齐口裂腹鱼gth-rⅱ基因的克隆及其序列分析—论文终

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1、编号：四川农业大学本科毕业论文（设计）（2014届）题目：齐口裂腹鱼GtH-RⅡ基因的克隆及其序列分析院别：动物科技学院水产系专业：水产养殖教育姓名：刘永贵指导教师：完成日期：2013年12月14日齐口裂腹鱼GtH-RⅡ基因的克隆及其序列分析动物科技学院水产养殖教育刘永贵指导老师：姜冬梅实验师摘要：【目的】通过对齐口裂腹鱼垂体组织中GtH-RⅡ基因的克隆及测序，研究齐口裂腹鱼促性腺激素Ⅱ受体基因的序列特征及功能特性。【方法】将提取的总RNA进行反转录PCR扩增，并用回收的扩增产物来完成克隆及测序。【结果】本试验获得的齐口腹裂鱼

2、GtH-RⅡ目的片段长度为696bp，其核酸序列与斑马鱼的相似性达93%，而氨基酸序列相较于斑马鱼，相似性也高达97%；通过蛋白质的序列分析发现：GtH-RⅡ蛋白质中α螺旋结构占61.43%；β折叠结构占15.24%；无规则卷曲结构占23.33%。【讨论】试验得出齐口裂腹鱼GtH-RⅡ基因的保守性高，为进一步研究齐口裂腹鱼的繁殖调控机制提供了一些基础数据。关键词：齐口裂腹鱼；促性腺激素；促性腺激素Ⅱ受体；序列分析CloningandsequenceanalysisGtH-RⅡgeneintheSchizothoraxprena

3、ntiAnimalscienceandtechnologyofcollegeAquacultureeducationLiuYong–GuiGuidanceteachers:JiangDong–MeiExperimentalteachersAbstract:[Objective]BycloningandsequenceanalysisGtH-RⅡgeneofSchizothoraxprenantipituitarytissue,studyofSchizothoraxprenantigonadotropinhormonerecep

4、torⅡgenesequencefeaturesandfunctionalproperties.[Method]ThetotalRNAwasextractedandamplifiedbyreversetranscriptionPCR,theamplifiedproductrecoverytocompleteforcloningandsequencing.[Results]SchizothoraxprenantiGtH-RⅡobjectivefragmentlengthobtainedinthisexperimentis696b

5、p,thenucleicacidsequencesimilaritywithDaniorerioas93%,whiletheaminoacidsequencecomparedtoDaniorerio,similarityisashighas97%;proteinsequenceanalysisshowed:61.43%alphahelixstructureofGtH-RIIprotein;betafoldingstructurefor15.24%;randomcoilstructureaccountedfor23.33%.[C

6、onclusion]TheresultsshowSchizothoraxprenantiGtH-RⅡgeneconservativehigh,alsoprovidessomebasicdataforfurtherstudyofSchizothoraxprenantireproductiveregulationmechanism.Keywords:Schizothoraxprenanti;gonadotropinhormone;gonadotropinhormonereceptorⅡ;sequenceanalysis15早期研究

7、认为，鱼类中只有一种类似LH的促性腺激素，直到20世纪70年代中期，加拿大学者Idferlz等人在改进促性腺激素(GonadotropinHormone,GtH)的纯化技术后，从鲤鱼、大麻哈鱼等鱼的脑垂体中发现了两种不同类型的GtH，即GtHⅠ和GtHⅡ，功能研究表明，GtHⅠ和GtHⅡ分别对应于哺乳动物的FSH和LH[1]；而到1999年YuichiOba等用纯化的GtHⅠ和GtHⅡ证明大麻哈鱼的性腺存在着两种类型的GtH受体（GonadotropinHormoneReceptor,GtH-R），分别称为GtH-RⅠ和GtH

8、-RⅡ[2,3]，随后的研究进一步证实了鱼类GtH-R的二元性，结构和功能分析显示，它们分别对应于哺乳动物的促卵泡激素受体（FSH-R）和促黄体素受体（LH-R）[4-8]。LH在鱼类称为促性腺激素Ⅱ(GonadotropinHormoneⅡ,GtHⅡ)，它的主要功能是促进卵