释放磷实验操作程序

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1、实验反应装置图:①投药进行吸放磷实验:该实验装置要严格密封,以防空气中氧气对实验的影响。加药反应前用通N2來把装置屮的O?尽量吹脱,使其在厌氧状态下(01^=・200—・300左右)反应瓶②曝气进行吸放磷实验:反应瓶投加药品:N源投加药(KNO3):M计算代°(層『型书称KNO327.083g,溶解定容于250ml容量瓶,可得C(=15g/Lo如果需要投N源比较大,可直接投KNO3固体,这就看反应液中磷的含屋是否过高。总Z尽可能不要令投加药的体积数过人。P源投加药(KH2PO4):MQ1x31计算式.C=136.09八JC(pp4

2、3_-p)yp源投加是在反应菌液的po?--P值比较低的情况下加的,如投磷源,其投加量计算方法是:先设定投药后的PO43'—P值为amg/L,则NO,—N值为4amg/L,根据经验其设定值a=8mg/L以上。KH2PO4投加液投加量V(ml)=13OOY+13OOQ(PO^~-P)KNO3投加液投加最V(ml)=5200g+1300X培养基配方:醋酸盐金属培养基每L的配方如下:CH3COONa3・H2O3.68g,Na2HPO4•2H2O28.73mg,NH4CI57.27mg,MgSO4・7出0131.82mg,K2SO426.

3、74mg,CaCl2・2比017.2mg,HEPESbuffer12g,(15g琼脂)(固体培养基用,液体培养基不用)和2ml的微量元素。微量元素的配方每1L如下:EDTA50g,FeSO4•7H2O5g,CuSO4•5H2O1.6g,MnCl2・4电05g,(NH4)6Mo7O24・4H2Ol.lg,H3BO350mg,KIlOmg,CoCl2・6H2O50mg,吸放磷实验:由微牛物纽得到的需要进行吸放磷实验的菌。①投药进行吸放磷实验:1.按配方配培养基,每个反应装置均需要菌液1400ml左右「故配5()0ml培养液3个),按灭

4、菌操作进行培养基火菌,然后进行接种(无菌操作),斑养箱°C下培养天,〈菌的标签要与培养液的标签对应好)2.把接同种菌的3个培养液移至反应装置瓶,充分混匀,取原样。把装置瓶里的菌液调至1400ml刻度线,按装置图①接好。原样立即测定其ORP,PO£—P,NO/—N,根据其测定结果进行调整NP比(N:P=4:1)[具体调整方法:]假设原样测出的NOf—N值为Xmg/L,PO43-—P值为Ymg/LKNO3投加液投加量V(ml)=5200K+1300X(根据调整所配制KN03投加液的浓度来控制其投加量不耍过大,根据经验投加量为10-50

5、ml为合适,但需要投N源比较大,可直接投KNO3固体,这就看反应液中磷的含量是否过高门J投加量如有小数点,可取整投,但•要记录实际投加量7劲3.为了争取吋间,在取完原样可一边测原样,一边开N?瓶通N?,开始计时,lOmin,20min,30min各取样,I原样的测定・KNOs投加液投加屋V要在这30mM里测定计算好)30min后根据其计算投加KNO3投加液调整NP比。投药时打开橡皮塞,迅速投药塞好,尽量减少空气进入反应装置影响实验,投完药就开始反应时间计时,2min,5min,lOmin,20min,30min,45min,60m

6、in,90min,120min,150niin取样。〈反应过程屮一肓通N*1.取样前要摇匀,取样取满一25ml比色管(约30多ml),取样后,样品先测ORP,再进行过滤,再测定PO/—P,NO3-—N值,②曝气进行吸放磷实验:曝气进行吸放磷实验是为了比较投药进行吸放磷实验的效果而进行的。1.所用的菌液和投药进行吸放磷实验的相一致。〈两个实验其需要6瓶同种50(hnl的菌液,为了更好的比较效果,把6瓶同菌菌液相互混匀,最后得到2瓶几乎一致的1400ml菌淞2.〈曝气进行吸放磷实验与投药进行吸放磷实验不同的地方是不需要投KNOs投加液

7、),即把培养液移至反应装置瓶,充分混匀,取原样。把装置瓶里的菌液调至1400ml刻度线,先按装置图①接好。3.开N2瓶通开始计时,lOmin,20min,30min各取样,30min后按装置图②进行曝气(如在投药吸放磷实验屮加了磷源,这里也应加同等的磷源,以确保其可比性),开始曝气就开始反应时间计时,2min,5min,10min>20min,30min,45min,60min,90min,120min,150min取样。曝气时耍控制好速度,不耍把反应菌液溢出。一、测ORP(氧化还原电位)接好钳电极,把样品倒进烧杯中(为了使ORP

8、更具参考价值,实验用烧杯要统一规格),开始搅拌,统一在lmin后读数。由于ORP的测定比较困难,且数据不稳定,故每个样品的测定条件应尽可能一致,在测ORP前可先用污泥试验一下,其值在-100—300多为正常。注意:在测量搅拌过程小,要注意别讣搅拌磁

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