脑得生丸中葛根异黄酮的提取工艺研究

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1、从本学科出发,应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性,便于研究生提出新见解,特别是博士生必须有创新性的成果脑得生丸中葛根异黄酮的提取工艺研究作者:李坷平,王俊永,梁生旺【摘要】目的优选脑得生丸中有效成分葛根异黄酮的提取工艺。方法以正交设计安排试验,采用高效液相色谱法测定葛根素和大豆苷的含量,并以此为指标考察溶剂浓度、溶剂用量、提取时间3个因素对异黄酮提取率的影响。结果用12倍量的体积分数为40%的乙醇回流提取2次,每次1h的条件为最佳提取工艺。结论本提取工艺设计合理,稳定,可为脑得生丸的进一步开发提供

2、可靠的实验依据。【关键词】脑得生丸;异黄酮;葛根;大豆苷;提取工艺脑得生丸收载于《中国药典》XX年版一部,由三七、川芎、红花、山楂和葛根等加工而成的蜜丸[1]。具有活血化瘀、疏通经络、醒脑开窍之功效,是治疗脑动脉硬化、脑中风及脑出血后遗症的常用药。葛根为豆科植物野葛[Puerarialobata(Willd.)Ohwi]的干燥根,主要含有葛根素、大豆苷、大豆苷元等异黄酮类成分,能改善冠脉、脑和外周血循环,抑制血小板聚集,降低血压,降低心肌耗氧量[2,3]。由于脑得生丸处方所含有效成分的极性差别较大,为进一步纯化的需要,本课题组将

3、其处方分为葛根、红花和三七、川芎、山楂两个部分,分别进行提取工艺研究课题份量和难易程度要恰当,博士生能在二年内作出结果,硕士生能在一年内作出结果,特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发,应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性,便于研究生提出新见解,特别是博士生必须有创新性的成果。本文对葛根和红花这部分进行报道,以葛根素、大豆苷作为异黄酮类成分的定量指标,探讨了脑得生丸中葛根异黄酮的最佳提取工艺条件。1仪器与试药1.1仪器  Waters695型高效液相色谱仪;Waters996二级管阵列检测器

4、;WatersEmpower色谱工作站;RE52CS旋转蒸发仪和B220型恒温水浴锅;十万分之一电子分析天平;纯水制备系统;SHBIV22B循环水多用真空泵。1.2试药  色谱甲醇,自制纯净水,其它试剂均为分析纯;葛根和红花药材购于河南省药材总公司,由我院生药教研室李书渊教授分别鉴定为豆科植物野葛[Puerarialobata(Willd.)Ohwi]的干燥根和菊科植物红花的干燥花;葛根素和大豆苷对照品。方法与结果.1色谱条件  以十八烷基键合硅胶柱为色谱柱;以甲醇水(体积比20∶80)为流动相;检测波长为250nm;流速

5、mL/min;柱温30℃。课题份量和难易程度要恰当,博士生能在二年内作出结果,硕士生能在一年内作出结果,特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发,应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性,便于研究生提出新见解,特别是博士生必须有创新性的成果.2对照品溶液的配制  精密称取葛根素和大豆苷对照品,分别置10mL容量瓶中,加入甲醇mL,超声溶解后,用甲醇定容至刻度,制得葛根素质量浓度为·mL-1,大豆苷质量浓度为·mL-1,密封保存,备用。.3药材溶液的制备  取葛根药材粉末(过3号筛),精密称定,置锥

6、形瓶中,精密加体积分数为50%的甲醇50mL,称定重量,加热回流30min,放冷,再称定重量,用体积分数为50%的甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。.4标准曲线的制备  分别精密移取对照品溶液,,,,,mL置10mL容量瓶中,用甲醇定容至刻度。μm微孔滤膜滤过,取续滤液。进样体积10μL,按色谱条件测得进样量与峰面积,计算回归方程,结果见表1。表1两种异黄酮的回归方程和线性范围RegressionequationsandlinearrangesoftwokindsofIsoflavone.5提取工艺条件优选[5]课

7、题份量和难易程度要恰当,博士生能在二年内作出结果,硕士生能在一年内作出结果,特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发,应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性,便于研究生提出新见解,特别是博士生必须有创新性的成果  按复方脑得生丸处方量的1/5,称取红花与葛根,等量9份药材。按正交设计安排试验(见表2),回流提取2次,合并滤液,回收溶剂至500mL,定量移取2mL,置1000mL容量瓶中,加体积分数为50%的乙醇至刻度,滤过,取续滤液作为正交试验的供试样品溶液。进样10μL,照“”项下色谱条件测定

8、。由外标法分别计算葛根素和大豆苷含量,两者之和为异黄酮的含量。结果见表3。表2因素和水平表Factorsandlevels.6阴性干扰试验  称取红花药材,加体积分数为40%的乙醇12倍量,回流提取2次,1h/次。以下操作同“”项操作。色谱图见图1。A.对照品;

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