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《peg修饰β―谷甾醇制备新型绞股蓝总皂苷长循环脂质体探究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、PEG修饰P一谷笛醇制备新型绞股蓝总皂昔长循环脂质体探究［摘要］目的：探讨用聚乙二醇(PEG)修饰B-谷笛醇(PEG-Sito)制备新型绞股蓝总皂昔长循环脂质体的可行性。方法：以丁二酸酉干为连接臂连接B-谷笛醇与PEG2000合成PEG-Sito；以鞘磷脂和PEG-Sito为膜材采用乙醇注入法制备绞股蓝总皂昔长循环脂质体；脂质体以鱼精蛋白沉淀法进行包封率的测定；1H-NMR验证PEG-Sito的合成；粒径、电位、AFM电镜表征该新型绞股蓝总皂昔长循环脂质体。结果：1H-NMR证实了PEG-Sito的合成成功，采
2、用乙醇注入法用PEG-Sito为材料制备长循环脂质体的包封率为74.3%,粒径28&1nm,电位-20.25mV,电镜下呈规则圆形。结论：用PEG-Sito为材料制备绞股蓝总皂昔长循环脂质体方法可行，绞股蓝总皂昔包封率高，形态和粒径均较好。［关键字］绞股蓝总皂昔；长循环脂质体；B-谷笛醇；聚乙二醇脂质体由于具有缓释、增效、减毒、靶向等优点，是中药传递系统中最受关注的热点［1-2］o近年来发展的长循环脂质体或隐形脂质体(long-circulatingliposomes,stealthliposomes)［3］是
3、通过将聚乙二醇-二硬脂酸磷脂酰乙醇胺(PEG-DSPE)镶嵌在脂质体双层膜之间，PEG的长链在脂质体表面形成空间位阻和亲水保护层，能阻止吞噬细胞对脂质体的的识别和摄取而极大地延长脂质体的血循环时间，便于药物进入病变组织，提高治疗指数和疗效［4-5］,但由于磷脂价格较高，PEG修饰后价格更加昂贵，且DSPE,PEG均为大分子，与硅胶有很强的吸附性，合成后分离纯化相当困难，得率极低，大大限制了长循环脂质体在制剂领域中的应用［6］。本课题组前期已论证了以不引发心血管疾病的植物笛醇替代胆固醇来稳定脂质体、构建脂质体的可
4、行性［7］,又论证了采用新型磷脂一一鞘磷脂制备高稳定性的脂质体的可行性［8］。在本课题中，笔者避开用PEG对磷脂修饰制备长循环脂质体的常规思路，采用PEG对价格相对低廉的小分子笛醇进行修饰，得到聚乙二醇-B-谷笛醇（PEG-Sito）,然后以PEG-Sito为长循环材料和近年来被发现具有显著的抑制肿瘤作用的绞股蓝总皂昔（gypenosides）为模型药，对用PEG-Sito制备绞股蓝总皂昔长循环脂质体的可行性进行了探讨，为中药长循环脂质体的开发提供一种新的思路，具有较大的理论及应用价值。1材料ModelRE-5
5、2A型旋转蒸发仪（上海亚荣生物仪器公司）;AVYIII-500MHz核磁共振仪（美国bruker公司）；360型傅立叶变换红外光谱仪（Wartars公司）；SHB-III循环水式多用真空泵（郑州长城科工贸有限公司）；HZQ-X280恒温振荡培养箱（太仓市华美生化仪器厂）；BS210型电子天平；WFJ2000可见分光光度计；KBS-150型数控超声波细胞粉碎机（昆山市超声仪器有限公司）；SCZL-A型数字智能控温磁力搅拌器（郑州长城科工贸有限公司）；数显恒温水浴锅HH-2（国华电器有限公司）；原子力显微镜AFM（
6、Veeco公司）；LGJ-10冷冻干燥仪（北京博医康实验仪器有限公司）。绞股蓝总皂昔（陕西昂盛生物医药科技有限公司，批号20120119）；鱼精蛋白（Sigma公司，批号P4672）；绞股蓝皂昔对照品（阿拉丁，批号D100246）；香草醛（上海晶纯实业有限公司，批号V100115）；鞘磷脂（Sigma公司，批号E1028）；B-谷笛醇（杭州大阳化工有限公司，质量分数97%）；丁二酸酉干（国家集团化学试剂有限公司）；4-二甲氨基毗噪（DMAP）、1-乙基-（3-二甲基氨基丙基）碳二亚胺盐酸盐（EDC）、磷钮酸均购
7、于阿拉丁，其他试剂为分析纯。2方法与结果2.1PEG-Sito的合成［9］2.1.1PEG-Sito的合成路线具体合成路线见图lo2.1.2B-谷脩醇衍生物的制备［10］将B-谷笛醇（Sito）（2.50g,6.03mmol）,丁二酸酉干（3.25g,32.48mmol）,DMAP（0.40g,8.19mmol）溶于50mL二氯甲烷中，在45°C下剧烈搅拌回流48ho二氯甲烷溶液用1mol•L-1(50mLX3)盐酸溶液洗涤，Na2S04干燥在旋转蒸发仪上旋干，得白色固体(suc-Sito)2.80g,收率90
8、.3%。B-谷笛醇衍生物(suc-Sito)经薄层色谱(TLC)鉴定，Rf=0.7(氯仿-甲醇12:1,5%磷钮酸显色)；1H-NMR(500MHz,CDC13)5:5.37(d,谷笛醇C6-H,1H),4.63(q,B-谷笛醇C3-H,1H),2.68(t,丁二酸CH2,2H),2.61(t,丁二酸CH2,2H),2.31(d,B-谷笛醇C4-H,2H)。2.1.3PEG-Sito的
