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《mcph1在肺组织的表达及其对人肺癌细胞株h1299凋亡的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、MCPH1在肺组织的表达及过表达后其对人肺癌细胞株H1299凋亡的影响张冀1，麦力1，吴晓彬1，肖明1，麦力1，袁成福1，卜友泉1,2，宋方洲1,2（400016重庆重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心1；400016重庆重庆医科大学生物化学与分子生物学教研室2）[摘要]目的探讨MCPH1基因在肺癌组织和正常组织的蛋白表达分布及其过表达后对人肺腺癌细胞系H1299凋亡的影响。方法临床收集20例肺癌组织和8例正常肺癌组织标本，免疫组化法检测MCPH1蛋白在肺组织的表达分布，真核表达质粒pcDNA3.1(－)/MCPH1和空白质粒pcDNA3.1瞬时转染肺癌细胞株H1299，并设立未处理组。
2、转染质粒48h后，采用Real-timePCR法检测细胞中MCPH1基因mRNA的转录表达情况；转染72h后提取细胞总蛋白，Westernblot检测细胞中MCPH1蛋白表达水平；转染72h后，并进行流式细胞术检测细胞凋亡的情况。结果MCPH1蛋白在肺癌组织中表达低于正常组织，而且MCPH1蛋白在癌组织中为胞浆和核质低都表达，在正常组织中为核质高表达；H1299转染pcDNA3.1(－)/MCPH1重组质粒后，可有效上调H1299细胞中MCPH1基因的mRNA和蛋白表达，而处理组的细胞凋亡率(18.10±1.87)％较阴性对照组(5.76±1.85)％和未处理组(5.85±0.57)％
3、明显显著增加，且差异均有统计学意义(（P＜0.05)）。结论本实验MCPH1蛋白在肺癌组织中表现为胞浆低表达而且过表达后观察到MCPH1在人肺癌组织表达降低，过表达之后可诱导肺腺癌细胞发生凋亡，这一现象值得进行机制探讨。MCPH1能促进人肺腺癌细胞系H1299的凋亡，且在肺癌组织中表现为胞浆低表达，为进一研究MCPH1基因在肺癌细胞凋亡中的作用及其机制奠定了基础提示其可能是一个新的肺癌抑制基因。[关键词]：肺癌；MCPH1；免疫组化；H1299；细胞凋亡MCPH1proteinexpressioninlungtissuesanditseffectofover-expressionofM
4、CPH1onapoptosisofHumanlungcancercellsZHANGJi1,MAILi1,WUXiao-Bin1,XIAOMing1,MAILi1,YUANChen-Fu1,BUYou-Quan1,2,SONGFang-Zhou1,2(（1MolecularMedicine&CancerResearchCenter，ChongqingMedicalUniversity,Chongqing,China;2DepartmentofBiochemistry&MolecularBiology,ChongqingMedicalUniversity,Chongqing,China)
5、）[【Abstract]】ObjectiveToevaluatedtheexpressionofproteinMCPH1inlungtissuesandinvestigatetheeffectofover-expressionofMCPH1geneonapoptosisofHumanlungcancercells.MethodsWeevaluatedtheexpressionofproteinMCPH1in20lung cancer and8normallungtissuesbyimmunohistochemistry;EukaryoticexpressionplasmidpcDNA3
6、.1(－)/MCPH1andblankplasmidpcDNA3.1weretransfectedtolungcellsH1299,andusingthecellsuntransfectedascontrol.48hoursaftertransfection，thecellsweredetectedfortranscriptionandexpressionofMCPH1mRNAbyreal-timePCR;72hoursaftertransfection,thetotalproteinwasextracted,theMCPH1proteinweredeterminedbyWestern
7、blot，andtheapoptosisofH1299cellsweredeterminedbyflowcytometry.ResultsComparedwithnormaltissues,MCPH1expressionshowedmuchlowerinlungcancertissues,andMCPH1showedcytoplasmicexpressionincancertissues,whereasMCPH1wasexpressedmain
