甘薯辐射诱变效应及突变体筛选的分析

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1、中国农业大学博士学位论文缩写词表缩写词英文全称中译名2．4。D2，4．dichlorophenoxVaceticacid二氯苯氧乙酸ABAAbscisicacid脱落酸RAPDRandomamplifiedpolymorphicDNA随机扩增多态性DNACTABoetvltriethvlammoniumbromide十六烷基三甲基溴化胺EDTAEthvlenediaminetetraaceticacid已二胺四乙酸PCRPolvmerasechainreaction聚合酶链式反应EBEtIlidiumbromide溴乙锭SCARSequence

2、charalcterizedamplmedregion序列特征化的扩增区域TETris-EDTAbu仃erTris．EDTA缓冲液甘薯辐射诱变效应及突变体筛选的研究博士研究生：王玉萍导师：刘庆昌教授摘要l甘薯品种玉丰、高系14号和Kafldaba在生育期内用60coy射线慢照射：(1)对照射后的材料进行茎尖组织培养，通过体细胞胚胎发生途径再生出大量植株。将这些再生植株移栽到大田，对辐照后代的形态特征和经济特性进行了调查和分析。(结果表明，辐照后代M。v．和M．v2在顶叶形、叶形、顶叶色、叶脉色、脉基色_薯形及薯肉色、产量、干物率、食味、Brix

3、等性状上发生了广泛的变异，并且这些变异是稳定遗传的。获得了一批薯形、薯肉色、高产量、高干率和高Bfix的同质突变体。(2)对高系14号的薯形及薯肉色突变体进行同工酶和RAPD分析，结果表明，突变体与对照之间存在明显差异。木2用0～100(毋T射线照射栗子香的胚性悬浮细胞，根据胚性细胞团的存活率及植株再生情况，确定了栗子香胚性悬浮细胞适宜的T射线辐照剂量为80Gy。获得了大量再生植株，并从辐照后代中筛选出叶形、薯皮色变异的同质突变体。3本研究以甘薯品种栗子香胚性悬浮细胞为材料，用PEG6000作为离体筛选耐旱性突变体选择剂，将栗子香胚性悬浮细胞培

4、养在含有o～35％(w～)PEG的液体培养基中(含2．omg几2，4国)，并结合方差分析法处理数据。(结果表明，甘薯耐早性离体筛选的适宜选择压为30％PEG。将辐照后1周的栗子香胚性悬浮细胞培养在含30％PEG的液体培养基中(含2．Omg几2，4一D)，得到抗旱性愈伤组织，形成一批再生植株。获得的再生植株移栽到田问作耐旱性试验，长势优于对照的突变系占364％，蔓长变短的系占27o％。用突变体的耐旱系数、苗期抗旱处理及突变体的保水力等指标来鉴定，结果表明，有33．3％的材料耐旱性显著优于对照。j4用NaCl作为离体筛选耐盐性突变体选择剂，栗子香胚

5、性悬浮细胞培养在含o～3％(w／v)Nacl的液体培养基中(含2．omg／L2，4．D)，用统计分析处理数据．／结果表明，2％Nacl为甘薯耐盐性离体筛选的适宜选择压。栗子香胚性悬浮细弛辐照后1周(含2omg，L2，4．D)，培养在含2％Nac】的液体培养基中，得到部分抗性愈伤组织，形成一批完整再生植株。将得到的再生植株移栽到盐碱地中国农业大学博士学位论文中作耐盐性试验，结果表明，耐盐性植株的存活率高于对照，结薯率也高于对照。15用o～100Gy”C5+和0～200Gy4He2+分别照射栗子香胚性细胞团，对甘薯细胞水平离子束辐射诱变进行了系统的

6、研究。(根据辐射对细胞团生长的影响和植株再生，确定栗子香胚性细胞团适宜的”C5+和、4He”辐射剂量分别为30～50Gv和50～70Gy。辐照后的培养物经过培养获得大量再生植株。将获得的再生植株移栽到大田，对辐照后代的地上部和地下部特征进行调查和分析，结果表明，离子束辐照后代在叶形、薯皮色及单株结薯性等性状上发生了变异。心6对高系14号薯肉色(薯形)突变体进行分子检测。通过I∽PD分析，从60个随机引物中筛选出2个引物，即B8和B16，扩增出的突变体与对照的产物有明显差别。(将RAPD扩增产生的多态性片断进行克隆、测序，根据测序结果合成了两对特

7、异性的SCAR引物，新合成的SCAR引物不包括原有的RAI'D序列，每对SCAR引物都只扩增出一条带，片断大小分别为686bp和439bp。与RAPD相比，scAR扩增出的条带清晰可辨，结果更加可靠。文关键词：甘薯；慢照射；快照射；离子束照射；突变体筛选；分子标记——型塑壁墅塑堑堕燮StudiesontheEf．fectofRadiationandtheSeIectionofthemutantsinSweetpotatoPh．D．candidate：WangYupingSupervisorprofLiuQingchangABSTRACT1Swe

8、etpDtat0cultivarsThmayutal(a，KokeiNo．14andKandaba、Ⅳereplantedinagammafield．