呼吸道病毒抗原检测的临床研究

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1、为了确保“教学点数字教育资源全覆盖”项目设备正常使用，我校做到安装、教师培训同步进行。设备安装到位后，中心校组织各学点管理人员统一到县教师进修学校进行培训，熟悉系统的使用和维护。呼吸道病毒抗原检测的临床研究　　摘要：目的：探讨呼吸道病毒抗原检测在婴幼儿上呼吸道感染性疾病诊断中的应用价值。方法：采用直接荧光免疫法对我院收治的600例上呼吸道感染患儿进行呼吸道合胞病毒、腺病毒、副流感I型病毒、副流感Ⅱ型病毒、副流感Ⅲ型病毒、流感A型病毒以及流感B型病毒检测，同时进行以上病毒相关血清IgM抗体检测。结果：在600例上呼吸道感染性疾病中有13

2、4例呼吸道病毒抗原检测为阳性，占上呼吸道感染患儿的%；病毒IgM抗体阳性98例，占上呼吸道感染患儿的%，二者阳性检出率差异有统计学意义。结论：呼吸道病毒抗原检测有助于提高对呼吸道病毒感染的诊断率，方便临床及时制定合理的治疗方案。　　关键词：婴幼儿；上呼吸道感染；直接荧光免疫；呼吸道病毒抗原为了充分发挥“教学点数字教育资源全覆盖”项目设备的作用，我们不仅把资源运用于课堂教学，还利用系统的特色栏目开展课外活动，对学生进行安全教育、健康教育、反邪教教育等丰富学生的课余文化生活。为了确保“教学点数字教育资源全覆盖”项目设备正常使用，我校做到安

3、装、教师培训同步进行。设备安装到位后，中心校组织各学点管理人员统一到县教师进修学校进行培训，熟悉系统的使用和维护。　　上呼吸道疾病是儿科最常见的疾病之一，细菌感染和病毒感染是上呼吸道疾病的主要致病因素。随着细菌鉴定技术的不断发展，目前临床对于细菌感染性疾病的诊断已有很大提高；而临床目前对于病毒感染主要是检测机体对病毒产生的相关抗体，由于受机体免疫力等多种因素的影响而不能满足临床诊断需要。本研究通过对上呼吸道感染患儿采用直接荧光免疫法检测病毒抗原[合胞病毒、腺病毒、副流感Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ型病毒、流感A/B型病毒1和血清学指标进行相同的病毒抗体

4、检测，探讨直接免疫荧光法检测病毒抗原的临床应用价值。现报告如下。　　1资料与方法　　一般资料　　600例上呼吸道感染性疾病患儿均来自我院儿科病房，年龄7d至6岁，平均2岁4个月；男332例，女268例。　　方法　　标本采集600例患儿分别进行血清标本和鼻咽拭子标本采集，鼻咽拭子的采集严格按照说明书要求进行，拭子伸入鼻部后向鼻咽部水平伸入，伸入距离为从耳垂部到鼻尖长度的1半，2岁以下的儿童伸入距离约为拭子绒毛头长度的2倍，拭子伸入后要轻轻捻动拭子转圈。取样后要在1h内洗脱到生理盐水中。拭子由美国DHI试剂生产厂家原厂提供。　　试剂与仪器

5、病毒血清抗体检测采用国内知名厂家金标准试剂；呼吸道病毒抗原检测试剂由美国DHI公司生产；检测设备为OLMPUS荧光显微镜。　　病毒抗原标本制备将鼻咽拭子洗涤物移至尖底离心管中，1500为了充分发挥“教学点数字教育资源全覆盖”项目设备的作用，我们不仅把资源运用于课堂教学，还利用系统的特色栏目开展课外活动，对学生进行安全教育、健康教育、反邪教教育等丰富学生的课余文化生活。为了确保“教学点数字教育资源全覆盖”项目设备正常使用，我校做到安装、教师培训同步进行。设备安装到位后，中心校组织各学点管理人员统一到县教师进修学校进行培训，熟悉系统的使用

6、和维护。r/min离心5min，去上清留沉淀，用PBS洗涤沉淀数次，洗涤彻底，以避免鼻咽黏液产生的非特异性荧光。将沉淀溶解于的PBS溶液中，制成细胞悬液，于玻片上点7个样，室温下风干，冷丙酮固定。用染色试剂在35―37℃染色15min后用洗液洗1遍玻片，盖上盖玻片，用200倍放大的荧光显微镜观察结果。　　阳性结果判定病毒血清IgM抗体检测结果根据说明书要求进行阴、阳性结果判定；鼻咽拭子抗原检测结果根据呼吸道病毒抗原鉴定试剂盒说明书的判断标准，在荧光显微镜下显示苹果绿荧光的细胞为阳性细胞，显示橘红色为阴性细胞，在放大倍数为200倍的视野

7、下，每个视野有2个或以上阳性细胞的标本判断为阳性标本。　　统计学处理　　采用统计软件进行分析，组间比较采用x2检验，P<为差异有统计学意义。　　2结果　　病毒血清抗体与病毒抗原检测结果　　600例上呼吸道感染性疾病患儿中7种常见病毒血清IgM抗体阳性98例，占总感染患儿的%；直接荧光免疫7种常见病毒抗原鼻咽拭子检测阳性标本为134例，占总感染患儿的%，两种方法比较P<。　　病毒血清IgM和直接荧光免疫病毒抗原对不同病毒的检出情况　　在各种病毒检出例数中，直接荧光免疫法病毒抗原检出例数高于病毒血清抗体检出例数，差异有统计学意义。详见表1

8、。　　3讨论为了充分发挥“教学点数字教育资源全覆盖”项目设备的作用，我们不仅把资源运用于课堂教学，还利用系统的特色栏目开展课外活动，对学生进行安全教育、健康教育、反邪教教育等丰富学生的课余文化生活。为了确保“教学点数字教