春石斛兰试管苗生产技术规程

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1、春石斛兰试管苗生产技术规程张秀珊曾宝踏郭英铎洪生标郑运欢柳江海黄广东省汕头市农业科学研究所摘要：详细介绍春石斛兰试管苗生产过程屮的基本设施与技术、播种苗的生产、分生苗的生产、炼苗、瓶苗质量、包装与运输等内容，总结春石斛兰试管苗生产的技术规程，为春石斛兰试管苗生产者和组培爱好者提供参考。关键词：春石斛兰;试管苗生产;技术规程;作者简介：张秀珊(1972-)，女，高级农艺师;主要从事花卉选育种及组培技术研究。作者简介：柳江海，高级农艺师。E-ma订:nkyljh@126.com春石斛兰(Dendrobium)为兰科(Orchidaceae)石斛属多

2、年牛草木植物，茎叶美丽，花色艳丽多姿，花香怡人，花期持久，具有极高的观赏价值。近年来，春石斛兰盆花已成为我国大陆继蝴蝶兰Z后的又一高档礼品花卉，具有非常广阔的发展前景。1基本设施与技术1.1基本设施设备1.1.1基本设施交通方便、环境清洁、空气干燥的生产配套场所一一洗涤室、试剂室、培养基配置室、灭菌室、培养基冷却室、接种室、培养室、炼苗大棚等。1.1.2基本设备安全、高效的生产配套设备一一洗瓶机、培养基分装机、高压蒸汽灭菌炉、烘干箱、超净工作台、天平、冷暖空调、培养架、培养瓶、紫外线灯、常用玻璃仪器、接种盘、接种刀、蹑子、高温灭菌器、酒精灯等，

3、以及所需的化学试剂。1・2常用技术1.2.1培养基配制按培养基的配方及所需数量分别加入各类物质，混合后倒入培养基分装桶中，用纯净水定容至所需体积，加热搅拌至完全溶解并充分混合后，用1mol/L的NaOH溶液调节pH值至所需酸碱度，再趁热用培养基分装机将培养基分装入培养瓶中，塞上瓶塞或盖上瓶盖。1.2.2灭菌(1)培养基。在高压蒸汽灭菌炉内用湿热空气灭菌法(压力0.1广0.14MPa、120~126°C、15~20min)进行灭菌。(2)接种工具。接种盘可随培养基一起灭菌，灭菌后用烘干箱烘干，待用；银子与接种刀在接种过程中，采用酒精灯灼烧或高温灭

4、菌器进行灭菌。(3)外植体。用0.l%HgCI2溶液或10%NaCl0溶液浸泡处理，不同外植体采用不同的消毒方法和消毒吋间。(4)其他。接种室、培养室用紫外线灯或臭氧等杀菌;接种台、手等用75%酒精涂擦杀菌。1.2.3接种在超净工作台上，摆放好接种工具，用蹑子将需要接转的材料取岀置于接种盘上，用银子和接种刀将材料进行适当切割，再用银子将切割好的材料插植到新的培养基中。操作吋要注意对瓶口及瓶塞进行灼烧，然后及口寸塞上瓶塞，盖上防尘盖。银子和接种刀每转1瓶材料后，用酒精灯灼烧或高温灭菌器进行灭菌，接种盘每转1瓶材料更换1个，以防止污染。2播种苗的生

5、产2.1种子的获得2.1.1选择亲本根据生产需要或育种目标，选择花色、花型、开花习性好，且生物学特性、生长习性、环境适应性、植株长势等表现较好的优良单株作亲本。2.1.2人工授粉(1)吋间。开花第1d花粉萌发力最强，开花后7d花粉块仍具活力，母本最好的授粉时间在开花后3〜4do一天中最佳授粉时间为9:00~10:00o(1)授粉。先将母本的花粉块除去(去雄)，再将采集的父本花粉块用小蹑子蹑起轻轻放在母本的蕊腔中。用铅笔写好标牌，注明父母亲本、授粉日期等。1.1.3采收授粉后，应经常观察授粉花朵的变化并防止损坏，加强肥水管理。约150^180d后

6、，在葫果尚未裂开时采收。2・2播种1.2.1萌果处理春石斛兰种子以随采收随播种为好。釆收冋来的萌果，先用剪刀将残存的花器官仔细剪去，然后用75%酒精棉花将茹果表面的灰尘、残留肥料、农药等擦拭干净,再在超净工作台上用0.l%HgCl?溶液或10%NaCl0溶液浸泡10~15min,用无菌水冲洗4〜6次。1.2.2播种在超净工作台上将己消毒好的葫果放在无菌接种盘上，用灭菌后的银子银住踴果，用接种刀切开，将种子均匀播撒于事先准备好的培养基中。1.2.3培养HyponexNo.12g/L+胰蛋白腺2g/L+活性炭1g/L+香蕉泥30g/L+2%蔗糖+0

7、.6%琼脂，pH值5・4±0.2。1.2.4培养条件培养温度为(26土2)°C,前期暗培养或有散射光即可。在种子萌发生长并转至黄绿色时，光照强度可增加至800^1000lx,光照时间8h/do2.3分瓶2.3.1培养基HyponexNo.12g/L+胰蛋白腺2g/L+活性炭1g/L+香蕉泥40g/L+2%蔗糖+0.6%琼脂，pH值5.4土0.2。2.3.2培养条件培养温度为(26±2)°C,光照强度1000~1500lx,光照时间8h/d。播种约60~80d后，当叶片长至0.5~1.0cm时，即可开始分瓶，以增大生长空间。分瓶时，应尽量将小苗分

8、开，并使其在培养基中均匀分布，同时淘汰生长势较弱的小苗。每60^80d分瓶1次，分瓶广2次即可。2.4壮苗培养2.4.1培养基HyponexNo.13