2种去细胞方法制备大鼠脱细胞脊髓支架效果的对比研究

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1、2种去细胞方法制备大鼠脱细胞脊髓支架效果的对比研究*基金项目：国家自然科学基金面上项目（30872600）；重庆市自然科学基金面上项目（2007C126）SupportedbynationalnaturalscienceFoundationofchina(30872600）,andNaturalSciencesFoundationofchongqing(2007C126).作者简介：郭树章，男，天津市蓟县人，主治医师，博士，主要从事脊柱及脊髓创伤修复的基础与临床研究。现在兰州军区乌鲁木齐总医院骨三科，Email:gszlch@yahoo.com.cnTel:13639952858通

2、讯信作者：任先军，电话：（023）68774081，E-mail:ren_xianjun@sina.com收稿日期：2009-09-20修回日期：2009-11-16郭树章，蒋涛，任先军（400037重庆第三军医大学新桥医院骨科）【摘要】目的比较脱氧胆酸钠+TritonX-100和脱氧胆酸钠+DNA+RNA酶两种2种脱细胞方法制备脱细胞的同种异体脊髓支架的效果。方法取成年SD大鼠胸段脊髓2cm，运用冻融+化学萃取的组织工程学方法（脱氧胆酸钠+TritonX100TritonX-100和脱氧胆酸钠+DNA+RNA酶）处理大鼠脊髓组织，对处理后的脊髓支架分别进行HE染色，髓鞘染色和扫描

3、电镜观察。结果两2种方法均较为完全地脱去了细胞和髓鞘成分，脊髓横断面上呈网状结构，未见细胞成份存留，纵切面上呈互相交错的管状通路；未见轴突、髓鞘和细胞核。结论采用冻融+化学萃取的两种2种组织工程学方法均可制备出理想的天然脊髓支架，该支架与脊髓三维组织结构具有高度相似性，有望作为脊髓损伤后桥接物和神经组织工程种子细胞的支架。【关键词】：脱细胞脊髓；组织工程支架；大鼠，脱氧胆酸钠；TritonX-100FabricationofdecellularizedspinalcordscaffoldofratswithtwokindsofmethodGUOShu-zhang，RENxian-j

4、un*，JIANGtao，WuBo（DepartmentofOrthopaedics，XinqiaoHospitalofThirdMilitaryMedicalUniversity，Chongqing400037China）【Abstract】：[Objective]Tocomparetheeffectoffabricatingdecellularizedscaffoldofspinalcordwithtwokindsofmethod，andtoprovideanidealnaturalspinalcordscaffoldtobridgethenervegap.[Methods]R

5、atspinalcordwascutandtreatedusingthemethodoffreezethawingandchemicalextraction.HEstaining，myelinstainingandSEMobservationwasexploitedtoevaluatethisspinalcordscaffold.[Results]BothCellandmyelinwascompletelydecellularizedwithtwomethods.Incrosssection，networkoftheextracellularmatrixwaspresentedwi

6、thoutaxon，sheathandcellsnucleusbeingseeninthescaffold.Typicalnetworkofemptytubeswereviewedinlongitudinalsections.[Conclusions]Anidealspinalcordscaffoldcanbeproducedwithtwotissueengineeringmethodsdesignedinourexperiment.Thisscaffoldhassimilarthreedimensionalstructurewithnormalspinalcord，whichca

7、nbeusedasagrafttobridgethenervegapdirectlyorasascaffoldtoimplanttheseedingcellsinspinalcordtissueengineering.【Keywords】：AcellularSpinalCord；TissueEngineeringScaffold；Rat;sodiumdeoxycholate;TritonX-100-4-脊髓损伤后轴突再生和功能恢复一直是骨科及神经外科的难题，虽然近年来