不同萝卜抗源抗黑腐病相关基因差异表达比较分析

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1、洲Y1㈣9洲3Ⅲ2圳洲7，Ⅲ0Ⅲ7Secrecy：No．ChineseAcademyofAgriculturalSciencesDissertationDifferentialExpressionofResistance--relatedGenestoXcc(Xanthomonascampestrispv．campestris)inDifferentRadish(RaphanussativusL．)GermplasmMs．Candidate：WangShaoweiAdvisor：ProfessorLiXixiangMajor：VegetableScienceSpecialty：Veget

2、ableGeneticResourcesChineseAcademyofAgriculturalSciencesJune2011独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致诩}的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：时间：沙忙6日

3、c》B关于论文使用授权的声明本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定，即：中国农业科学院有权保留送

4、交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。～躲劲传悯：驯年历伊导师签名：时间：三切1年6月幻日硕士学位论文评阅人、答辩委员会签名表论文题目不同萝b抗源抗黑腐病相关基因差异表达比较研究论文作者王少伟专业蔬菜学研究方向蔬菜种质资源指导教师李锡香研究员培养单位(研究所)蔬采化卉研究所硕(博)导蒋卫杰硕导口中国农业科学院蔬蔬菜学＼姓名职称单位专业签名师评研究员菜花卉研究所博导囤阅吴才君教授硕导口江西农业大学疏采芋＼＼博导囹农学院旌口辩硕导口北京市农林科学院门张风

5、兰研究员蔬菜学主博导囹蔬菜研究中心狱唇(＼乙席磁硕导口生物化学与分肖兴国教授博导囹中国农业大学子生物学∥f艘硪硕导口范双喜教授北京农学院蔬菜学博导囹孙日飞研究员博导囹蔬菜学蝴狲9硕导口中国农业科学院蔬菜花卉研究所硕导口中国农业科学院蔬冯东昕研究员植物病理博导囹菜花卉研究所刘玉。乏掺研究员博导囹菜花卉研究所疏采字钒’硕导口中国农业科学院蔬刘富中研究员硕导囹中国农业科学院蔬蔬菜学绷幼博导口菜花卉研究所’∥f会议记录(秘书)徐东辉、l论文答辩时间地点2011年6月17日14：00蔬菜花卉研究所综合楼202会议室摘要黑腐病是严重影响十字花科蔬菜生产的世界性细菌病害。为了筛选萝卜黑腐病抗源和挖掘抗

6、病优异基因，本文采用三种不同的鉴定方法对箩I-种质资源进行了鉴定，并采用DDRT-PCR和cDNA．AFLP对不同萝卜抗源抗黑腐病相关基因表达进行了研究，主要研究结果如下：1．对40份初选萝卜种质分别接种Xcc8004和XccBJ两个菌株，进行黑腐病苗期抗性鉴定；对其中的8份代表性萝卜种质采用肉质根切片接种Xcc8004进行抗性鉴定；对其中的27份萝卜种质接种8个含有效应物基因的农杆菌，进行过敏反应鉴定。结果表明：不同萝卜种质苗期对黑腐病的抗性存在显著差异，筛选出对Xcc8004表现高抗的材料3份，对XccBJ表现高抗的材料1份。萝卜苗期不同材料对Xcc8004和XccBJ的抗性表现极显

7、著相关，萝卜苗期和肉质根对Xcc8004的抗病性极显著相关。稳定可靠抗病资源的获得为萝卜抗病育种和抗病机理深入研究提供了基础材料。筛选出17份对不同效席物表现过敏反应的萝卜种质。不同抗源对不同效应物的过敏反应程度有所不同。2．利用cDNA．AFLP技术，研究了4份萝卜抗病材料KB09．1、KB09．12、KB09—17、KB09—16和1份感病材料KB09．29接种和未接种黑腐菌Xcc8004的基因差异表达。256对引物组合在参试材料中扩增出790个差异表达条带。克隆得到的74个差异片段按其功能分为8类。在多份萝I-种质中都涉及信号转导、蛋白质代谢、光合作用、抗病防御及转运等序列的差异表

8、达。不同萝I-抗源表达的抗性相关基冈不完全相同。3．对高抗黑腐病萝卜种质KB09—12分别接种效应物xopXccN和xopXccX2，利用cDNA．AFLP方法获得153个差异表达条带。25个测序条带分析表明，接种xopXccN和xopXccX2公共差异表达条带主要涉及信号转导和抗病防御，接种xopXccN的特异差异表达条带主要涉及光合作用，接种xopXccX2的特异表达差异条带主要涉及蛋白质合成、加工。比较KB09．12接种效应物