能量而引起的，通常吸收的是紫外及可见光部分。这种价电子跃迁而产生的分子光谱又称为电子光谱。电子跃迁时必须伴有分子的振动和转动能级的变化，所以分子光谱不是线光谱而是带状光谱。若用红外光照射，不

2、能引起电子的跃迁，只能引起振动和转动能级的变化，这样引起的吸收光谱称为振动－转动光谱或红外光谱。它的吸收与分子结构密切相关，用于研究分子结构。电磁波波长范围跃迁类型分析方法X-射线10-1-10nmK、L层电子X射线光谱法远紫外光10-200nm中层电子真空紫外光度法近紫外光200-400nm价电子紫外光度法可见光400-750nm比色及可见光度法近红外光0.75-2.5m分子振动红外光谱法中红外光2.5-50m第一节、吸光光度法概述吸光光度法是基于物质对光的选择性吸收而建立起来的分析方法，包括：比色分析法，可见光度法，紫外分光光度法，红外分光光度法。比色分析法和分光光度法特点:

3、(1)、灵敏度高测定的最低浓度可达10-5~10-6mol/L，相当于含量0.001~0.0001%的微量组分.(2)、准确度较高分光光度法的相对误差为2~5%.(3)、操作简便，测定速度快(4)、应用广泛第二节、吸光光度法的基本原理一、互补色光白光：复合光复合光单色光单色器单色光1＋单色光2白光互补色光白光二、物质的颜色和对光的选择吸收(1)、光吸收程度最大处的波长，称为最大吸收波长，常用λmax表示.(2)、光吸收曲线与物质特性有关，这些特性客作为物质定性鉴定的依据.(3)、组成量度不同的同种物质的溶液，在一定波长处吸光度随溶液的组成量度增加而增大，这个特性可作为物质定量分析的依

4、据.IoItIaIo=Ia+It+IrIr设入射光，吸收光，透射光和反射光的强度依次为Io，Ia，It，Ir，则他们之间的关系为:第三节光吸收的基本定律一、朗伯定律溶液对光的吸收程度与液层厚度的成正比。二、比耳定律溶液对光的吸收程度与浓度成正比。K为比例常数，它与入射光的波长，有色物质的性质和溶液的温度等因数有关.上式表示当一束平行单色光通过均匀的溶液时，溶液对光的吸收程度与溶液的组成量度和液层厚度的乘积成正比.这一定律称为朗伯-比耳定律，也称为光吸收定律.三、朗伯-比耳定律四、透光率，吸光度，吸光系数，摩尔吸光系数当液层厚度b的单位为cm，组成量度c的单位为g/L时，则常数K用a表

5、示，它的单位为L·g-1·cm-1，a称为吸光系数.当b的单位为cm，组成量度c的单位为mol/L时，则常数K用ε表示，它的单位为L·mol-1·cm-1，ε称为摩尔吸光系数.摩尔吸光系数ε时有色物质在一定波长下的特征常数，它可以衡量显色反应的灵敏度.ε值越大，表示该有色物质对该波长光的吸收能力越强，显色反应越灵敏.第四节、吸光光度法的仪器部件一、目视比色法用肉眼比较被测溶液同标准溶液颜色深浅，以确定被测物质含量的方法，称为玛纳斯比色法.最常用的目视比色法是标准系列法.标准系列法的优点是仪器简单，操作简便，而且可在复合光下进行测定.其缺点是配制标准色阶比较费时，由于某些有色溶液不够稳

6、定，常常现用现配.C1C2C3C4C5Cx二、光电比色法与分光光度法(一)、基本原理和特点1、标准曲线法光度法与目视法比较，其优点是:用光电池代替肉眼进行测量，消除了肉眼的主观误差，提高了分析结果的准确度.2、比较法.(二)光度计的基本部件一般光度计是由光源，滤光片，比色皿，光电池和检流计等五大部件组成.1、光源2、单色器1、滤色片目前普遍使用的是国产型光电比色计，有三种配套的滤光片（红色650，绿色530，蓝色440）2、棱镜3、光栅1000条/mm3、比色皿(吸收池)4、光电池或光电管5、检流计(二)、分光光度计1、72型风光光度计2、75型分光光度计721型可见分光光度计特点：

7、棱镜单色器。T.A直读。使用消光片，可供高含量比色测定。技术指标：波长范围：360~800nm波长精度：±3nm(360~600nm)表面刻度：（T）0~100％（A）0~2722型可见分光光度计特点：能在可见光谱区域内对物质作定性定量分析。采用光栅单色器、具有波长精度高，单色性好等优点。采用3位LED数字显示，T.A.C直读。波长范围：330－800nm波长准确度：±2nm752型紫外可见分光光度计特点：采用全息闪耀光栅单色器，具有波长精度高，单色性好，