sds报告有效期

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1、为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划sds报告有效期　　□禀议■报告□通迅　　实验六SDS-PAGE测定蛋白质分子量　　生物111杨明轩　　一、研究背景及目的　　对于那些生物体内含量高、易于分离结晶获得纯品的蛋白，可以通过测定氨基酸序列，借助各种氨基酸的分子量求出蛋白的分子量，并与质谱等手段相互结合，得到精确可信的分子量。但对于那些含量少，不易分离的蛋白，无法实现结晶，就必须借助其他手段测定其分子量。　　要找到能够测定分子量的实验手段，首先要考虑那些能够将不同分子按照其

2、各自的分子量分离的技术。在众多的技术当中，密度梯度离心、层析、电泳都与物质的分子量有关。其中，超速离心机造价高，使用过滤层析色谱测分子量要做标准曲线，柱长要求高，且这些方法不够准确。因此，电泳技术成为了实现分子量测定这一目的的最佳选择。目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　但是，在活性电泳中，影响蛋白前迁移率的因素有蛋白质的电荷性质、分子大小和

3、形状。要测定分子量，就要消除电荷、分子形状对蛋白迁移率的影响，即使得各种蛋白的电荷、形状不存在显著差异。对于电荷，使各分子不带电违背电泳的基本原理，而使各分子带点完全相同是无法实现的，因此考虑使其带上大量电荷，从而让分子之间的电荷差异可以忽略。在活性电泳中，改变样品的带电情况依靠的是缓冲液pH的变化，显然不能够使分子大量带电，这就表(来自:写论文网:sds报告有效期)明必须向电泳体系中引入其他物质，与蛋白分子定量等量结合，且不改变分子量差异造成泳动差异。对于分子形状，考虑到功能性蛋白大多是球形粒子，要保持形状不变，就要实现对蛋白的包裹性结合。而

4、蛋白表面的电荷分布情况千差万别，依靠电荷性质无法结合形成稳定的复合物。考虑到蛋白质中含有大量的疏水氨基酸，可以通过疏水作用结合，这就要造成蛋白变性，是疏水基团充分暴露出来，分子不能在维持球型而变成棒状，因此，所选择的物质还需要能够维持复合物形状的统一。基于以上考虑，科学家选择了双亲性物质，既能通过疏水作用与蛋白定量结合成牢固的复合物，又能借助亲水性在溶液中良好分散。目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺

5、利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　新技术的发明常以原有技术作为基础。在活性电泳中，采用碱性体系，依靠浓缩效应实现了样品的浓缩，大大提高了分析的精度。而变性电泳属于全蛋白染色，结果较准确。在变性电泳中，要借助浓缩效应，就要使样品由负极向正极迁移，那么所选择的物质与蛋白结合之后要形成带负电的复合物。就这样，选择了十二烷基硫酸钠作为变性剂。而且，发现形成的复合物成棒状，短轴恒定，而长轴与分子量相关。所以，SDS就成为了理想的变性剂。这种方法最适宜测定分子量是15,000—100,000的样品,对低于10,000分子量的水解蛋

6、白不太适用。通过改进，用强电解质离子为前导离子和拖尾离子可对分子量低于10，000的水解蛋白样品进行分子量测定。用这种方法测定蛋白质的分子量,分辨率高，所需设备廉价，与用其他方法测得的分子量相比，误差一般在±10%以内，因而其广泛应用于蛋白分离纯化和分子量测定。　　因此，SDS-PAGE是目前常用的测定蛋白质分子量的方法。本实验通过利用SDS-PAGE测定实验四纯化的麦清蛋白，学习和掌握SDS-PAGE测定蛋白质分子量的原理，掌握其具体操作；并与活性电泳进行对比，了解其异同，加深对电泳技术了理解。　　二、实验原理　　1、聚丙烯酰胺凝胶电泳可对蛋

7、白质的种类和数量做定性分析，带电蛋白质分子在电场作用下将作定向移动,在其他条件(电场、介质粘度等)不变的情况下,蛋白质在凝胶中的迁移速率受分子所带净电荷量与分子大小、形状等因素的影响。如果两种不同分子量的蛋白质的分子大小的差异被所带净电荷量的目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　差异所补偿时,则这两种不同分子量的蛋白质可以相同的速率电泳,无法通

8、过电泳距离测定蛋白质的分子量。因而要测定分子量则需要蛋白质以分子量为唯一变量进行泳动，即需要引入某种物质与蛋白结合消除净电荷和分子形状的影响。　　由于