参芎注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤保护作用

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1、参芎注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤保护作用摘要：目的：研究参芎注射液对老龄大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法：108只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、尼莫通组、参芎注射液高、中、低剂量组(36.4,18.2，9.1mL•kg_l•d_l)。采用线栓法建立大鼠脑缺血再灌注模型，观察参芎注射液对脑缺血再灌注损伤大鼠的神经功能评分、脑梗死体积的影响，检测脑组织中一氧化氣合酶(N0S)、一氧化氮(N0)、超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)的含量，ELISA法检测对脑组织中肿瘤坏死因子-a(TNF-a)、白细胞介素-10(IL-1P)水平的影响。结果：参芎注射液可显著降

2、低脑缺血再灌注大鼠的神经功能评分，减轻脑组织损伤程度，减少脑梗死范E提高SOD活力，降低MDA，NO,NOS,LDH水平，抑制IL-1P和TNF-a的表迗。结论：参芎注射液对大鼠缺血再灌注损伤具有明显的保护作用，其机制可能与改善神经功能、减少自由基损伤和抑制炎症因子表达有关。关键词：参芎注射液；脑缺血再灌注损伤；自由基；炎症因子；神经功能［稿件编号］2013-06-21［基金项目］国家自然科学基金项目(81173647,81202636，81274176）；浙江省自然科学基金项目（LR12H27001）；浙江省卫生高层次创新人才培养工程项目；浙江省中医药（中西医结合）重点学科项目（2012-

3、XK-A06）［通信作者］*杨洁红，Tel:13758244937，E-mail：yannoo7376@sina.com［作者简介］汪兴宇，Tel:（0571）86613716，E-mail：489373697@qq.com近年来，脑缺血再灌注损伤的研究已经引起了国内外学者的广泛关注，大量研究［1-3］表明脑缺血再灌注损伤主要与自由基连锁反应、炎症反应、钙离子超载、兴奋性氨基酸毒性和细胞凋亡等有关。许多研究［4-5］表明丹参和川芎对脑缺血损伤的氧化、炎症及神经功能损伤等有较明显的改善作用。参芎葡萄糖注射液为丹参提取物和川芎嗪复合的针剂，对脑缺血再灌注大鼠的血液流变学、神经细胞凋亡等损伤有较好

4、的改善作用［6-7］，但有关自由基损伤和炎症损伤方面的研究较少。本实验采用线栓法建立局灶性脑缺血再灌注（MCAO）模型，研究参芎注射液对脑缺血再灌注损伤中的神经功能损伤、自由基损伤和炎症损伤的改善作用，探讨其对缺血脑组织的保护作用及机制。1材料1.1药品和试剂参芎注射液（吉林四长制药有限公司，批号20120804）；尼莫通注射液（BayerScheringPharmaAG，批号BXG2GG1）；考马斯亮蓝试剂盒（批号20121206）、MDA检测试剂盒（批号20121205）、一氧化氮（N0）检测试剂盒（批号21021123）、SOD试剂盒（批号20121130）、一氧化氮合酶（NOS）检测

5、试剂盒（批号20121211），以上均购自南京建成生物工程研究所；IL-1PELISA检测试剂盒（上海源叶生物科技有限公司，批号20121101A）；TNF-aELISA检测试剂盒（上海源叶生物科技有限公司，批号20121101A）;TTC（北京鼎国昌盛技术有限责任公司，批号16S10320）。1.2仪器VarioskanFlash型酶标仪（Thermo公司）；Sigma2-16PK离心机（Sigma公司）；TU-1900型双光束紫外-可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）；赛多利斯（Sartorius）BS110S电子天平（北京赛多利斯天平有限公司）。1.3动物清洁级SD大鼠，雄性

6、，体重260〜300g，上海西普尔-必凯实验动物有限公司，许可证号SCXK（沪）2008-0016。2方法2.1分组与给药108只SD大鼠随机分为6组，每组18只，分别为假手术组（腹腔注射生理盐水）、模型组（腹腔注射生理盐水）、参穹注射液低、中、高3个剂量组（9.1，18.2，36.4mL•kg-1•d-1）和尼莫通组（腹腔注射尼莫通注射液5.00mL•kg_l•d_l，相当于尼莫地平1mg•kg-1•d-1）。各组每天腹腔注射给药2次，于手术前连续给药3d。2.2脑缺血再灌注模型制备参照ZeaLonga等［8］的改良的线栓法制备大脑中动脉栓塞（MCAO）模型：10%水合氯酷（3mL•kg-

7、1）腹腔给药麻醉大鼠后，分离右领总动脉并剪一小口，将长50mm、直径0.2mm、顶端烫制成光滑球状的尼龙线作为栓子插入，以颈总动脉分叉处计算进线深度为（18.5±0.5）mm,至大脑中动脉起始部以完全阻断供血。缺血1.5h后，拔线栓，再灌注24h。假手术组只进行麻醉和血管分离术，不结扎血管及导入尼龙线。以上过程均在室温恒定（24〜25°C）情况下进行。2.3神经功能评分参考Bederson等［9］的方法对各组