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时间:2018-12-21
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1、实验一:利多卡因对神经干复合动作电位的影响。※实验目的 观察蟾蜍坐骨神经动作电位的基本波形(包括双相和单相动作电位),了解神经纤维传导兴奋的特征。观察利多卡因对动作电位的影响。5※<实验原理 神经接受刺激兴奋时所发生的电位变化,可以用一对引导电极放置在神经表面引导出来。由于坐骨神经干内含有无数条神经纤维,因此记录到的动作电位是一大群阈值不同、传导速度不同、振幅不同的峰的总和曲线,可称为复合动作电位。利多卡因可阻滞钠通道,从而影响动作电位并产生局部麻醉作用。5※实验对象 蟾蜍5※实验器材 蛙类手术器械一套(蛙板、玻璃分针2、粗剪刀、手术剪、眼科剪、镊子
2、、探针、图钉4、屏蔽盒、液体石蜡、培养皿、滴管、烧杯2、纱布、棉线、黑丝线(1号)、任氏液、方盘、针筒(1ml)、针头(4号)、滤纸、2%盐酸利多卡因注射液1支。动作电位波形 正 常 神经调转 利多卡因 在两记录电极间剪断神经 在刺激电极与记录电极间剪断神经波形 【实验报告与思考题】1.绘出所观察到的动作电位波形,并说明原因。2.如何区别刺激伪迹与神经干动作电位?3.利多卡因对动作电位有何影响?为什么?内容5※实验步骤一、实验准备1.破坏脑脊髓:取蟾蜍一只,左手握蟾蜍,用食指压住其头部前端使头前俯,右手持探针从枕骨大孔处垂直刺入,然后向前刺入颅腔,左右搅动破
3、坏脑组织,继之再将探针缓慢退至枕骨大孔处向后刺入椎管捣毁脊髓,破坏完全时可见四肢松软。2.去除躯干上部及内脏:在骶髂关节水平以上0.5~1.0cm处用粗剪刀剪断脊柱,左手握其脊柱下端,使头与内脏自然下垂,右手持剪刀,沿脊柱两侧剪除内脏及头胸部,仅留后下肢、骶骨、髂骨、脊柱及由它发出的坐骨神经。3.剥除皮肤:用镊子捏住脊柱端(不要捏住或接触神经),右手捏紧皮肤边缘,向下撕掉全部后肢的皮肤,然后将标本放入盛有任氏液的培养皿中。4.手及用过的器械洗净、擦干。5.平分脊柱:用镊子从背部夹住脊柱,将标本提起,用粗剪刀剪去突出的尾骨(注意:勿损伤坐骨神经),然后平放在蛙板上,用
4、粗剪刀将脊柱平分为两半,并在耻骨联合正中剪开。将分离的两腿放入盛有任氏液的培养皿中。6.游离坐骨神经:取一蟾蜍腿背侧向上放置于蛙板上,用图钉固定两端(注意:勿损伤坐骨神经),用玻璃分针沿坐骨神经沟(股二头肌与半膜肌之间)找出坐骨神经,小心分离至踝关节,剪去神经干上的所有分支,然后分别结扎神经脊柱端和外周端(要尽量靠两端,使神经尽可能长),在结扎处外侧剪断神经,游离出神经干并将其浸在任氏液中30min使其兴奋性稳定。二、观察项目1.连接屏蔽盒(用鳄鱼夹按顺序连接好刺激电极与记录电极,相互保持绝缘,地线也按盒上标计连接好)。2.将神经搭在电极上(近脊柱端在刺激电极,远脊
5、柱端在记录电极),然后选择“实验模块”中的“动作电位”选项,点击刺激(强度1V,波宽0.05ms),记录正常动作电位。然后将神经调转方向(远脊柱端在刺激电极,近脊柱端在记录电极),记录动作电位。3.停止刺激,将神经调回原来状态(近脊柱端在刺激电极,远脊柱端在记录电极),然后涂上石蜡防止干燥(刺激电极与记录电极之间留一小段不涂,以备给药)。4.在刺激电极与记录电极之间滴一滴2%利多卡因(要在神经干上附着,以便充分作用),然后每隔1min刺激并记录几秒钟,直至动作电位明显减小。5.恢复15min后,在两记录电极之间剪断神经,记录动作电位;然后在刺激电极与记录电极之间剪断
6、神经,记录动作电位。【结果】内容5※实验结果 把实验结果记入下表。 动作电位波形 正 常 神经调转 利多卡因 在两记录电极间剪断神经 在刺激电极与记录电极间剪断神经波形 5※实验报告与思考题 1.绘出所观察到的动作电位波形,并说明原因。 2.如何区别刺激伪迹与神经干动作电位? 3.利多卡因对动作电位有何影响?为什么?实验二:氯胺酮催眠ED50和LD50的测定(分组法和序贯法)※概述 半数有效量(median effective dose,ED50)指药物引起半数实验动物发生阳性反应(质反应)的剂量
7、。若以死亡作为阳性反应的指标,则为半数致死量(median lethal dose,LD50)。因此,LD50可视为ED50的一个特例。 ED50表示药物作用强度的大小,LD50表示药物毒性的大小,两者的测定原理、计算方法相同。药物的治疗指数(therapeutic index,TI)等于两者的比值,即TI=LD50/ED50, 表示对半数动物有效的剂量增大多少倍可引起半数动物死亡,是评价药物的重要指标。5※实验目的 学习测定ED50、LD50的方法,比较分组法和序贯(上下)法优缺点,了解ED50、LD50、TI的计算方法和意义。5※实验设计 有分组
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