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《熊脱氧胆酸和利福平诱导hepg2细胞核受体ftf和膜转运蛋白mrp3的表达》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、熊脱氧胆酸和利福平诱导HepG2细胞核受体FTF和膜转运蛋白MRP3的表达柴进1,吴晓平1,夏锋2，何宇2，王槐志2，肖天利1，陈文生1(第三军医大学：1西南医院全军消化病研究所，2西南医院全军肝胆外科研究所，重庆400038)[摘 要] 目的 体外细胞培养中观察利胆药物熊脱氧胆酸(ursodeoxycholicacid]，UDCA)或利福平(rifampicin，Rif)对多耐药相关蛋白MRP3(multidrugresistance-associatedprotein3,MRP3)及其核受体FTF(FetoproteinTr
2、anscriptionFactor)表达的影响。方法 用熊脱氧胆酸(ursodeoxycholicacid]，UDCA)UDCA及其衍生物牛磺熊脱氧胆酸（tauroursodeoxycholicacid，TUDCA）或利福平(rifampicin，Rif)Rif分别刺激培养的肝癌细胞HepG2后,抽提HepG2的总RNA与细胞总蛋白、核蛋白,分别用Quantitativereal-timePCR和Westernblot检测MRP3和FTFmRNA水平与蛋白表达水平的变化。结果 UDCA、TUDCA和Rif可诱导HepG2细胞内核
3、受体FTF表达增高，同时MRP3mRNA和蛋白水平表达也相应增高。结论 UDCA及其衍生物TUDCA和Rif在HepG2细胞中可能通过核受体FTF上调膜转运蛋白MRP3的表达。[关键词]MRP3;FTF;HepG2细胞UrsodeoxycholicacidorrifampicininducenuclearreceptorFTFandmembranetransporterMRP3expressioninHepG2cell1CHAIJin,1WUXiao-ping,2XIAFeng,2HEYu,2WANGHuai-zhi,1XIAO
4、Tian-li,1CHENWen-sheng(1GastroenterologyInstitute,2HepatobiliarySurgeryInstitute,SouthwestHospital,ThirdMilitaryMedicalUniversity,Chongqing400038,China)Abstract:Objective ToobservetheinductionofUDCAandRifonexpressionsofnuclearreceptorFTFandmembranetransporterMRP3inHe
5、pG2cells.Methods BothtotalRNAandmembraneornuclearproteinswereisolatedfromHepG2cellsafter48htreatmentofUDCA，TUDCorRif.ThemRNAandproteinexpressionlevelofMRP3andFTFweredeterminedbyQuantitativereal-timePCRandWesternblot.Results BothFTFandMRP3expressionwassignificantlyind
6、ucedeitheratmRNAorproteinlevelbyUDCAorRifinHepG2cells.Conclusion TheUDCAorRifmayup-regulatehepaticmembranetransporterMRP3throughFTFpathway.Keywords:MRP3;FTF;HepG2cellMRP3(Abcc3)属于MRP(multidrugresistanceprotein)家族的成员，是一种近年克隆的、存在于极性化的肝细胞基底侧膜上的一种有机阴离子排泌泵,在正常肝细胞表达量很低或不表达
7、[1]。但在病理状态如胆汁淤积性疾病（如：胆道梗阻、原发性毛细胆管性肝硬化、Dubin-Johnson综合征等）时MRP3在肝细胞膜基底侧面表达量大为增加[2]。近来的研究显示:核受体FTF在胆酸合成代谢途径、肝特异性基因表达的调控网络中具有非常重要的作用。它可调控多种转运蛋白基因的表达,是机体对胆汁淤积病理应激状态产生适应性改变的重要核转录因子之一，已有相关研究证实FTF能够上调MRP3的表达[3]，但是其调节MRP3表达的分子机制尚不完全清楚。为此,本实验在培养的肝癌细胞HepG2中用利胆药物化学诱导MRP3表达,检测核受体
8、FTF表达变化,为进一步研究MRP3基因转录调控分子机制提供线索。1 材料与方法1.1 材料HepG2细胞购自中科院上海细胞研究所。DMEM培养基购自GIBCO公司,利胆药物熊脱氧胆酸(ursodeoxycholicacid]，UDCA)及其衍生物牛磺脱氧胆酸（
