医学免疫学cdc实验报告

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1、CDC实验一•实验原理细胞表面抗原与相应的抗体（IgGl〜3或IgM）特界性结合形成的免疫复合物，口J通过经典途径激活补体形成攻膜复合体而导致细胞膜穿孔。因此，水溶性染料如台盼蓝可进入受损细胞，染成蓝色，为阳性反应；不带抗原的细胞，未损伤，不染色，为阴性反应。二.实验步骤1•胸腺细胞悬液制备颈椎脱臼法处死小鼠I暴露胸腔，分离岀胸腺I银了夹住胸腺反复轻轻研磨I单个细胞PBS洗2次，lOOOrpm,lOminI加入5%小牛血清PBS制备细胞悬液调节细胞浓度至3-4X10刀ml第一组第一组第三组第四组试剂LC+als+cLC+alsLC+cLCLC(p1)5

2、0505050ALS(m1)5050PBS(ui)505037°C孵育30minC（P1）100100PBS(ui)10010037°C孵育30min三•结果判断①细胞膜穿孔的细胞呈蓝色，细胞膜完整的活细胞不着色。②细胞毒性作川的判断标准如下：阴性反应（一）死细胞山0・10%可疑阳性反应（土）死细胞占11・2（）%弱阳性反应（+）死细胞占21-50%阳性反应（++）死细胞占51-80%强阳性反应（+++）死细胞占81-100%四•结果记录1.表格记录第一组第二组第三组第四组（LC+ALS+C）（LC+ALS）（LC+C）（LC）+++———2•照片展示

3、五•讨论①•第①组成阳性的原因：实验中加入抗原、抗体、补体、LCo抗原抗体能形成抗原抗体免疫复合物，通过经典途径激活补体，形成攻膜复合物，从而导致细胞膜穿孔，细胞受损，台盼蓝进入细胞，染成蓝色，呈阳性反应。说明CDC实验必须要有抗原、抗体、补体共同参与。②•第②组成阴性的原因：实验中加入抗体、LCo因为无抗原和补体，不能形成抗原抗体免疫复合物，也无补体，因此不能形成攻膜复合物，不能使细胞膜穿孔，细胞无损伤，台盼蓝无法进入细胞，不能被染成蓝色，呈阴性反应。说明CDC实验必须要有补体的参与。①•第③组呈阴性的原因：试验中加入LC和补体，因为无抗原抗体，所以

4、没有抗原抗体免疫复合物的形成，补体不能被激活，不能形成攻膜复合物，细胞无受损，台盼蓝不能进入而不被染色，呈阴性反应。说明CDC实验必须要有抗原、抗体的参与。②•第④组呈阴性的原因：实验屮只加入LC,既无抗原抗体免疫复合物的形成，也无补体，细胞无受损，台盼蓝不能进入而不被染色，呈阴性反应。说明CDC实验必须要冇抗原、抗体、补体的共同参与。