四种提取方法对沙棘总黄酮提取的影响

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1、四种提取方法对沙棘总黄酮提取的影响　　摘要：目的比较超声波、闪式、微波和回流四种提取法对沙棘总黄酮提取的影响。方法采用超声波、闪式、微波和回流四种提取法对沙棘籽中黄酮进行提取；采用紫外分光光度法，检测波长为510nm，测定沙棘籽各提取液中的OD值，计算黄酮含量并进行比较。结果超声波、闪式、微波和回流提取液中的总黄酮含量分别是9.8，14.16，8.8，10.39mg/g。结论实验结果表明，闪式提取法对沙棘总黄酮的提取率最高，略优于回流提取法，超声提取法次之，微波提取法最低。　　关键词：沙棘籽；黄酮；提取法；比较　　

2、沙棘总黄酮对心脏功能、呼吸系统疾病、消化系统疾病、烧伤、烫伤和癌症等均有较好作用。　　为了充分提取和利用沙棘黄酮，本文以沙棘为研究对象，分别采用超声波、闪式、微波和回流提取法提取沙棘籽中的黄酮，并将四种方法对黄酮的提取率作一比较，筛选出最好的提取方法，为沙棘黄酮的合理利用奠定良好理论基础。　　1仪器、材料和试剂　　JHBE-50S闪式提取控制器（北京金鼎科技发展有限公司）；UV757CRT紫外可见分光光度计（上海精密科学仪器有限公司）；FA2004电子分析天平（上海恒平科学仪器有限公司；超声波清洗器（昆明超声仪有限

3、公司）。5　　芦丁对照品（中国药品生物制品鉴定所，纯度大于98%）；沙棘购买于佳木斯市宝泰医药公司，经佳木斯大学药学院宗希明教授鉴定为沙棘；所用试剂为分析纯。　　2方法　　2.1黄酮的含量测定　　2.1.1对照品溶液的配制。精确称取芦丁标准品19.98mg，加入30mL乙醇使其溶解，冷却后定容至100mL，摇匀，即得0.1998mg/mL的芦丁标准溶液。　　2.1.2供试品溶液的配制。精确称量沙棘干燥药材10.00g，按不同方法提取后得提取液，加入适量乙醇溶解并定容至500mL，摇匀，即得。　　2.1.3紫外显色方

4、法。取待测溶液于25mL的容量瓶中，加入10%的NaNO2溶液1.0mL，摇匀，室温放置6min；加入10%的Al（NO3）3溶液1.0mL，摇匀，室温放置6min；再加入5%的NaOH溶液10.0mL，摇匀，室温放置15min；加入乙醇定容至25mL容量瓶中，摇匀即可。　　2.1.4最大吸收波长的确定。精密移取3.0mL芦丁标准溶液于25mL的容量瓶中，按2.1.3项下方法显色，利用紫外可见分光光度计，在波长为450-600nm区间扫描，确定最大吸收波长为510nm。　　2.1.5标准曲线的绘制。精密移取标准溶液

5、0mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL分别置于25mL容量瓶中，加入乙醇12.0mL，11.0mL，10.0mL，9.0mL，8.0mL，7.0mL后，按2.1.3项下方法显色，用紫外可见分光光度计在510nm波长下测定吸光度，绘制标准曲线，通过计算得到回归方程。　　2.2沙棘籽中黄酮的提取5　　2.2.1超声波提取法。精密称取10.02g沙棘籽粉末于锥形瓶中，加入60%乙醇，料液比1：15（g：mL），超声提取时间30min，提取温度70℃-80℃，超声功率600W，提取2次，合并滤液

6、，定容于500mL容量瓶中，备用。　　2.2.2闪式提取法。精密称取10.11g沙棘籽粉末置于闪式提取器，加入80%乙醇，料液比1：40（g：mL），闪式提取40s，2次，将提取液定容于500mL容量瓶中，备用。　　2.2.3微波提取法。精密称取10.07g沙棘籽粉末置于微波炉专用杯中，加入75%乙醇浸泡10min，料液比为1：25（g：mL），微波功率为400W，提取10min，将提取液定容于500mL容量瓶中，备用。　　2.2.4回流提取法。精密称取10.20g沙棘籽，置于圆底烧瓶中，加入70%乙醇，料液比为1

7、：40（g：mL），提取温度为90℃，提取时间为100min，提取2次，合并二次提取液后，定容于500mL容量瓶中，备用。　　3结果　　3.1标准曲线及回归方程　　按照2.1.5项下方法绘制标准曲线图1，通过计算得到回归方程y=0.5271x-0.0125，相关系数R2=0.9913。参照该曲线计算供试液中黄酮的含量。　　3.2各提取液中黄酮含量比较　　采用4种不同方法对沙棘总黄酮进行提取，所得提取液经过紫外分光光度法检测并依据回归方程计算得到各提取液总黄酮含量。测定结果见表1。四种提取方法闪式提取法提取率最高，其

8、次是回流提取法，再次为超声提取，最次为微博提取法。5　　4讨论　　本实验分别考察了超声、闪式、微波和回流提取法对沙棘总黄酮的提取影响，总黄酮含量分别是9.8mg/g，14.16mg/g，8.8mg/g和10.39mg/g。实验结果表明，闪式提取法略优于回流提取法，超声提取法次之，微波提取法最低。闪式提取法为黄酮的提取提供了一种高效、简便易操作的新方法，吸收了