鸭源大肠杆菌tetm基因的检测及其传播扩散机制分析

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1、河南农业大学学位论文独创性声明、使用授权及知识产权归属承诺书学位论鸭源大肠杆菌tctM基因的检测学位文题目及其传播扩散机制级别硕士学生王玲飞学科基础兽医学导师胡功政教授姓名专业姓名学位论文穆如需保密，解密时间年月日是否保密独创性声明本人呈交论文是在导师指导下进行的研究工作及取得研究成果，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包括为获得河南农业大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料，指导教师对此进行了审定。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中做了明确的说明，并表示了谢意。一弛呶特此声明。／-新虢明桫日期：力件

2、年6月7(f日日期云_f彭年多月／汐日学位论文使用授权及知识产权归属承诺本人完全了解河南农业大学关于保存、使用学位论文的规定，即学生必须按照学校要求提交学位论文的印刷本和电子版本；学校有权保存提交论文的印刷本和电子版本，并提供目录检索和阅览服务，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。本人同意河南农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。本人完全了解《河南农业大学知识产权保护办法》的有关规定，在毕业离开河南农业大学后，就在校期间从事的科研工作发表的所有论文，第一署名单位为河南农业大学，试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河南

3、农业大学所有，否则，承担相应的法律责任。注：保密学位论文在解密后适用于本授权书。厂}审牟?研究生签名：王硷b导师签名：钥耐学院领导签霍：南，毒日期：纠锋f)月f响日期：勘』l每么月石日日期：年月日万方数据致谢本研究及学位论文是在我的导师胡功政教授的亲切关怀和悉心指导下完成的。感谢恩师两年来对我在理论学习及实验研究方面的精心培养和严格要求，学生将终生难忘，永怀感激之情。导师渊博的学识、严谨求实的治学态度、忘我的科学研究、敏锐的洞察力、缜密的思维方式、追寻真理的执着精神和勇攀科学高峰的高贵品质，都给我予熏陶，永远是我学习的楷模和努力的方向。感谢药理教研室的苑丽老师、潘玉善老师、

4、张素梅老师、杜向党老师、刘建华老师、潘玉善老师、赵金凤老师、吴华老师等在试验过程中给予的热心帮助与支持!感谢牧医工程学院的各位领导及老师在生活和学习上给予的关怀与帮助。感谢师兄冯建坤，师姐徐瑞、韩志华、黄慧在实验和生活中给予的热心指导和帮助!感谢华南农大博士孙亚伟师兄对我实验的帮助!感谢ll级研究生元雪浈、杜宝宝、黄立奎、张艳茹等在实验中和生活中给予大力支持和帮助!感谢师妹贺志沛、段莎莎、马彩晖，师弟钟杏好、陈丽鹏在试验中给予的支持与帮助!感谢深爱我的家人和朋友们在我漫漫求学路上给予了我无私的关爱、不竭的动力以及精神与物质的支持。正是亲人无私的关爱成为我坚强的后盾，他们是我

5、前进的动力和源泉，鞭策着我去克服一切困难顺，才使我的论文能够顺利完成。感谢父母对我学业无私的鼓励和经济上的巨大支持，他们的关爱和支持我将终生铭刻在心。万方数据目录摘要：．1l文献综述31．1四环素类药物及其作用机制～31．2四环素类药物的耐药机制．．31．2．1主动外排机制．．．．41．2．2核糖体保护机制51．2．3灭活或钝化四环素的酶机制～51．2．4其他耐药机制51．3tetM基因的传播扩撒机制一6实验一：鸭源大肠杆菌杆菌tetM基因的分子检测8l弓I言．．82材料与方法．．82．1材料。82．1．1菌株．．82．1．2药品．．82．1-3培养基92．1．4试齐0．．

6、．．．．．．．．．．．．92．1．5仪器．．92．2方法．．92．2．1菌株的分离与纯化92．2．2培养基的制备92．2．3药敏试验菌液的制备92．2．4药液配制92．2．5MIC值测定．．102．2．6模板DNA制备102．2．7引物设计．102．2．8PCR扩增．102．2．9tetM基因PCR产物的回收和测序分析儿万方数据3结果与讨论。113．1结果113．1．1药敏试验结果．．“3．1．3PCR检测结果．123．2讨论．．124，J、结13实验二携带tetM基因的菌株流行病学分析141引言142材料与方法142．1材料．142．1．1菌株．142．1．2仪器和设备1

7、442．2方法142．2．1模板制备和Eric．PCR引物设计142．2．2多位点序列分析(MLST序列分型)．152．2．3系统发育分型．．153．结果与讨论163．1结果～163．1．1Eric—PCR．163．1．3多位点序列分析(MLST序列分型)一173．1．2系统发育分型1773．2讨论．．184，J、结．．19实验三tetM基因质粒定位和其传播扩散机制20l引言．202材料与方法202．1材料～202．1．1试验菌株．202．1．2培养基一202．1．3试剂及药物．20万方数据2．1．4仪器．．2l2