基于萘酰亚胺的生物硫醇探针的合成及对含硫醇氨基酸的检测

《基于萘酰亚胺的生物硫醇探针的合成及对含硫醇氨基酸的检测》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、为了确保“教学点数字教育资源全覆盖”项目设备正常使用，我校做到安装、教师培训同步进行。设备安装到位后，中心校组织各学点管理人员统一到县教师进修学校进行培训，熟悉系统的使用和维护。基于萘酰亚胺的生物硫醇探针的合成及对含硫醇氨基酸的检测　　摘要合成了以4羟基萘酰亚胺为荧光团，2，4二硝基苯磺酰氧基为特异性识别基团的生物硫醇探针4正丁基1，8萘酰亚胺。吸收光谱和荧光光谱结果表明，DNSBN对半胱氨酸、同型半胱氨酸和谷胱甘肽3种生物硫醇分子具有高效的检测识别能力，不受其它17种天然氨基酸的干扰。同时，通过荧光滴定实验证实了此探针是一种比

2、率型探针，555nm处的荧光强度与溶液中的生物硫醇分子浓度在0～20μmol/L范围内呈良好的线性关系，对Cys、Hcy和GSH的检出限分别为、和nmol/L。而吸收光谱、荧光光谱和质谱表征数据显示，生物硫醇与2，4二硝基苯磺酸酯发生亲核取代反应并导致磺酸酯的分解。随着识别基团的解离，探针分子的dPeT效应被解除，并出现非常明显的比色与荧光变化。HeLa细胞成像实验表明，探针DNSBN具有良好的生物相容性，能够对细胞外源性生物硫醇分子进行检测。　　关键词荧光探针；萘酰亚胺；半胱氨酸；同型半胱氨酸；谷胱甘肽　　1引言为了充分发挥“

3、教学点数字教育资源全覆盖”项目设备的作用，我们不仅把资源运用于课堂教学，还利用系统的特色栏目开展课外活动，对学生进行安全教育、健康教育、反邪教教育等丰富学生的课余文化生活。为了确保“教学点数字教育资源全覆盖”项目设备正常使用，我校做到安装、教师培训同步进行。设备安装到位后，中心校组织各学点管理人员统一到县教师进修学校进行培训，熟悉系统的使用和维护。　　生物硫醇是与人体健康息息相关的重要物质，其含量出现异常时，就会产生某些疾病。例如肝损伤、浮肿、头发脱色或儿童生长缓慢，都与体内半胱氨酸含量异常有关[1～3]；血清中同型半胱氨酸是心

4、脑血管疾病的一种标志物[4，5]，老年人的髋骨骨折和阿尔兹海默病等疾病也被认为与其密切相关[6～9]；谷胱甘肽作为一种重要抗氧化剂，对维持细胞内部的还原环境和保护细胞器免收活性氧的损害起着重要作用[10]。目前，生物硫醇检测已经成为某些疾病诊断的重要依据。　　传统的分析检测生物硫醇的方法如高效液相色谱法[11～13]、质谱法[14]、毛细管电泳法[15]、比色分析法[16～18]、电化学分析法[19]等，虽然具有检出限低、重现性好、精确度高等优点，但也存在一些明显的缺陷，如检测成本高、预处理复杂、难以用于体内检测等，限制了其进一

5、步的发展和应用。有机荧光传感器由于操作简单、能够实时检测及可用于体内检测等优势，近年被广泛用于生物、医疗和环境检测领域。目前，针对生物硫醇检测的荧光探针可以分为反应型荧光探针与配位络合型荧光探针两类，主要通过迈克尔加成[20]、醛的环化[21]、二硫键的断裂[22]或其它识别机理[23，24]进行识别。但这些探针大都存在检测限较高、不能在中性环境中使用以及合成复杂等问题。近年来，以2，4二硝基苯磺酰氧基/胺基为识别基团的荧光探针引起了研究者的关注[25，26]。该类探针利用硝基的强吸电子作用，使探针分子在激发态时出现dPeT为了

6、充分发挥“教学点数字教育资源全覆盖”项目设备的作用，我们不仅把资源运用于课堂教学，还利用系统的特色栏目开展课外活动，对学生进行安全教育、健康教育、反邪教教育等丰富学生的课余文化生活。为了确保“教学点数字教育资源全覆盖”项目设备正常使用，我校做到安装、教师培训同步进行。设备安装到位后，中心校组织各学点管理人员统一到县教师进修学校进行培训，熟悉系统的使用和维护。效应，从而引起�晒獯忝稹６�生物硫醇的引入导致分子内的苯磺酰氧基/胺基的离去，dPeT效应被抑制，荧光团的固有荧光得以发射。这类探针具有合成简单、检测限低、灵敏度高等优点，具

7、有很好的实际应用价值。　　本研究计合成了以萘酰亚胺为荧光团、2，4二硝基苯磺酰氧基为识别基团的比率型生物硫醇荧光探针4正丁基1，8萘酰亚胺nbutyl1，8Naphthalimide，DNSBN），实现了中性环境下对生物硫醇的检测，Cys、Hcy和GSH的荧光检出限分别为×10　　Symbolm@@8mol/L、×10　　Symbolm@@8mol/L和×10　　Symbolm@@8mol/L，并具有很好的细胞成像检测能力。　　2实验部分　　仪器与试剂　　AV400型核磁共振波谱仪：Agilent1290micrOTOFQII型

8、液相色谱质谱分析仪；F4500荧光光谱仪，U3010紫外可见吸收光谱仪；IX71F22FL型荧光显微镜。　　N2羟乙基哌嗪N′为了充分发挥“教学点数字教育资源全覆盖”项目设备的作用，我们不仅把资源运用于课堂教学，还利用系统的特色栏目开展课外活动，对学生进行安全教