牛双芽巴贝斯虫rap-1基因的克隆与序列分析

《牛双芽巴贝斯虫rap-1基因的克隆与序列分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、牛双芽巴贝斯虫rap-1基因的克隆与序列分析摘要：对牛双芽巴贝斯虫（ｂａｂｅｓｉａｂｉｇｅｍｉｎａ）潜在药物靶标rａｐ－１的基因进行克隆与序列分析。以兰州株牛双芽巴贝斯虫基因组为模板，经ｐｃｒ扩增获得了ｒａｐ－１基因，将该基因克隆到ｐｇｅｍ－ｔｅａｓｙｖｅｃｔｏｒ上，对重组质粒进行ｐｃｒ扩增，对目的基因进行酶切鉴定及序列测定分析。结果表明，ｒａｐ－１基因长度为８４６ｂｐ，同源性分析结果显示，克隆序列与ｇｅｎｂａｎｋ收录的巴西株牛双芽巴贝斯虫的核苷酸序列同源性为９９．７４％，说明兰州株牛双芽巴贝斯虫的ｒａｐ－１与ｇｅｎｂａｎｋ公布的参考基

2、因具有高度同源性，ｒａｐ－１基因具有很高的保守性。关键词：牛双芽巴贝斯虫（ｂａｂｅｓｉａｂｉｇｅｍｉｎａ）；ｒａｐ－１基因；克隆；序列分析ｃｌｏｎｉｎｇａｎｄｓｅｑｕｅｎｃｅａｎａｌｙｓｉｓｏｆｒａｐ－１ｇｅｎｅｉｎｂａｂｅｓｉａｂｉｇｅｍｉｎａｈａｎｌｉｎ１，２，ｚｈａｎｇｊｉ－ｙｕ２，ｙｕａｎｌｉ－ｇａｎｇ１，ｌｉｂｉｎｇ２（１．ｃｏｌｌｅｇｅｏｆｖｅｔｅｒｉｎａｒｙｍｅｄｉｃｉｎｅ，ｇａｎｓｕａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，ｌａｎｚｈｏｕ７３００７０，ｃｈｉｎａ；２．ｌａｎｚｈｏｕｉｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆａｎｉｍａｌ牛

3、双芽巴贝斯虫rap-1基因的克隆与序列分析摘要：对牛双芽巴贝斯虫（ｂａｂｅｓｉａｂｉｇｅｍｉｎａ）潜在药物靶标rａｐ－１的基因进行克隆与序列分析。以兰州株牛双芽巴贝斯虫基因组为模板，经ｐｃｒ扩增获得了ｒａｐ－１基因，将该基因克隆到ｐｇｅｍ－ｔｅａｓｙｖｅｃｔｏｒ上，对重组质粒进行ｐｃｒ扩增，对目的基因进行酶切鉴定及序列测定分析。结果表明，ｒａｐ－１基因长度为８４６ｂｐ，同源性分析结果显示，克隆序列与ｇｅｎｂａｎｋ收录的巴西株牛双芽巴贝斯虫的核苷酸序列同源性为９９．７４％，说明兰州株牛双芽巴贝斯虫的ｒａｐ－１与ｇｅｎｂａｎｋ公布的参考基因

4、具有高度同源性，ｒａｐ－１基因具有很高的保守性。关键词：牛双芽巴贝斯虫（ｂａｂｅｓｉａｂｉｇｅｍｉｎａ）；ｒａｐ－１基因；克隆；序列分析ｃｌｏｎｉｎｇａｎｄｓｅｑｕｅｎｃｅａｎａｌｙｓｉｓｏｆｒａｐ－１ｇｅｎｅｉｎｂａｂｅｓｉａｂｉｇｅｍｉｎａｈａｎｌｉｎ１，２，ｚｈａｎｇｊｉ－ｙｕ２，ｙｕａｎｌｉ－ｇａｎｇ１，ｌｉｂｉｎｇ２（１．ｃｏｌｌｅｇｅｏｆｖｅｔｅｒｉｎａｒｙｍｅｄｉｃｉｎｅ，ｇａｎｓｕａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，ｌａｎｚｈｏｕ７３００７０，ｃｈｉｎａ；２．ｌａｎｚｈｏｕｉｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆａｎｉｍａｌｓｃ

5、ｉｅｎｃｅ＆ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ，ｃｈｉｎｅｓｅａｃａｄｅｍｙｏｆａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌｓｃｉｅｎｃｅｓ／ｋｅｙｌａｂｏｒａｔｏｒｙｆｏｒｖｅｔｅｒｉｎａｒｙｄｒｕｇｉｎｎｏｖａｔｉｏｎ，ｍｉｎｉｓｔｒｙｏｆａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ／ｋｅｙｌａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆｎｅｗａｎｉｍａｌｄｒｕｇｐｒｏｊｅｃｔｏｆｇａｎｓｕｐｒｏｖｉｎｃｅ，ｌａｎｚｈｏｕ７３００５０，ｃｈｉｎａ）ａｂｓｔｒａｃｔ：ｔｈｅｒａｐ－１ｇｅｎｅ，ａｐｏｔｅｎｔｉａｌｔａｒｇｅｔｆｏｒｄｒｕｇｓｃｒｅｅｎｉｎｇｗａｓａｍｐｌｉｆｉｅｄｕｓｉｎ

6、ｇｇｅｎｏｍｉｃｄｎａｏｆｌａｎｚｈｏｕｂａｂｅｓｉｏｓｉｓａｓｔｅｍｐｌａｔｅ，ａｎｄｃｌｏｎｅｄｉｎｔｏｐｇｅｍ－ｔｅａｓｙｖｅｃｔｏｒ．ｔｈｅｒｅｃｏｍｂｉｎｅｄｐｌａｓｍｉｄｗａｓｔｅｓｔｅｄｂｙｐｃｒ，ｅｎｚｙｍｅｄｉｇｅｓｔｉｏｎａｎｄｇｅｎｅｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ．ｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｌｅｎｇｔｈｏｆｂ.ｂｉｇｅｍｉｎａｒａｐ－１ｇｅｎｅｗａｓ８４６ｂｐ．ｔｈｅａｌｌｏｇｅｎｉｃａｎａｌｙｓｉｓｒｅｖｅａｌｅｄｔｈａｔｔｈｅｈｏｍｏｌｏｇｙｂｅｔｗｅｅｎｃｌｏｎｅｄｓｅｑｕｅｎｃｅａｎｄｒｅｆｅｒｅｎｃｅ

7、ｓｅｑｕｅｎｃｅｉｎｇｅｎｂａｎｋｗａｓａｓｈｉｇｈａｓ９９．７４％，ｉｎｄｉｃａｔｉｎｇｔｈａｔｒａｐ－１ｇｅｎｅｗａｓｈｉｇｈｌｙｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｖｅ．ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｂａｂｅｓｉａｂｉｇｅｍｉｎａ；ｒａｐ－１；ｃｌｏｎｅ；ｓｅｑｕｅｎｃｅａｎａｌｙsis牛双芽巴贝斯虫（ｂａｂｅｓｉａｂｉｇｅｍｉｎａ）在分类学上属梨形虫目巴贝斯虫科巴贝斯虫属，该类寄生虫寄生于牛的红细胞，引起牛的血液原虫病——牛双芽巴贝斯虫病［１］。牛双芽巴贝斯虫病又称红尿热，一年内可暴发数次，临床主要表现为红细胞数量明显减少、贫血、黄疸、可视黏膜出血和血红蛋

8、白尿等，可引起宿主死亡［２］，该病是世界公认的危害养牛业的主要寄生虫病之一。牛双芽巴贝斯虫入侵红细胞的过程是感染发病的重要环节，对红细胞的入侵是由位于牛双芽巴贝斯虫细胞膜表面的顶体复合器以及棒状体上的相关蛋