果蝇的杂交试验.doc

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1、实验六、果蝇的杂交试验一、实验目的1、了解伴性遗传和常染色体遗传的区别2、理解和验证伴性遗传和分离、连锁交换定律：3、学习和掌握基因定位的方法4、加深理解孟三个遗传定律二、实验原理红眼与白眼是一对相对性状，控制该对性状的基因（W）位于X染色体上，且红眼（W）对白眼（w）为完全显性。当红眼雌蝇与白眼雄蝇杂交时，无论雌雄均为红眼，F2中红眼:白眼=3:1，但雌蝇全为红眼，雄蝇中红眼:白眼=1:1；反交时F1中雌蝇为红眼，雄蝇为白眼，F2中红眼:白眼=1:1，雌蝇和雄蝇中的红眼与白眼的比例均为1:1。正常翅（Sn3）对小翅（sn3）为显性，正常刚毛（M）对焦刚毛（m）为显性，与红眼（W）和白眼

2、（w）一样，均位于（X）染色体上。利用三点测交的方法只需通过一次杂交和一次测交就能同时确定三个基因在染色体上的位置顺序和基因的相对距离，绘出连锁图。让白眼小翅焦刚毛♀蝇与野生型♂蝇杂交，F1雌蝇是三杂合体：表型为野生型。F1♂蝇是白眼焦刚毛小翅。F1代的雌雄蝇互交实际上相当于三杂合体雌蝇与三隐性雄蝇的测交。通过对互交后代中各种表型比例的分析，就可进行w、sn3和m等基因的定位。三、实验材料、器具和试剂1、实验材料野生型雄蝇、雌蝇、白眼焦刚毛小翅雌雄蝇。野生型品系：长翅，直刚毛，红眼突变型品系：小型翅，卷刚毛，白眼2、实验器具放大镜、显微镜、麻醉瓶、白瓷板、毛笔、记录本。3实验试剂乙醚、酒

3、精棉球、培养基。四、实验步骤1.选处女蝇选白眼焦刚毛小翅处女蝇8只，同时选野生型处女蝇8只。方法:将野生型和白眼焦刚毛小翅果蝇培养瓶内的成蝇全部赶去，12小时内将重新孵化出的雌雄果蝇分开，即可得所需处女蝇和雄蝇。2.杂交将白眼焦刚毛小翅处女蝇麻醉，并挑取野生型♂蝇8只麻醉后放入培养瓶，此杂交组合可用作伴性遗传和基因定位的观察统计。将野生型处女蝇8只麻醉，同时将同样数量的白眼焦刚毛小翅雄蝇麻醉，放入培养瓶，此组合用于分离定律和伴性遗传实验的反交。贴好标签。注明杂交组合和日期，学生姓名。3.25℃条件下培养7～8天后，赶去亲本蝇。4.观察F111～13天后，F1代羽化，用放大镜对正交组合的F

4、1进行观察，看F1雌蝇是否为野生型，雄蝇是否全为三隐性，若不是，表明处女蝇是非处女蝇，实验失败。5.F1正交选8对F1雌雄蝇麻醉，转入新的培养瓶，进行正交，贴好标签。6.放飞F18天后赶去F1。7.观察F212天后，F2羽化，将其麻醉后于白瓷板上用放大镜观察，或用解剖镜、显微镜观察各种表型的果蝇并统计数目，每隔2天观察一次，连续4次。统计后的果蝇倒入死蝇盛留器中。五、实验结果、分析和讨论结果记录表一正交F1代果蝇的性状时间正交（白眼♀×红眼♂）红眼♀白眼♂10月24日8310月25日241610月26日425310月28日3434总数110106比例51%49%表二正交F2代的性状时间正

5、交F2红眼♀白眼♂红眼♂白眼♀10月30日210411月2日554611月4日1810161211月6日27202423总数52364445比例29%20%25%26%从以上表一，表二可知正交试验中F1红眼果蝇的数量和白眼果蝇的数量之比为1:1，正交试验中F2雌性果蝇和雄性果蝇之比为1:1且红眼果蝇与白眼果蝇数量之比也是1:1表三正交组合F2的数据分析正交组合F2红眼♂红眼♀白眼♂白眼♀合计实际观察数（O）44523645177理论预期数（C）45454545180离均差（O-C）-17-90-3（O-C）2/C0.02221.08891.802.9111查卡方表，自由度N=4-1=3，

6、卡方值为2.9111，0.250＜P＜0.500，表明实验结果与理论数无显著差异，实验值符合理论值。表四“三点测交试验”中观察的记录测交后代表现型基因型统计日期总数比例基因间是否发生交换10.3011.0211.0411.06w-sn3sn3-mw-mwsn3m46122951白眼焦刚毛小翅65.0%红眼直刚毛长翅+++27223364白眼直刚毛长翅w++02791819.2%√√红眼焦刚毛小翅+sn3m1041116红眼焦刚毛长翅+sn3+011244.0%√√白眼直刚毛小翅w+m02013红眼直刚毛小翅++m01651211.8%√√白眼焦刚毛长翅wsn3+11349总计820559

7、1177100%交换值23.2%15.8%31.0%分析正交图谱分析正交P：XWXw（雌红眼）×XwY（雄白眼）F1:XWXw(雌红眼)XWY（雄红眼）理论：1：1实际：110：106F2：XWXwXwXwXWYXwY雌红眼雌白眼雄红眼雄白眼理论1：1：1：1实际52454436图1正交F1和F2的图谱分析从以上图谱分析可知正交试验中F1红眼果蝇的数量和白眼果蝇的数量之比为1:1，正交试验中F2雌性果蝇和雄性果蝇之比为1:1且红眼果