双酚a亚急性染毒对小鼠造血功能实验方案

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1、双酚A亚急性染毒对小鼠造血功能实验方案［摘要］双酚A(bisphenolA,BPA)是酚类化合物中具代表性的一类环境雌激素污染物。多应用于食品和饮料碳酸聚酯包装材料、牙齿固封剂、金属罐头树脂内膜等，能够模拟和干扰动物体内雌激素的正常代谢和生理活动。但目前，含双酚A的塑料容器，在世界上绝大多数国家包括中国在内都在正常使用。人们忽视了双酚A的危害。因此，对双酚A危害的研究意义重大。［关键词］双酚A类环境雌激素危害［中图分类号］R965［文献标识码］A［文章编号11009-5349(2013)08-0104-01

2、一、国内外对于双酚A的研究现状目前，国内外对于双酚A的毒性研究资料，主要为动物实验调查研究。例如，研究表明雪貂对双酚A非常敏感，有时持续性发情就会导致骨髓细胞再生不良；犬对双酚A也比较敏感，使用不当会导致严重的再生障碍性贫血，甚至患睾丸支持细胞肿瘤的雄犬也有发生再生障碍性贫血的记录。啮齿类动物注射双酚A可引起血液学改变，猫则表现出很强的雌激素毒性耐受性。［1］更有资料显示双酚A具有一定的胚胎毒性和致畸性，可明显增加动物卵巢癌、前列腺癌、白血病等癌症的发生。研究发现双酚A属于低毒性化学物。通常情况下，双酚A对

3、皮肤、角膜、消化道和呼吸道具有中等强度刺激性，对鼠类具发育毒性。动物试验发现双酚A具有模拟雌激素代谢的效果，即使是极低的剂量也能使动物产生早熟、前列腺增长、精子数目下降等作用。二、国内外双酚A使用现状直至目前，一些国家已经对双酚A采取了限制措施：挪威：最早将双酚A纳入受限物质的应是原定于2008年1月1日生效，后因许多议题尚未达成共识而延期的挪威PoHS指令，在其对消费性产品中的禁止使用的10种物质中就包括双酚A(BPA)o美国：2009年3月份提案禁止在“可重复使用的食品容器”和“其他食品容器”中使用(B

4、PA)o这一禁令在正式通过180天后开始生效。中国：2011年5月30日，卫生部等6部门对外发布公告称，鉴于婴幼儿属于敏感人群，为防范食品安全风险，保护婴幼儿健康，禁止双酚A用于婴幼儿奶瓶。但是最近的研究发现，有超过90%的美国人体尿样中检测到了双酚A[2],这意味着双酚A仍在被大量使用。双酚A对健康有害已经是一个不言自明的结论，但大部分人一直以为：日常生活环境中人们接触的双酚A浓度很低，不足以构成对人体的危害。在这样的认识下，双酚A被人们广泛应用。三、实验设计方案（一）实验动物28日龄健康的清洁级ICR小

5、鼠，体重18-23g,雌性小鼠15只，雄性小鼠15只，共30只。（二）实验试剂和药品双酚A：金龙鱼花生油。（三）实验器材lml注射器；小鼠灌胃针头，冷冻离心机，冰箱，SysmexF-820半自动血细胞分析仪测定。（四）实验步骤用金龙鱼花生油将BPA配置成0.012mg/ml,0.12mg/ml两种浓度的溶液，小鼠的灌胃体积为0.lml/30g/bw,每日上午7点15分灌胃。将小鼠雌雄分笼喂养，昼夜12小时交替，室温控制在18°C-22°C,湿度控制在50%-60%,食物与水可以自由摄取。待小鼠适应1周后，把

6、雄鼠随机分为40、400Ug/kg/dayBPA剂量染毒组和对照组，每组雄鼠5只；同时雌鼠随机分为40、400Ug/kg/dayBPA剂量染毒组和对照组，每组雌鼠5只。从第2周开始灌胃染毒，染毒持续30天，对照组（n=10）灌胃溶媒花生油，灌胃体积与时间同染毒组。染毒结束后，处死动物颈动脉采血，肝素抗凝，re保存备用，检测指标采用SysmexF-820半自动血细胞分析仪测定，严格按仪器说明书操作。（五）检测指标1.小鼠血液红细胞系各项指标检测：红细胞计数（RBC）、血红蛋白（HGB）.红细胞压积（HCT）、

7、红细胞的平均体积（MCV）、平均红细胞血红蛋白量（MCH）、红细胞平均血红蛋白浓度（MCHC）、红细胞分布宽度变异系数（RDW-CV）。2.小鼠血液白细胞系各项指标检测：白细胞计数（WBC）、淋巴细胞百分比（W-SCR）、中性粒细胞比率（W-LCR）、淋巴细胞绝对值（W-SCC）、中性粒细胞绝对值（W-LCC）o3.小鼠血液血小板系各项指标检测：血小板量（PLT）、血小板分布宽度（PDW）、平均血小板体积（MPV）。（六）统计学分析采用SPSS10.0统汁软件进行分析，组间比较采用方差分析，P