检验医学专业实验ii重点整理输血学+血液基础检验

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1、主页君的话：从这学期（大三上）开始，检验医学专业实验的笔试就比较类似于正常考试了，题型有名解、填空、问答和论述，但一般无选择。对于临床检验基础部分，实验考和理论考的区别并不大，凡是做过的实验，其原理、注意事项和思考题仍要求掌握，除此之外还需要知道其参考值和临床意义，（举个例子，实验“白细胞分类计数”，你需要知道其原理、注意事项和思考题，还需要知道其正常参考范围和临床意义，如中性粒细胞一般占50~70%、其比例增高最常见于细菌感染；还要知道什么是中性粒细胞核左移/核右移）对于临床输血检验部分，其实验较少，仍然是掌握实验的原理、注意事项

2、和思考题，最后一次实验是去血站参观，可能会根据参观的情况出一道相关的论述题（去年这道论述题高达15分），所以参观的时候稍微用点心吧。临床输血检验部分血型鉴定【定义与原理】①正向定型（direct/forwardtyping）：用已知的特异性抗体（标准血清）检查红细胞的未知的抗原。用已知IgM类特异性血型抗体与被检测红细胞在盐水介质中反应，若出现凝集现象，表明被检测红细胞膜上有相应抗原，从而判断血型。②反向定型（indirect/reversetyping）：用已知血型的标准红细胞检查血清中的未知抗体。用已知的标准A、B、O型红细胞与

3、被检测血清反应，若被检测血清与已知型别的标准红细胞出现凝集，则证明被测定红血清中存在与该红细胞抗原相对应的抗体，反之则没有。【注意事项】严格标记，防止混淆。观察时，应该先肉眼观察，不确定则用显微镜低倍镜观察有无凝集。防止出现冷凝集或者某些疾病干扰引起的假凝集。Rh血型【抗原种类】：到目前为止已发现40多种Rh抗原，但与临床关系最为密切的只有5种，按其抗原性强弱依次为D、E、C、c、e，5种抗原中D的抗原性最强对临床更为重要。临床上习惯将含D抗原的红细胞称Rh阳性；不含D抗原的红细胞称Rh阴性。在临床输血中，一般只做D抗原鉴定，凡被检

4、红细胞和抗D血清凝集者为Rh阳性，不凝集为Rh阴性。目前已研制出单克隆抗D，可用于Rh血型鉴定。交叉配血试验（crossmatchingtest）：将献血者的红细胞、血清（浆）分别与受血者的血清（浆）、红细胞混合，观察有无凝集反应，称为~。这是输血前必须做的红细胞系统的配合性试验，以确定受者或供者血液没有可测的不相配合的抗原和抗体成分。试验包括主侧和次侧配血：1、主侧是受血者血清与供血者红细胞的反应；2、次侧是受血者红细胞和供血者血清的反应，只有两侧均不凝集或溶血才能输血。【结果观察】先观察上层有无溶血，再倾斜试管轻轻摇动，观察底层

5、有无凝集，必须用显微镜观察，两管既没有凝集也没有溶血，方可输血。【质量控制】①用于交叉配血的病人(受血者)血液标本应该是抽取的新鲜血，供血者的标本是刚从血袋剪下来的原已加热封闭两端小管中的血液。②用试管法作交叉配血试验，不能用玻片法。③用生理盐水洗涤红细胞去除血浆，预防纤维凝块的形成。④配血管中发生溶血现象，表明有抗原抗体反应同时还有补体参与，是配血不和的严重情况。⑤盐水配血阴性但有反复输血史或妊娠史的受血者，应加检查IgG血型抗体的交叉配血试验。⑥为确保输血安全，应输同型血。【临床意义】①进一步验证受血者与供血者血型鉴定是否正确，

6、发现ABO血型的不规则抗体以及ABO血型以外的配血不和，以避免血型鉴定错误而导致的输血后严重溶血反应。②若受血者一次输血超过1600～2000ml时，除了做受血者与供血者之间的交叉配血外，还应作供血者之间的交叉配血，以防止供血者相互间血型不合及不完全抗体的存在，保证输血的安全。抗体效价测定（antibodytitration）：是测定血清中抗体浓度的半定量方法。对待检血浆或血清进行连续倍比稀释，以肉眼可见凝集的最高稀释倍数的倒数来表示效价。将被检测抗血清做倍比稀释后，加入一定量的抗原红细胞，观察凝集程度，以最大稀释倍数能与相应红细胞

7、抗原发生凝集的试管稀释倍数之倒数定为效价。唾液定型：ABH抗原不仅存在于红细胞膜上，还程度不同地存在于很多其他体液当中，其中以唾液含量最多，这些血型物质都是是半抗原，并且是水溶性的。凡是唾液中有血型物质的为分泌型，否则为非分泌型。【临床意义】①辅助鉴定血型。②检查羊水，预测ABO血型。③中和ABO血型系统的天然抗体，有助于鉴定抗体的性质。血清丙氨酸氨基转移酶（ALT)测定【原理】ALT催化ɑ-酮戊二酸与丙氨酸之间的氨基转移反应：L-丙氨酸+ɑ-酮戊二酸（ALT）→L-谷氨酸+丙酮酸（可逆反应）经一定时间反应后，加入2,4二硝基苯肼终

8、止反应，并与溶液中的两种ɑ-酮酸生成相应的2,4二硝基苯腙，在碱性条件下呈棕红色。但两种苯腙的吸收光谱有差别，在500-520nm差异最大，以等摩尔浓度计算，丙酮酸苯腙的吸光度约为ɑ-酮戊二酸苯腙的3倍。据此特点，可计算出丙酮酸的生成