产esbls肠杆菌科细菌检测及药敏分析

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1、产ESBLs肠杆菌科细菌检测及药敏分析李玉梅1安宏志2(1辽宁省朝阳市中心医院检验科辽宁朝阳122000;2辽宁省朝阳市卫生学校辽宁朝阳122000)【摘要】目的了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株在我院的分离率和耐药率，以利于对产ESBLs菌株的监控，同时指导临床合理用药。方法用法国生物梅里埃ATB-Expression自动微生物鉴定分析仪做细菌鉴定及药物敏感试验，对仪器提示为产ESBLs的菌株，用双纸片协同法进行ESBLs的确证试验。结果我院2013全年共检出大肠埃希菌313株，其中产ESBLS202株，占64.9%;检出肺炎克雷伯菌286株，产ESBLs

2、llO株，占38.5%；检出变形杆菌46株，其中产ESBLs20株，占43.4%。根据药敏试验结果显示，产酶株比非产酶株的耐药率高。结论随着广谱抗菌药物广泛应用于临床，产ESBLs菌株越来越多，产酶株比非产酶株的耐药性明显增强，.呈现有多重耐药菌株，可供选用的药物减少，给临床诊治带来巨大挑战。因此，各实验室对革兰氐阴性杆菌ESBLs检测显得更加重要，及时正确报告产ESBLs菌株，对指导临床合理用药，延缓细菌耐药性产牛.，抑制耐药蘭株的播散具有重要意义。【关键词】超广谱β-内酰胺酶药物敏感试验【中图分类号】R446.5【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2

3、014)15-0060-02细菌耐药性的增加在全世界都是个不争的事实，各地因使用的抗生素种类和习惯的差异，产ESBLs肠杆菌科细菌分离率和耐药率可能存在明显的不同。ESBLs主要由肠杆菌科细菌产生，这些酶能够水解青霉素、头胞菌素、氨曲南等β-内酰胺类抗牛.素，是介导阴性杆菌对广谱β-内酰胺酶类抗菌药物耐药的主要机制之一［1］。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌是临床常见的产ESBLs株，且容易导致多种药物耐药，是导致医院感染暴发的常见因素［2］。因此，现对我院2013年产ESBLs菌株的菌谱分布情况和细菌耐药情况进行分析整理，供临床医生参考，以便更好指

4、导临床合理用药。1.材料与方法1.1材料1.1.1标本来源所有标本均来自我院2013年临床送检的标本。1.1.2培养基5%兔纤维血培养基、麦康凯琼脂、巧克力琼脂、M-H培养基均购自温州康泰有限责任公司。1.1.3鉴定及药敏试条购自法国生物梅里埃公司；药敏纸片购自北京天坛。1.1.4质控标准菌株金黄色葡萄球菌ATCC29213大肠埃希菌ATCC25922铜绿假单胞菌ATCC27853均购自卫生部药品和生物制品检定所。1.2方法1.2.1室内质控微生物人员、仪器和设备、温湿度、革兰染液、触媒和氧化酶、凝固酶和拉丝试验、平板、鉴定及药敏试条均在质控范围之内。1.2.2将送检标本立即

5、接种于血平板、麦康凯、巧克力平板培养基，36°C、5%-7%CO2、24-48h,分离出可疑菌落。1.2.3用法国生物梅里埃ATB-Expression自动微生物鉴定分析仪做细菌鉴定及药物敏感试验。1.2.4对仪器提示为产ESBLs的菌株，用纸片协同法进行ESBLs的确证试验。具体步骤如下：用头孢他啶（30μg/片）和头孢他啶/克拉维酸（30μg/10μg/片）、头孢噻亏（30μg/片）和头孢噻亏/克拉维酸（30μg/10μg/A），分别测试其抑菌环的直径。当两种药物中任意一种加克拉维酸与不加克拉维酸的抑菌圈直径差≥5mm时，可确认为

6、产ESBLs株。细菌培养鉴定和药敏试验严格按全国临床检验操作规程（第3版）进行［3］。1.2.5病人信息和细菌鉴定及药敏试验结果通过lis导入电脑，再通过WHONET5.6进行统计。2.结果2.1细菌分离率2013全年共检出大肠埃希菌313株，其中产ESBLS202株，占64.9%；检出肺炎克雷怕菌286株，产ESBLsllO株，占38.5%；检出变形杆菌46株，其中产ESBLS2O株，占43.4%。2.2产酶株与非产ESBLs株耐药率（％）产ESBLs株的人肠埃希菌和肺炎克雷怕菌对美罗培南的耐药率为0,对亚胺培南、哌拉西林/他唑巴tt、阿米卡星的耐药率较低，对大多数抗菌药物

7、的耐药率明显高于非产ESBLs株。具体耐药率见表1。表1产ESBLs株与非产ESBLs株耐药率（％）1.讨论ESBLs主要由肠杆菌科细菌产生，大多为质粒介导的超广谱β-内酰胺酶，往往是由普通的β-内酰胺酶基因突变而来［4】。ESBLs的出现给临床抗感染治疗增添了很严重的问题。这些酶能够水解青霉素、头胞菌素、氨曲南等β-内酰胺类抗生素。随着广谱抗菌药物广泛应用于临床，产ESBLs菌株越来越多，易造成耐药菌的流行，从而导致严重医院内交叉感染。以往认为ESBLs主要由克雷伯菌和大