盐胁迫对野生和栽培大豆幼苗生长和抗氧化酶活性及膜脂过氧化的影响

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1、盐胁迫对野生和栽培大豆幼苗生长和抗氧化酶活性及膜脂过氧化的影响摘要：研究了不同NaCl胁迫浓度(0、50、100、200、300minol/L)对野生和栽培大豆幼苗生长和抗氧化酶活性及膜脂过氧化的影响。结果表明：盐胁迫显著抑制了野生和栽培大豆的生长，但野生大豆在同样盐胁迫下所受影响较小，显示出较强的抗盐能力；两种大豆幼苗叶中的MDA含量均随着盐浓度的升高而递增，且栽培大豆的增幅大于野生大豆，高浓度盐胁迫下尤其显著，说明栽培大豆受到的膜脂伤害程度更为严重；同时，野生大豆中抗氧化酶的活性均高于栽培大豆，显示出野

2、生大豆具有更强的抗氧化能力。关键词：盐胁迫；野生大豆；栽培大豆；丙二醛；抗氧化酶中图分类号：S565.101文献标识号：A文章编号:1001-4942(2014)05-0038-04土壤盐渍化是当今农业发展面临的重大非生物环境胁迫因素之一，目前全球约有7%的土地、20%的耕地和近50%的水浇地受到盐渍化的影响［1〜3］，而且随着工业的发展和水浇地面积的扩大，土壤盐渍化面积仍在逐年增加。因此，改良和高效利用这些盐土资源对于解决我国所面临的人口、粮食、资源和环境之间的矛盾问题具有重要意义，而开发盐土资源和发展盐

3、土农业的关键是耐盐经济植物的筛选和培育［4，5］。栽培大豆属中度耐盐植物，盐胁迫条件下，其产量明显降低，所以进行栽培大豆的耐盐性研究以及抗盐品种的选育具有重要意义。与栽培大豆相比，野生大豆(Glycinesoja)属于一年生盐生植物，具有花荚多、结实多、繁殖系数高、产量性状突出、高蛋白、抗病抗逆性强等众多优良性状，是改良和选育抗盐栽培大豆品种的重要基因源，具有广阔的利用前景［6］。本研究选取东营野生大豆BB52和山东栽培大豆ZH13为试材，采用不同浓度的NaCl溶液模拟盐胁迫处理幼苗，研究盐胁迫对野生和栽培

4、大豆幼苗生长和抗氧化酶活性及膜脂过氧化的影响，对比分析其抗盐能力的差异及野生大豆的抗盐机理，从而为利用野生大豆资源改良栽培大豆提供理论依据。1材料与方法1.1试验材料栽培大豆品种ZH13由山东省农业科学院提供，BB52采自东营市黄河三角洲。L2试验方法1.2.1幼苗培养和胁迫处理萌发前先用浓硫酸浸泡10min去除野生大豆表面硬实，栽培大豆用蒸馏水浸泡8h至种子饱胀。选取颗粒饱满、大小一致并且无损伤的豆种置于铺有棉纱的培养皿中均匀排列，种上铺一层棉纱，后用蒸馏水浇透以保持湿润，黑暗条件下萌发，温度控制在25°

5、C。萌发5天至第一对真叶完全展开后移到装有蛭石的塑料盆中于温室中培养，每盆3株，浇Hoagland营养液，且培养液每天更换一次。温室培养20天后，选择长势一致的豆苗分别用含不同浓度（50、100、200、300mmol/L）NaCl的Hoagland营养液进行胁迫处理，每处理3盆，重复3次，对照为Hoagland营养液。为避免盐冲击，处理液浓度每天递增50mmol/L,各处理于同一天迖到设定浓度，然后每天以设定浓度处理液浇灌，以使根部溶液彻底更新。胁迫处理2周后测定生长参数，取鲜样称重分组，保存于_80°C

6、超低温冰箱中备用。1.2.2生长参数测定分别选取经过相同时间梯度盐胁迫处理的野生大豆和栽培大豆，测量株高、单株根长、单株鲜重、单株叶柄数和茎粗，并用叶面积仪（LI-3000A,美国）测定相同叶位完全展开叶片的叶面积。各指标取5个重复的平均值并记录。1.2.3膜脂过氧化程度（MDA含量）测定采用硫代巴比妥酸法测定MDA含量［7］。称取大豆样品0.2g于液氮中研磨至粉末，加入5%三氯乙酸（TCA）3mL和少量石英砂研磨至匀浆，4°C、10000Xg离心20min,取1mL上清液加入4mL用20%TCA配制的0.

7、5%硫代巴比妥酸，混匀后95°C水浴反应30min,然后转移到冰水混合物中迅速冷却终止反应，10000Xg离心10min,测定发生反应的混合溶液吸光值D532、D600和D450。MDA含量=6.452X（D532-D600）-0.559D4501.2.4抗氧化酶活性的测定取0.2g样品于液氮中研磨后，加入5mL含有1mmol/LEDTA和2%PVP的磷酸缓冲液（pH7.8）匀浆，13OOOXg离心10min，留上清液，用磷酸缓冲液（pH7.8）稀释25倍后用于SOD和CAT活性测定。SOD活性测定参照Kr

8、Uger等［7］的方法。CAT活性测定参照Knorzer等［9］的方法。0.2g叶片液氮中研磨后，加入3.5mL含有1mmol/LEDTA,2%PVP和1mmol/LAsA的磷酸缓冲液（pH7.6）匀浆，13OOOXg离心10min,取上清液用于APX活性测定。APX活性测定参照Krivosheeva等［10］的方法。1.3数据处理与分析用Excel2003和SPSS17.0对数据进行统计分析，用Origin7.